功能学科实验教程 的毛,再用干纱布将水擦干,涂上一层油脂。一般脱过被毛部位的皮肤很少发生皮肤 充血、炎症等现象。脱毛部位被毛在脱毛前一定不要用水洗,以免因水洗后,脱毛剂 会渗透入皮肤毛根里,刺激皮肤,造成皮肤炎症等变化。 手术 功能学科实验中常用的手术有以下几种: 1.皮肤切开动物麻醉固定后,用粗剪刀(家用剪)贴住皮肤剪去手术部位毛 发(不要拎起毛发剪,这样会剪到皮肤),在切口沿线的中点两侧旁开各0.5cm处 分别用血管钳侧夹起皮肤,并向两侧拉开、提起使成“一”字型皱褶,用手术剪在皱 褶中点的皮肤上剪一小口,将剪刀并拢伸进切口,使剪刀宽面贴住皮肤内面并挑起 然后撑开剪刀,以使皮肤和皮下组织分离(此即为钝性分离方法)。在皮肤与皮下组 织分离后,再用剪刀刀刃沿切口线水平地挑起皮肤(忌剪刀尖向下,以避免伤及皮下 组织和血管)再行剪开,剪至切口的一侧终点后,向反方向作同样操作,直至达到切 口要求的长度。钝性分离下面的组织,尤其是肌肉组织,勿使用剪刀以免出血。 2.颈部手术颈部手术主要包括气管插管、颈动脉插管、颈外静脉插管和分离 颈部神经等 (1)气管插管术(家兔):动物取仰卧位,按上述皮肤切开方法,自喉部下缘至 胸骨柄上缘,沿颈部正中作一5~7cm长的切口,钝性分离皮下组织,于正中线分开 肌肉,暴露并游离出一段气管,剥离干净气管表面的筋膜组织(否则剪口时易出血, 且血液会流入气管影响呼吸),于气管下穿较粗的棉线备用:在甲状软骨下约lcm处 剪一“⊥”型切口,插入“Y”形气管插管,注意插管插入时应使插入端的斜口向下, 插入2~3cm后将插管旋转180度,使插入端的斜口向上,并用先前穿好的备用线扎 紧,再将余线绕气管插管的分叉处扎紧打结,以防滑脱。 (2)颈动脉插管(家兔):将上述切口边缘的皮肤连带下方的肌肉组织向外侧拉 开,即可见在气管两侧纵行的左、右颈总动脉鞘,在鞘内,颈总动脉与颈静脉、颈迷 走神经、降压神经伴行在一起。应先将颈总动脉鞘分离出来,再从鞘内分离出颈总动 脉,剥尽周围结缔组织和筋膜,游离出长3~4cm的颈总动脉,尽可能向远心端游离; 在动脉下穿2根结扎线,用其中一根结扎远心端,用动脉夹夹住其近心端,结扎处与 动脉夹夹闭间的颈总动脉长度约需3cm。用眼科镊柄垫在颈总动脉下方,用眼科剪在 远心端结扎线的近心侧0.2~03cm处的动脉壁上作一向心方向的斜切口,切口约为 管径的一半。取一动脉导管,事先在距导管口上方15cm处裹贴一圈胶布,将动脉导 管充满肝素溶液,并注意排尽管内气体,将管尖由切口向心脏方向插入动脉内。用已
功 能 学 科 实 验 教 程 ——————————————————— ——————————————————— 22 的毛,再用干纱布将水擦干,涂上一层油脂。一般脱过被毛部位的皮肤很少发生皮肤 充血、炎症等现象。脱毛部位被毛在脱毛前一定不要用水洗,以免因水洗后,脱毛剂 会渗透入皮肤毛根里,刺激皮肤,造成皮肤炎症等变化。 二、手 术 功能学科实验中常用的手术有以下几种: 1.皮肤切开 动物麻醉固定后,用粗剪刀(家用剪)贴住皮肤剪去手术部位毛 发(不要拎起毛发剪,这样会剪到皮肤),在切口沿线的中点两侧旁开各 0.5cm 处, 分别用血管钳侧夹起皮肤,并向两侧拉开、提起使成“一”字型皱褶,用手术剪在皱 褶中点的皮肤上剪一小口,将剪刀并拢伸进切口,使剪刀宽面贴住皮肤内面并挑起, 然后撑开剪刀,以使皮肤和皮下组织分离(此即为钝性分离方法)。在皮肤与皮下组 织分离后,再用剪刀刀刃沿切口线水平地挑起皮肤(忌剪刀尖向下,以避免伤及皮下 组织和血管)再行剪开,剪至切口的一侧终点后,向反方向作同样操作,直至达到切 口要求的长度。钝性分离下面的组织,尤其是肌肉组织,勿使用剪刀以免出血。 2.颈部手术 颈部手术主要包括气管插管、颈动脉插管、颈外静脉插管和分离 颈部神经等。 (1)气管插管术(家兔):动物取仰卧位,按上述皮肤切开方法,自喉部下缘至 胸骨柄上缘,沿颈部正中作一 5~7cm 长的切口,钝性分离皮下组织,于正中线分开 肌肉,暴露并游离出一段气管,剥离干净气管表面的筋膜组织(否则剪口时易出血, 且血液会流入气管影响呼吸),于气管下穿较粗的棉线备用;在甲状软骨下约 1cm 处 剪一“⊥”型切口,插入“Y”形气管插管,注意插管插入时应使插入端的斜口向下, 插入 2~3cm 后将插管旋转 180 度,使插入端的斜口向上,并用先前穿好的备用线扎 紧,再将余线绕气管插管的分叉处扎紧打结,以防滑脱。 (2)颈动脉插管(家兔):将上述切口边缘的皮肤连带下方的肌肉组织向外侧拉 开,即可见在气管两侧纵行的左、右颈总动脉鞘,在鞘内,颈总动脉与颈静脉、颈迷 走神经、降压神经伴行在一起。应先将颈总动脉鞘分离出来,再从鞘内分离出颈总动 脉,剥尽周围结缔组织和筋膜,游离出长 3~4cm 的颈总动脉,尽可能向远心端游离; 在动脉下穿 2 根结扎线,用其中一根结扎远心端,用动脉夹夹住其近心端,结扎处与 动脉夹夹闭间的颈总动脉长度约需 3cm。用眼科镊柄垫在颈总动脉下方,用眼科剪在 远心端结扎线的近心侧 0.2~0.3cm 处的动脉壁上作一向心方向的斜切口,切口约为 管径的一半。取一动脉导管,事先在距导管口上方 1.5cm 处裹贴一圈胶布,将动脉导 管充满肝素溶液,并注意排尽管内气体,将管尖由切口向心脏方向插入动脉内。用已
功能学科实验教程 穿好的线在动脉切口的近心侧05cm处扎紧血管,并将剩余线段沿导管平行拉直,在 平齐于胶布圈的远心缘用血管钳夹住双线段,在此处将两根线相互打一死结(此结应 与胶布圈的远心缘平齐),再将余线绕在胶布圈远心侧的导管上打结固定,以藉此线 段拉住导管防止其滑脱。使动脉插管与动脉保持在同一直线上,然后将动脉导管作适 当固定。注意保持动脉插管的通畅 (3)分离迷走神经、交感神经、降压神经(家兔):迷走神经、交感神经和降 压神经与颈总动脉伴行,行走于同一颈总动脉鞘内。仔细辨认三条神经,颈迷走神经 最粗,颈交感神经次之,降压神经最细,且常与颈交感神经紧贴在一起,一般位于迷 走和交感神经之间。通常最先用玻璃分针分离最细的降压神经,然后分离颈迷走神经、 交感神经和颈总动脉。每根神经、血管分离出3~4cm长,并在各神经、血管下穿 条不同颜色的细丝线备用。 3.家兔腹部手术主要用于分离膈肌、肠系膜微循环观察和作输尿管插管术等。 (1)膈肌暴露术:动物取仰卧位,剪去胸腹部交界处手术部位兔毛,摸到剑突 后,在其表面沿正中线纵行切开皮肤2~3cm(切口不宜过大,以免内脏涌出),用止 血钳分离皮下组织及腹壁肌,暴露剑突。将剑突轻轻拉出,剪去其上牵连的筋膜,将 剑突向头端方向拎起,即可见剑突背侧的膈肌 (2)肠系膜微循环观察术:于耻骨联合上约2cm处起,向上沿腹白线作一长5 6cm的切口,逐层分离进入腹腔,推开粗大深灰色的盲肠,找到回盲部,此处有一灰 白色的圆形球囊,称圆小囊;或直接找到粗大(直径约15cm,长约7~8cm)、光滑 无皱褶、实质感强、呈灰红色、末端为盲端的阑尾(又称引突)。选取由阑尾通过筋 膜牵连着的、由其盲端指向的一段小肠,此处肠系膜长,脂肪少,血管丰富,便于微 循环观察。将此段小肠暂置腹腔外,将其余肠子纳回腹腔,用血管钳夹闭肠段两侧的 皮肤切口。将此段小肠的系膜展开,平铺于肠系膜灌流盒中的载物台上,用于肠系膜 微循环观察。 (3)输尿管插管术:在耻骨联合上缘沿腹部正中线向上作5cm长的纵行皮肤切 口,沿腹白线切开腹腔,将膀胱慢慢移岀体外,暴露膀胱三角,仔细辨认输尿管,将 一侧输尿管与周围组织轻轻分离。穿双线备用,先用一根线结扎输尿管近膀胱端,在 结扎处近肾侧的输尿管上剪一斜切口,切口约为管径一半,把充满01%肝素溶液的 细塑料管向肾脏方向插入输尿管内,并结扎固定,随后可见尿液从细塑料管内慢慢逐 滴流出。术毕用浸润温热生理盐水(38℃左右)的纱布覆盖腹部切口,以保持腹腔内 温度。 4.家兔腹股沟手术主要用于作股动脉或股静脉插管。股动脉和股静脉插管与 颈动脉插管类似,所不同的是位置的区别。先在大腿根部近腹股沟处摸到股动脉搏动 23
功 能 学 科 实 验 教 程 ——————————————————— ——————————————————— 23 穿好的线在动脉切口的近心侧 0.5cm 处扎紧血管,并将剩余线段沿导管平行拉直,在 平齐于胶布圈的远心缘用血管钳夹住双线段,在此处将两根线相互打一死结(此结应 与胶布圈的远心缘平齐),再将余线绕在胶布圈远心侧的导管上打结固定,以藉此线 段拉住导管防止其滑脱。使动脉插管与动脉保持在同一直线上,然后将动脉导管作适 当固定。注意保持动脉插管的通畅。 (3)分离迷走神经、交感神经、降压神经(家兔):迷走神经、交感神经和降 压神经与颈总动脉伴行,行走于同一颈总动脉鞘内。仔细辨认三条神经,颈迷走神经 最粗,颈交感神经次之,降压神经最细,且常与颈交感神经紧贴在一起,一般位于迷 走和交感神经之间。通常最先用玻璃分针分离最细的降压神经,然后分离颈迷走神经、 交感神经和颈总动脉。每根神经、血管分离出 3~4cm 长,并在各神经、血管下穿一 条不同颜色的细丝线备用。 3.家兔腹部手术 主要用于分离膈肌、肠系膜微循环观察和作输尿管插管术等。 (1)膈肌暴露术:动物取仰卧位,剪去胸腹部交界处手术部位兔毛,摸到剑突 后,在其表面沿正中线纵行切开皮肤 2~3cm(切口不宜过大,以免内脏涌出),用止 血钳分离皮下组织及腹壁肌,暴露剑突。将剑突轻轻拉出,剪去其上牵连的筋膜,将 剑突向头端方向拎起,即可见剑突背侧的膈肌。 (2)肠系膜微循环观察术:于耻骨联合上约 2cm 处起,向上沿腹白线作一长 5~ 6cm 的切口,逐层分离进入腹腔,推开粗大深灰色的盲肠,找到回盲部,此处有一灰 白色的圆形球囊,称圆小囊;或直接找到粗大(直径约 1.5cm,长约 7~8cm)、光滑 无皱褶、实质感强、呈灰红色、末端为盲端的阑尾(又称引突)。选取由阑尾通过筋 膜牵连着的、由其盲端指向的一段小肠,此处肠系膜长,脂肪少,血管丰富,便于微 循环观察。将此段小肠暂置腹腔外,将其余肠子纳回腹腔,用血管钳夹闭肠段两侧的 皮肤切口。将此段小肠的系膜展开,平铺于肠系膜灌流盒中的载物台上,用于肠系膜 微循环观察。 (3)输尿管插管术:在耻骨联合上缘沿腹部正中线向上作 5cm 长的纵行皮肤切 口,沿腹白线切开腹腔,将膀胱慢慢移出体外,暴露膀胱三角,仔细辨认输尿管,将 一侧输尿管与周围组织轻轻分离。穿双线备用,先用一根线结扎输尿管近膀胱端,在 结扎处近肾侧的输尿管上剪一斜切口,切口约为管径一半,把充满 0.l%肝素溶液的 细塑料管向肾脏方向插入输尿管内,并结扎固定,随后可见尿液从细塑料管内慢慢逐 滴流出。术毕用浸润温热生理盐水(38℃左右)的纱布覆盖腹部切口,以保持腹腔内 温度。 4.家兔腹股沟手术 主要用于作股动脉或股静脉插管。股动脉和股静脉插管与 颈动脉插管类似,所不同的是位置的区别。先在大腿根部近腹股沟处摸到股动脉搏动
功能学科实验教程 点,局部剪毛,以搏动最明显处为中点沿血管走行的方向作长约4cm的切口。股动 脉、股静脉、股神经行走于同一鞘内,位置比较表浅,切开皮肤后,即能隐约见到与 大腿纵轴平行、行走于筋膜下的股动脉鞘。细心挑开筋膜,注意勿损伤下面的血管和 神经,先完整挑出股动脉鞘,再在鞘下方垫以撑开的镊子或血管钳,用玻璃分针小心 地逐根进行分离。其余方法与颈动脉插管相同 5.制备蟾蜍坐骨神经、腓神经标本 (1)破坏脑和脊髓:左手持蟾蜍,腹部向下,中指在下向腹部压住双上肢,小 指在上压住双下肢(夹在小指和无名指之间),用拇指压住背部,用食指向下压住其 吻部,使头与躯体成一定角度,充分暴露枕骨大孔部。用探针针尖沿头背部正中向下 滑动,在两侧耳后缘连线前约3mm处可触到一条横沟,将探针于横沟中央处经枕骨 大孔向前刺入颅腔,探针向前稍向下左右搅动破坏脑。检验脑己破坏的标志是蟾蜍的 角膜反射消失。然后将探针回抽至枕骨大孔,再转向后方插进椎管,边向尾椎推进边 捻转,以损毁脊髓。如脊髓功能被完全破坏,则动物的四肢瘫软。 (2)制备粗制标本:在蟾蜍的骶髂关节水平以上1cm处,用粗剪刀(家用剪) 的一个尖端刺穿脊柱两侧皮肤,剪断脊柱,并将头和前肢连同所有内脏剪去。用左手 拇指及食指夹住脊柱,右手由断面开始将皮肤与肌肉分离,向趾端方向剥去皮肤。用 镊子提起泄殖孔部组织,用粗剪刀由泄殖孔处向上剪去尾骨,暴露左右两束坐骨神经 避开坐骨神经,用粗剪刀从背侧剪去骶骨,然后沿中线将脊柱剪成左右两半,再从耻 骨联合中央剪开。将已分离的粗标本浸入任氏液中备用。 (3)分离坐骨神经和腓神经:将上述粗制标本俯置于蛙板上,用蛙钉固定后肢 趾端及脊柱,再在其下肢股部背侧二头肌和半膜肌之间,用玻璃针分离出坐骨神经, 分离方向应由中枢端向外周。坐骨神经完全暴露后,用线在靠近脊柱处将坐骨神经结 扎,提起结扎线,将根端剪断。轻轻提起结扎线(使相连的坐骨神经干呈松弛状态, 切忌紧拉神经以免神经受损),用眼科剪逐一剪断坐骨神经分支,游离并取下坐骨神 经和与之相连的腓浅神经。分离过程中,操作必须精细,切忌用力牵拉和钳夹神经 神经标本尽可能长些,离体的神经忌用金属物品触碰。将神经干置于标本槽的电极上 盖上盖板,以防神经干燥 6.分离豚鼠坐骨神经、颅骨钻孔 (1)豚鼠麻醉后取俯卧位,剪去手术部位毛发,在右后肢沿大腿后外側纵轴切 开皮肤,于股二头肌和半膜肌之间找到坐骨神经并用玻璃分针将其分离,穿线,然后 将分离的坐骨神经置于保护电极上。 (2)剪去豚鼠头顶部毛发,在头顶正中纵向切开豚鼠头皮,暴露颅骨,用刀柄 钝性分离骨膜,暴露颅骨缝,用颅骨钻在冠状缝与矢状缝交界处左后外侧,离冠状缝
功 能 学 科 实 验 教 程 ——————————————————— ——————————————————— 24 点,局部剪毛,以搏动最明显处为中点沿血管走行的方向作长约 4cm 的切口。股动 脉、股静脉、股神经行走于同一鞘内,位置比较表浅,切开皮肤后,即能隐约见到与 大腿纵轴平行、行走于筋膜下的股动脉鞘。细心挑开筋膜,注意勿损伤下面的血管和 神经,先完整挑出股动脉鞘,再在鞘下方垫以撑开的镊子或血管钳,用玻璃分针小心 地逐根进行分离。其余方法与颈动脉插管相同。 5.制备蟾蜍坐骨神经、腓神经标本 (1)破坏脑和脊髓:左手持蟾蜍,腹部向下,中指在下向腹部压住双上肢,小 指在上压住双下肢(夹在小指和无名指之间),用拇指压住背部,用食指向下压住其 吻部,使头与躯体成一定角度,充分暴露枕骨大孔部。用探针针尖沿头背部正中向下 滑动,在两侧耳后缘连线前约 3mm 处可触到一条横沟,将探针于横沟中央处经枕骨 大孔向前刺入颅腔,探针向前稍向下左右搅动破坏脑。检验脑己破坏的标志是蟾蜍的 角膜反射消失。然后将探针回抽至枕骨大孔,再转向后方插进椎管,边向尾椎推进边 捻转,以损毁脊髓。如脊髓功能被完全破坏,则动物的四肢瘫软。 (2)制备粗制标本:在蟾蜍的骶髂关节水平以上 1cm 处,用粗剪刀(家用剪) 的一个尖端刺穿脊柱两侧皮肤,剪断脊柱,并将头和前肢连同所有内脏剪去。用左手 拇指及食指夹住脊柱,右手由断面开始将皮肤与肌肉分离,向趾端方向剥去皮肤。用 镊子提起泄殖孔部组织,用粗剪刀由泄殖孔处向上剪去尾骨,暴露左右两束坐骨神经。 避开坐骨神经,用粗剪刀从背侧剪去骶骨,然后沿中线将脊柱剪成左右两半,再从耻 骨联合中央剪开。将已分离的粗标本浸入任氏液中备用。 (3)分离坐骨神经和腓神经:将上述粗制标本俯置于蛙板上,用蛙钉固定后肢 趾端及脊柱,再在其下肢股部背侧二头肌和半膜肌之间,用玻璃针分离出坐骨神经, 分离方向应由中枢端向外周。坐骨神经完全暴露后,用线在靠近脊柱处将坐骨神经结 扎,提起结扎线,将根端剪断。轻轻提起结扎线(使相连的坐骨神经干呈松弛状态, 切忌紧拉神经以免神经受损),用眼科剪逐一剪断坐骨神经分支,游离并取下坐骨神 经和与之相连的腓浅神经。分离过程中,操作必须精细,切忌用力牵拉和钳夹神经。 神经标本尽可能长些,离体的神经忌用金属物品触碰。将神经干置于标本槽的电极上, 盖上盖板,以防神经干燥。 6.分离豚鼠坐骨神经、颅骨钻孔 (1)豚鼠麻醉后取俯卧位,剪去手术部位毛发,在右后肢沿大腿后外側纵轴切 开皮肤,于股二头肌和半膜肌之间找到坐骨神经并用玻璃分针将其分离,穿线,然后 将分离的坐骨神经置于保护电极上。 (2)剪去豚鼠头顶部毛发,在头顶正中纵向切开豚鼠头皮,暴露颅骨,用刀柄 钝性分离骨膜,暴露颅骨缝,用颅骨钻在冠状缝与矢状缝交界处左后外侧,离冠状缝
功能学科实验教程 略后的位置钻一圆孔(钻孔时切忌用力过猛,以免损伤皮层影响电位引导),暴露 侧大脑体感区皮层。 第六节实验动物的采血方法 常见实验动物的最大安全采血量与最小致死采血量见表3-6-1。一次采血过多或 连续多次采血都可影响动物健康,造成贫血或导致死亡,须予注意。 表3-6-1实验动物的采血量 动物种类 最大安全采血量(m1) 最小致死采血量(ml) 0.1 大鼠 5 家兔 10 大鼠、小鼠的采血法 1.尾尖取血当所需血量很少时采用本法。固定动物并露出鼠尾,将鼠尾在45 ℃温水中浸泡数分钟,也可用二甲苯等化学药物涂擦,使尾部血管扩张。将鼠尾擦干, 剪去尾尖,血自尾尖流出,让血液滴入盛器或直接用移液器吸取。如需间隔一定时间, 多次采取鼠尾尖部血液,每次采血时,将鼠尾剪去很小一段,取血后,先用棉球压迫 止血并立即用6%液体火棉胶涂于尾巴伤口处,使伤口外结一层火棉胶薄膜,保护伤 口。也可采用切割尾静脉的方法采血,三根尾静脉可交替切割,并自尾尖向尾根方向 切割,每次可取02~0.3m血,切割后用棉球压迫止血(图3-6-1)。这种采血方法在 大鼠进行较好,可以较长的间隔时间连续取血,进行血常规检査。 图3-6-1鼠尾静脉取血法
功 能 学 科 实 验 教 程 ——————————————————— ——————————————————— 25 略后的位置钻一圆孔(钻孔时切忌用力过猛,以免损伤皮层影响电位引导),暴露一 侧大脑体感区皮层。 第六节 实验动物的采血方法 常见实验动物的最大安全采血量与最小致死采血量见表 3-6-1。一次采血过多或 连续多次采血都可影响动物健康,造成贫血或导致死亡,须予注意。 表 3-6-1 实验动物的采血量 动物种类 最大安全采血量(m1) 最小致死采血量(ml) 小鼠 0.1 0.3 大鼠 1 2 豚鼠 5 10 家兔 10 40 狗 50 300 猴 15 60 一、大鼠、小鼠的采血法 1.尾尖取血 当所需血量很少时采用本法。固定动物并露出鼠尾,将鼠尾在 45 ℃温水中浸泡数分钟,也可用二甲苯等化学药物涂擦,使尾部血管扩张。将鼠尾擦干, 剪去尾尖,血自尾尖流出,让血液滴入盛器或直接用移液器吸取。如需间隔一定时间, 多次采取鼠尾尖部血液,每次采血时,将鼠尾剪去很小一段,取血后,先用棉球压迫 止血并立即用 6%液体火棉胶涂于尾巴伤口处,使伤口外结一层火棉胶薄膜,保护伤 口。也可采用切割尾静脉的方法采血,三根尾静脉可交替切割,并自尾尖向尾根方向 切割,每次可取 0.2~0.3ml 血,切割后用棉球压迫止血(图 3-6-1)。这种采血方法在 大鼠进行较好,可以较长的间隔时间连续取血,进行血常规检查。 图 3-6-1 鼠尾静脉取血法
功能学科实验教程 2.眼眶后静脉丛取血当需中等量的血液,而又需避免动物死亡时采用此法。 用左手固定鼠,尽量捏紧头部皮肤,使头固定,并轻轻向下压迫颈部两侧,引起头部 静脉血液回流困难,使眼球充分外突(使眼眶后静脉丛充血),右手持毛细玻璃管, 沿内眦眼眶后壁向喉头方向旋转刺入(图3-6-2)。刺入深度小鼠2~3mm,大鼠4-5mm。 当感到有阻力时再稍后退,保持水平位,稍加吸引,由于血压的关系,血液即流入玻 璃管中。得到所需的血量后,拔出毛细管。若手法恰当,小鼠约可采血02~0.3ml, 大鼠约可采血04~06ml。 图3-6-2鼠眼眶取血法 3.断头取血当需要较大量的血液,而又不需继续保存动物生命时采用此法 左手捉持动物,使其头略向下倾,右手持剪刀猛力剪掉鼠头,让血液滴入盛器。小鼠 可采血0.8~10ml,大鼠可采用5-8ml 4.眶动脉和眶静脉取血此法既能采取较大量的血液,又可避免断头取血法中 因组织液的混入导致溶血的现象,现常取代断头取血法。先使动物眼球突出充血后, 以弯头眼科镊迅速钳取眼球,并将鼠倒置,头向下,眼眶内很快流出血液,让血液滴 入盛器,直至不流为止。此法由于取血过程中动物未死,心脏不断在跳动,因此取血 量比断头法多,一般可取鼠体重4-5%的血液量,是一种较好的取血方法。 5.心脏取血动物仰卧固定在固定板上,剪去心前区部位的被毛,用碘酒酒精 消毒皮肤。在左侧第3~4肋间,用左手食指摸到心搏处,右手取连有4~-5号针头的注 射器,选择心搏最强处穿刺,当针刺入心脏时,血液由于心脏跳动的力量自动进入注 射器。此法要求实验者掌握以下要点:要迅速而直接插入心脏,否则,心脏将从针尖 处滑脱;如第一次没刺准,将针头抽出重刺,不要在心脏周围乱探,以免损伤心、肺 要缓慢而稳定的抽吸,否则,太多的真空反而使心脏塌陷。若不需保留动物生命时 也可麻醉后切开动物胸部,将注射器直接刺入心脏抽吸血液。 6.大血管取血大、小鼠还可从颈动、静脉、股动、静脉和腋下动、静脉取血
功 能 学 科 实 验 教 程 ——————————————————— ——————————————————— 26 2.眼眶后静脉丛取血 当需中等量的血液,而又需避免动物死亡时采用此法。 用左手固定鼠,尽量捏紧头部皮肤,使头固定,并轻轻向下压迫颈部两侧,引起头部 静脉血液回流困难,使眼球充分外突(使眼眶后静脉丛充血),右手持毛细玻璃管, 沿内眦眼眶后壁向喉头方向旋转刺入(图 3-6-2)。刺入深度小鼠 2~3mm,大鼠 4~5mm。 当感到有阻力时再稍后退,保持水平位,稍加吸引,由于血压的关系,血液即流入玻 璃管中。得到所需的血量后,拔出毛细管。若手法恰当,小鼠约可采血 0.2~0.3ml, 大鼠约可采血 0.4~0.6ml。 图 3-6-2 鼠眼眶取血法 3.断头取血 当需要较大量的血液,而又不需继续保存动物生命时采用此法。 左手捉持动物,使其头略向下倾,右手持剪刀猛力剪掉鼠头,让血液滴入盛器。小鼠 可采血 0.8~1.0ml,大鼠可采用 5~8ml。 4.眶动脉和眶静脉取血 此法既能采取较大量的血液,又可避免断头取血法中 因组织液的混入导致溶血的现象,现常取代断头取血法。先使动物眼球突出充血后, 以弯头眼科镊迅速钳取眼球,并将鼠倒置,头向下,眼眶内很快流出血液,让血液滴 入盛器,直至不流为止。此法由于取血过程中动物未死,心脏不断在跳动,因此取血 量比断头法多,一般可取鼠体重 4~5%的血液量,是一种较好的取血方法。 5.心脏取血 动物仰卧固定在固定板上,剪去心前区部位的被毛,用碘酒酒精 消毒皮肤。在左侧第 3~4 肋间,用左手食指摸到心搏处,右手取连有 4~5 号针头的注 射器,选择心搏最强处穿刺,当针刺入心脏时,血液由于心脏跳动的力量自动进入注 射器。此法要求实验者掌握以下要点:要迅速而直接插入心脏,否则,心脏将从针尖 处滑脱;如第一次没刺准,将针头抽出重刺,不要在心脏周围乱探,以免损伤心、肺; 要缓慢而稳定的抽吸,否则,太多的真空反而使心脏塌陷。若不需保留动物生命时, 也可麻醉后切开动物胸部,将注射器直接刺入心脏抽吸血液。 6.大血管取血 大、小鼠还可从颈动、静脉、股动、静脉和腋下动、静脉取血