(三)含量或效价测定1.微生物检定法本法系在适宜条件下,根据量反应平行线原理设计,通过检测抗生素对微生物的抑制作用,计算抗生素活性(效价)的方法。测定法可分为管碟法和浊度法:管碟法是利用抗生素在琼脂培养基内的扩散作用比较标准品与供试品两者对接种的试验菌产生抑菌圈的关小,以测定供试品效价的种芳法。浊度法是利用抗生素在液体培养基中对试验菌生长的抑制作用,通过测定培养后细菌浊度值的大小比较标准品与供试品对试验菌生长抑制的程度,以测定供试品效价的一种方法
(三) 含量或效价测定 1. 微生物检定法 本法系在适宜条件下,根据量 反应平行线原理设计,通过检测抗生素对微生物的 抑制作用,计算抗生素活性(效价)的方法。测定方 法可分为管碟法和浊度法: 管碟法是利用抗生素在琼脂培养基内的扩散作用, 比较标准品与供试品两者对接种的试验菌产生抑菌 圈的大小,以测定供试品效价的一种方法。 浊度法是利用抗生素在液体培养基中对试验菌生长 的抑制作用,通过测定培养后细菌浊度值的大小, 比较标准品与供试品对试验菌生长抑制的程度,以 测定供试品效价的一种方法
微生物检定法的优点是灵敏度高、需用量小,测定结果较直观;测定原理与临床应用的要求一致,更能确定抗生素的医疗价值:而且适用范围广,较纯的精制品、纯度较差的制品、已知的或新发现的抗生素均能应用;对同一类型的抗生素不需分离,可一次测定其总效价,是抗生素药物效价测定的最基本的方法。但其存在着操作步骤多,测定时间长,误差大等缺点,随着抗生素类药物的发展和分析方法的进步,理化方法逐渐取代了生物学法,但对于分子结构复杂、多组分的抗生素,生物学法仍然是首选的效价测定方法
微生物检定法的优点是灵敏度高、需用量小,测定结 果较直观;测定原理与临床应用的要求一致,更能确定抗 生素的医疗价值;而且适用范围广,较纯的精制品、纯度 较差的制品、已知的或新发现的抗生素均能应用;对同一 类型的抗生素不需分离,可一次测定其总效价,是抗生素 药物效价测定的最基本的方法。 但其存在着操作步骤多,测定时间长,误差大等缺点, 随着抗生素类药物的发展和分析方法的进步,理化方法逐 渐取代了生物学法,但对于分子结构复杂、多组分的抗生 素,生物学法仍然是首选的效价测定方法
2.理化方法是根据抗生素的分子结构特点,利用其特有的化学或物理化学性质及反应而进行的。对于提纯的产品以及化学结构已确定的抗生素,能较迅速、准确地测定其效价并具有较高的专属性。但本法也存在不足:如化学法通常是利用抗生素化学结构上官能团的特殊化学反应,对含有具同样官能团杂质的供试品就不适用,或需采取适当方法加以校正。而且当该法是利用某一类型抗生素的共同结构部分的反应时,所测得的结果,往往只能代表药物的总含量,并不一定能代表抗生素的生物效价。因此,通常在以理化方法测定抗生素含量时,不但要求方法正确可靠、具有专属性、操作简单、省时、试剂易得、样品用量少,而且要求测定结果必须与生物效价吻合。目前世界各国药典所收载的抗生素的理化方法主要是HPLC法,如β-内酰胺类、四环素类、大环内酯类等抗生素大多采用HPLC法测定含量
2. 理化方法 是根据抗生素的分子结构特点,利用其特有 的化学或物理化学性质及反应而进行的。对于提纯的产品以 及化学结构已确定的抗生素,能较迅速、准确地测定其效价, 并具有较高的专属性。但本法也存在不足:如化学法通常是 利用抗生素化学结构上官能团的特殊化学反应,对含有具同 样官能团杂质的供试品就不适用,或需采取适当方法加以校 正。而且当该法是利用某一类型抗生素的共同结构部分的反 应时,所测得的结果,往往只能代表药物的总含量,并不一 定能代表抗生素的生物效价。因此,通常在以理化方法测定 抗生素含量时,不但要求方法正确可靠、具有专属性、操作 简单、省时、试剂易得、样品用量少,而且要求测定结果必 须与生物效价吻合。目前世界各国药典所收载的抗生素的理 化方法主要是HPLC法,如-内酰胺类、四环素类、大环内 酯类等抗生素大多采用HPLC法测定含量
3.抗生素活性表示方法抗生素的活性以效价单位表示,即指每毫升或每毫克中含有某种抗生素的有效成分的多少。效价是以抗菌效能(活性部分)作为衡量的标准,因此,效价的高低是衡量抗生素质量的相对标准。效价用单位(U)或微克(ug)表示
3. 抗生素活性表示方法 抗生素的活性以效价单位表示,即指每毫 升或每毫克中含有某种抗生素的有效成分的 多少。 效价是以抗菌效能(活性部分)作为衡量的 标准,因此,效价的高低是衡量抗生素质量 的相对标准。 效价用单位(U)或微克(g)表示
各种抗生素的效价基准是人们为了生产科研方便而规定如:1mg青霉素钠定为1670U;1mg庆大霉素定为590U;1mg硫酸卡那霉素定为670U。一种抗生素有一个效价基准,同一种抗生素的各种盐类的效价可根据其分子量与标准盐类进行换算。例:1mg青霉素钾的单位(U)=1670×356.4/372.5=1598U/mg。以上为抗生素的理论效价,实际样品往往低于该理论效价
各种抗生素的效价基准是人们为了生产科研方便而规定 如:1mg青霉素钠定为1670 U; 1mg庆大霉素定为590 U; 1mg硫酸卡那霉素定为670 U。 一种抗生素有一个效价基准,同一种抗生素的各种 盐类的效价可根据其分子量与标准盐类进行换算。 例:1mg青霉素钾的单位(U)=1670×356.4/372.5=1598 U/mg。以上为抗生素的理论效价,实际样品往往低于 该理论效价