【实验步骤】验室的具体情况来讨论实验方案的可行性。所需试剂仪器4.同学们单独完成实验，如个别同学实验失败，需重新再在空余时间完成实验，知道实验成功为止设计方案
验室的具体情况来讨论实验方案的可行性。 所需试剂仪器。 4.同学们单独完成实验，如个别同学实验失败，需重新 设计方案，再在空余时间完成实验，知道实验成功为止。 【实验步骤】
实验二黑曲霉产木聚糖酶液态发酵工艺的优化【实验目的）学习用正交设计的方法进行发酵工艺的优化实验原理）发酵培养基的优化一般可通过下面的步骤进行。根据前人的经验和培养基成分确定时一些必须考虑的问题，初步确定可能的培养基成分；通过单因子实验最终确定出最为适宜的培养基成分；当培养基成分确定后，剩下的问题就是各成分最适的浓度，由于培养基成分很多，为减少实验次数常采用一些合理的实验设计方法
实验二 黑曲霉产木聚糖酶液态 发酵工艺的优化 学习用正交设计的方法进行发酵工艺的优化 发酵培养基的优化一般可通过下面的步骤进行。根据 前人的经验和培养基成分确定时一些必须考虑的问题，初 步确定可能的培养基成分；通过单因子实验最终确定出最 为适宜的培养基成分；当培养基成分确定后，剩下的问题 就是各成分最适的浓度，由于培养基成分很多，为减少实 验次数常采用一些合理的实验设计方法。 【实验目的】 【实验原理】
【实验步骤】设计4因1.同学们根据实验指导书上提供的因素水平表，素3水平的正交实验；并根据正交实验安排，全班分9各组每个组做一个实验号。2.每个组同学，根据正交实验安排表所对应的试验号的因素水平，配制培养基，培养基灭菌冷却后接入一环黑曲霉孢子，于30℃、150转/分钟下培养3天3.发酵结束后，用纱布过滤，收集发酵液，并测定发酵液的木聚糖酶酶活
1.同学们根据实验指导书上提供的因素水平表，设计4因 素3水平的正交实验；并根据正交实验安排，全班分9各组， 每个组做一个实验号。 2.每个组同学，根据正交实验安排表所对应的试验号 的因素水平，配制培养基，培养基灭菌冷却后接入一环 黑曲霉孢子，于30℃、150转/分钟下培养3天 3.发酵结束后，用纱布过滤，收集发酵液，并测定发酵 液的木聚糖酶酶活 【实验步骤】
（实验步骤）4.木聚糖酶酶活测定(1)酶活定义以木聚糖为底物，在40℃，pH4.6的条件下，每小时酶解产生1mg木糖定义为一个酶活力单位，单位为u/mL。(2)标准曲线的制作分别吸取木糖标准液0、0.20、0.40、0.60、0.80、1.00、1.20mL，依次加入7支50mL比色管中，以蒸馏水补加到2.00mL，再各加入DNS试剂1.50mL，在沸水中煮5分钟，冷水冷却后，用蒸馏水定容至25mL，摇匀，在540nm处用空白管溶液调零点，记录其吸光度值。以木糖的质量和相对应的吸光值计算回归方程
4.木聚糖酶酶活测定 （1）酶活定义 以木聚糖为底物，在40 ℃，pH4.6的条件下，每小 时酶解产生1mg木糖定义为一个酶活力单位，单位为 u/mL。 （2）标准曲线的制作 分别吸取木糖标准液0、0.20、0.40、0.60、0.80、1.00、 1.20 mL，依次加入7支50 mL比色管中，以蒸馏水补加到 2.00 mL，再各加入DNS试剂1.50 mL，在沸水中煮5分钟， 冷水冷却后，用蒸馏水定容至25 mL，摇匀，在540 nm处， 用空白管溶液调零点，记录其吸光度值。以木糖的质量和 相对应的吸光值计算回归方程。 【实验步骤】
(3）酶活测定将稀释好待测酶液加1mL于25mL比色管中，然后放入40℃的恒温水浴锅中保温5分钟，加入1mL木聚糖溶液保温30分钟，使酶与底物充分反应，之后加入1.5mLDNS试剂中止反应。对照管先加1mL待测酶液，再加1.5摇匀，使酶液失活，然后再加1mL木聚糖溶液mLDNS,同上面的一起迅速放入沸水中水浴5分钟进行显色反应取出后，用蒸馏水定容到25mL，充分混匀后于分光光度计上在540nm处测定其吸光值。并计算酶活大小。4.全班9组同学把每组实验结果汇总，并根据汇总的结果，进行正交实验分析，确定培养基最佳配方
（3）酶活测定 将稀释好待测酶液加1mL于25 mL比色管中，然后放 入40℃的恒温水浴锅中保温5分钟，加入 1 mL木聚糖溶液， 保温30分钟，使酶与底物充分反应，之后加入1.5 mL DNS试剂中止反应。对照管先加1 mL待测酶液，再加1.5 mLDNS，摇匀，使酶液失活，然后再加1 mL木聚糖溶液， 同上面的一起迅速放入沸水中水浴5分钟进行显色反应， 取出后，用蒸馏水定容到25 mL，充分混匀后于分光光度 计上在540nm处测定其吸光值。并计算酶活大小。 4. 全班9组同学把每组实验结果汇总，并根据汇总的结 果，进行正交实验分析，确定培养基最佳配方