一、无污染环境·代谢物要及时清除。二、 温度36.5°C±0.5°C·培养细胞对低温的耐受力比对高温强。温度达43C以上1小时，细胞都将被杀死
一、无污染环境 • 代谢物要及时清除。 二、温度 • 36.5℃±0.5℃。 • 培养细胞对低温的耐受力比对高 温强。温度达43℃以上1小时，细 胞都将被杀死
三、气体环境和氢离子浓度氧气参与三羧酸循环。95%氧气5%C02°CO,能维持培养基的pH值（7.2~7.4）细胞耐酸性比耐碱性大一些，在偏酸性环境中更利于生长。细胞在生长过程中随着细胞数量的增多和代谢活动的增强不断释放CO！致培养基变酸CO,+H,O←—→H,CO3←→H++ HCO3CO使pH值降低
• 氧气参与三羧酸循环。95%氧气， 5%CO2。 • CO2能维持培养基的pH值（7.2~7.4）， 细胞耐酸性比耐碱性大一些，在偏酸性 环境中更利于生长。细胞在生长过程中 随着细胞数量的增多和代谢活动的增强， 不断释放CO2，致培养基变酸。 • CO2+H2O←→H2CO3 ←→ H+＋HCO3－ • CO2使pH值降低。 三、气体环境和氢离子浓度
四、体外培养细胞生存所需基本物质1. 糖2. 氨基酸3.促生长因子4.元素、促细胞贴附物质五、渗透压人血浆渗透压为2900sm/kg大多数细胞为260~2900sm/kg~320~2900sm/kg六、培养基：合成培养基、天然培养基、无血清培养基
1. 糖 2. 氨基酸 3. 促生长因子 4. 元素、促细胞贴附物质 五、渗透压 • 人血浆渗透压为290Osm/kg • 大多数细胞为260~ 290Osm/kg~320 ~290Osm/kg 六、培养基：合成培养基、天然培养基、无血 清培养基 四、体外培养细胞生存所需基本物质
七、附着底物绝大多数培养细胞需附着在适宜的底物上才能生长细胞贴附在底物上生长的性质称锚着依赖性1. 玻璃2.一次性塑料：聚苯乙烯；聚四氟乙烯：可制成薄膜建成小块后能置入各种平血中，适于细胞贴附生长便于取出、染色和做电镜切片。3.微载体：是由聚苯乙烯和聚丙烯酰胺制成的小球体附着面大，利于大量繁殖细胞4.饲细胞（FeederCell）：可用成纤维细胞或其它细胞长成单层后，再用大剂量射线照射，使细胞失去增殖能力但尚存活和有代谢活动。令其作为底物，将其它细胞接种于其上；伺细胞的代谢产物利于其它细胞生长。可用于培养特殊难培养细胞
• 绝大多数培养细胞需附着在适宜的底物上才能生长。 细胞贴附在底物上生长的性质称锚着依赖性。 1. 玻璃 2. 一次性塑料：聚苯乙烯；聚四氟乙烯：可制成薄膜， 建成小块后能置入各种平皿中，适于细胞贴附生长， 便于取出、染色和做电镜切片。 3. 微载体：是由聚苯乙烯和聚丙烯酰胺制成的小球体， 附着面大，利于大量繁殖细胞。 4. 饲细胞（Feeder Cell）：可用成纤维细胞或其它细胞 长成单层后，再用大剂量射线照射，使细胞失去增 殖能力但尚存活和有代谢活动。令其作为底物，将 其它细胞接种于其上；伺细胞的代谢产物利于其它 细胞生长。可用于培养特殊难培养细胞。 七、附着底物
八、抑制细胞生长因素有毒物质或微生物能抑制细胞生存和生长·灭活血清，消灭有毒物质九、细胞代谢和调控：糖、蛋白质、脂类、核酸代谢 (略)
八、抑制细胞生长因素有毒物质或微生物 能抑制细胞生存和生长 • 灭活血清，消灭有毒物质 九、细胞代谢和调控：糖、蛋白质、脂类、 核酸代谢（略）