您现在不能检查保护文档或打印文档, 请根据以下三个步骤操作: 1)如果您是Word2000或以上版本用户, 请把Wod宏的安全性设为中” 六社,1A的、T目、中中A 检查保护 国家自然科学基金 申请书 资助类别: 亚类说明: 附注说明: 项目名称 申请者: 电话 依托单位: 通讯地址 邮政编码: 单位电话 电子邮件: 申报日期 2004年3月9日 国家自然科学基金委员会
申请代码： 受理部门： 收件日期： 受理编号： 检查保护 国家自然科学基金 申 请 书 资助类别： 亚类说明： 附注说明： 项目名称： 申 请 者： 电话： 依托单位： 通讯地址： 邮政编码： 单位电话： 电子邮件： 申报日期： 2004 年 3 月 9 日 国家自然科学基金委员会 您现在不能检查保护文档或打印文档， 请根据以下三个步骤操作： 1)如果您是 Word2000 或以上版本用户， 请把 Word 宏的安全性设为:"中" 方法: Word 菜单->工具->宏->安全性
国家自然科学基金申请书 基本信息 姓名阵此录入修性别 出生年月 年月 民族 申请者 职称 主要研究领域 位话真 电子邮件 个人网页 信 息工作单位 在研项目批准号 名称华中科技大学 代码43007402 位 联系人张婷姣 电子邮件 kjc jcbehust. edu. cn 信息一合作单位 电话|027-87543437 网站地址|w.hust.edu.cn 单位名称 代码 单美国华盛顿大学 00000000 信「[在此录入修改 项目名称 T- cadherin基因失活与原发性肝癌恶性生物学特征的关系及其临床意义 项目基本 资助类别面上项目 亚类说明自由申请项 附注说明 申请代码c03030303:普通外科学 C03031901:实验肿瘤学 信 基地类别 惠[预计研究年限2051年1月207年1月研究属性应用基础研究 项目研究内容和意义简介(限400字):细胞粘附分子 T-cadherin(Tcad)基因在肝癌 肺癌、乳腺癌等多种肿瘤中因启动子甲基化而失活,其表达显著下降或缺失,推测其可能 摘为一新的肿宿抑制基因。中请人首次证实Tcd基因在脑胶质母细胞C细胞中的肿瘤抑 制基因功能,并揭示其分子机制。本研究将在肝癌细胞株进一步研究T-cad基因失活与肝 癌细胞的增殖及侵袭等恶性生物学特征的关系,并调查其分子机制:在临床切除的肝癌标 本中研究T-cad基因失活与肝癌恶性分化程度、转移及复发等恶性生物学特征的关系,明 确T-cad基因失活与临床肝癌预后的关系:在肝癌细胞株和肝癌裸鼠模型上证实去甲基化 要|物是否能重新诱导Tcad分子表达并抑制肝癌细胞的增殖、侵袭等恶性生物学特征,探 索去甲基化药物对肝癌的治疗价值。该研究对进一步揭示肝癌发病的分子机制、设计合理 的治疗药物及判断预后,提高我国肝癌的治疗水平具有重要意义。 关键词用分号分开,最多5个)| T-cadherin;肿瘤抑制基因:肝癌 版本1009485
国家自然科学基金申请书 第 2 页 版本 1.009.485 基本信息 yEKHuo0AOsK 申 请 者 信 息 姓 名 [在此录入修 改] 性别 出生 年月 年 月 民 族 学 位 职称 主要研究领域 电 话 电子邮件 传 真 个 人 网 页 工 作 单 位 在研项目批准号 依 托 单 位 信 息 名 称 华中科技大学 代 码 43007402 联 系 人 张婷姣 电子邮件 kjcjcb@hust.edu.cn 电 话 027-87543437 网站地址 www.hust.edu.cn 合 作 单 位 信 息 单 位 名 称 代 码 美国华盛顿大学 00000000 [在此录入修改] 项 目 基 本 信 息 项目名称 T-cadherin基因失活与原发性肝癌恶性生物学特征的关系及其临床意义 资助类别 面上项目 亚 类 说 明 自由申请项目 附注说明 申请代码 C03030303:普通外科学 C03031901:实验肿瘤学 基地类别 预计研究年限 2005 年 1 月 — 2007 年 12 月 研究属性 应用基础研究 摘 要 项目研究内容和意义简介（限 400 字）：细胞粘附分子 T-cadherin（T-cad）基因在肝癌、 肺癌、乳腺癌等多种肿瘤中因启动子甲基化而失活，其表达显著下降或缺失，推测其可能 为一新的肿瘤抑制基因。申请人首次证实 T-cad 基因在脑胶质母细胞瘤 C6 细胞中的肿瘤抑 制基因功能，并揭示其分子机制。本研究将在肝癌细胞株进一步研究 T-cad 基因失活与肝 癌细胞的增殖及侵袭等恶性生物学特征的关系，并调查其分子机制；在临床切除的肝癌标 本中研究 T-cad 基因失活与肝癌恶性分化程度、转移及复发等恶性生物学特征的关系，明 确 T-cad 基因失活与临床肝癌预后的关系；在肝癌细胞株和肝癌裸鼠模型上证实去甲基化 药物是否能重新诱导 T-cad 分子表达并抑制肝癌细胞的增殖、侵袭等恶性生物学特征，探 索去甲基化药物对肝癌的治疗价值。该研究对进一步揭示肝癌发病的分子机制、设计合理 的治疗药物及判断预后，提高我国肝癌的治疗水平具有重要意义。 关 键 词(用分号分开，最多 5 个) T-cadherin；肿瘤抑制基因；肝癌
国家自然科学基金申请书 项目组主要成员(杰出青年科学基金不填此栏 出生年月性别职称学位 单位名称 电话 电子邮件 项目分工作时间 (月) 1在此录入修改 2[在此录入修改 在此录入修改] 在此录入修改] 在此录入修改] 6[在此录入修改 7[在此录入修改 8【在此录入修改 9[在此录入修改 总人数 高级 中级 初级 博士后 博士生 硕士生 说明:1.高级、中级、初级、博士后、博士生、硕士生人员数由申请者负责填报,总人数自动生成。 2.项目组主要成员不包括项目申请者
国家自然科学基金申请书 第 3 页 版本 1.009.485 项目组主要成员(杰出青年科学基金不填此栏) 编号 姓 名 出生年月 性别 职 称 学 位 单位名称 电话 电子邮件 项目分工 每年工 作时间 （月） 1 [在此录入修改] 2 [在此录入修改] 3 [在此录入修改] 4 [在此录入修改] 5 [在此录入修改] 6 [在此录入修改] 7 [在此录入修改] 8 [在此录入修改] 9 [在此录入修改] 总人数 高级 中级 初级 博士后 博士生 硕士生 10 3 2 1 1 2 1 说明: 1. 高级、中级、初级、博士后、博士生、硕士生人员数由申请者负责填报，总人数自动生成。 说明: 2. 项目组主要成员不包括项目申请者
国家自然科学基金申请书 经费申请表 (金额单位:万元) 科目 申请经费 备注(计算依据与说明) 研究经费 17.5000 1.科研业务费 2.9000 (1)测试/计算/分析费 0.5000统计分析及数据处理费 (2)能源/动力费 0.4000水电费 (3)会议费/差旅费 1.0000参加国内学术会议4-5人次 (4)出版物/文献/信息传播费 1.000论文准备及发表 (5)其它 2.实验材料费 5.5000 (1)原材料/试剂/药品购置费 4000购置各种抗体、脂质体 (2)其它 1.5000购买氚标胸腺嘧啶、去甲基化试剂、合成引物 3.仪器设备费 4.5000 (1)购置 3000购买小型冰冻切片机、动物解剖器材及消耗性器材 (2)试制 1.5000各种常规试剂 4.实验室改装费 2.000建立动物解剖工作台及同位素实验专区 5.协作费 2.600委托动物中心维持约100裸鼠约1年的饲养及管 里;流试细胞仪分析 因际合作与交流费 3.5000 1.项目组成员出国合作交流 1.000参加国际会议一次 2.境外专家来华合作交流 2.5000请Gum教投授来院指导课题进展及专题讲座 劳务费 四.管理费 1.0000 合计 22.0000 国家其他计划资助经费 与本项目相关的 其他经费资助(含部门匹配) 其他经费来源 其他经费来源合计 0.0000 版本1009485
国家自然科学基金申请书 第 4 页 版本 1.009.485 经费申请表 （金额单位：万元） 科目 申请经费 备注（计算依据与说明） 一.研究经费 17.5000 1.科研业务费 2.9000 （1）测试/计算/分析费 0.5000 统计分析及数据处理费 （2）能源/动力费 0.4000 水电费 （3）会议费/差旅费 1.0000 参加国内学术会议 4-5 人次 （4）出版物/文献/信息传播费 1.0000 论文准备及发表 （5）其它 2.实验材料费 5.5000 （1）原材料/试剂/药品购置费 4.0000 购置各种抗体、脂质体 （2）其它 1.5000 购买氚标胸腺嘧啶、去甲基化试剂、合成引物 3.仪器设备费 4.5000 （1）购置 3.0000 购买小型冰冻切片机、动物解剖器材及消耗性器材 （2）试制 1.5000 各种常规试剂 4.实验室改装费 2.0000 建立动物解剖工作台及同位素实验专区 5.协作费 2.6000 委托动物中心维持约 100 只裸鼠约 1 年的饲养及管 理；流试细胞仪分析 二.国际合作与交流费 3.5000 1.项目组成员出国合作交流 1.0000 参加国际会议一次 2.境外专家来华合作交流 2.5000 邀请 Gutmann 教授来院指导课题进展及专题讲座 2-3 次 三.劳务费 四.管理费 1.0000 合 计 22.0000 与本项目相关的 其他经费来源 国家其他计划资助经费 其他经费资助（含部门匹配） 其他经费来源合计 0.0000
国家自然科学基金申请书 杳看报告正文撰写提纲 报告正文 (一)立项依据与研究内容 项目的立项依据 原发性肝癌是高度恶性的肿瘤,尽管采取积极手术治疗,但绝大多数病人仍难免死 于肿瘤复发及转移,其死亡率髙居我国肿瘤死亡率的第二位。研究已表明肝癌的发生乙 肝、丙肝感染及摄入黄曲霉素污染的食物有密切关系,其发生发展与多种癌基因过度表 达,以及肿瘤抑制基因失活密切相关。但目前对其发生发展的精确分子机制尚不完全清 楚。因此,进一步探索研究新的基因功能改变与肝癌发生发展及其恶性特征的关系,对 揭示其发生发展的精确分子机制、设计合理的治疗药物及判断预后,进一步提高我国 肝癌的治疗水平具有重要意义 T- cadherin分子属细胞粘附分子 cadherin超家族。 Cadherin超家族分子为细胞 表面糖蛋白,其功能主要包括调节钙介导的细胞粘附、细胞极性及形态形成,以及参与 细胞间的识别和信号传导机制(1,2,3,4)。经典的 Cadherin分子如E- cadherin和 N- cadherin由细胞外钙结合区及跨膜区两部分组成,而T- cadherin因缺失经典 Cadherin分子所具有的跨膜区而经糖基磷脂酰肌醇分子附着于细胞膜上(5),故而命名 truncated- cadherin(即T- cadherin,又称CDH13或H- cadherin)。近年来对经典的 Cadherin分子的深入研究发现,E-,N- cadherin分子缺失或突变与多种肿瘤如肝癌 胃癌、乳腺癌、肺癌的发生及转移特征密切相关(6,7,8,9,10。将E- cadherin分子 重新导入缺失E- cadherin分子表达的肿瘤细胞,则肿瘤细胞的增殖及侵犯能力显著受 抑(11)。近年已开始有T- cadherin分子在肝癌、乳腺癌、肺癌、结直肠癌、卵巢癌及 皮肤鳞癌中表达显著下降、缺失的报导(12,13,14,15,16,17,18),推测T- cadherin 分子在这些肿瘤中可能扮演肿瘤抑制基因角色,但尚无人对其在不同肿瘤中的基因功能 及其分子机制进行研究。2003年,申请人(黄志勇)最新研究表明,将T- cadherin基 因导入缺失表达T- cadherin分子的大鼠脑胶质母细胞瘤C6细胞使其过度表达 T- cadherin分子,C6细胞的增殖及侵袭能力显著受抑,首次证实T- cadherin在大鼠脑 胶质母细胞瘤中的肿瘤抑制基因功能,并进一步揭示其抑制机制是T- cadherin分子通 过诱导P2ICIP1/wAFI表达致使肿瘤细胞于细胞周期G2期阻滞。该文发表于 Molecular and Cellular biology2003,23:566-578(19)。这一研究发现为进一步研究T- cadherin 第5页 版本1009485
国家自然科学基金申请书 第 5 页 版本 1.009.485 查看报告正文撰写提纲 报告正文 （一）立项依据与研究内容 1、项目的立项依据 原发性肝癌是高度恶性的肿瘤，尽管采取积极手术治疗，但绝大多数病人仍难免死 于肿瘤复发及转移，其死亡率高居我国肿瘤死亡率的第二位。研究已表明肝癌的发生乙 肝、丙肝感染及摄入黄曲霉素污染的食物有密切关系, 其发生发展与多种癌基因过度表 达，以及肿瘤抑制基因失活密切相关。但目前对其发生发展的精确分子机制尚不完全清 楚。因此, 进一步探索研究新的基因功能改变与肝癌发生发展及其恶性特征的关系，对 揭示其发生发展的精确分子机制、设计合理的治疗药物及判断预后， 进一步提高我国 肝癌的治疗水平具有重要意义。 T-cadherin 分子属细胞粘附分子 cadherin 超家族。 Cadherin 超家族分子为细胞 表面糖蛋白，其功能主要包括调节钙介导的细胞粘附、细胞极性及形态形成，以及参与 细胞间的识别和信号传导机制(1,2,3,4)。经典的 Cadherin 分子如 E-cadherin 和 N-cadherin 由细胞外钙结合区及跨膜区两部分组成，而 T-cadherin 因缺失经典 Cadherin 分子所具有的跨膜区而经糖基磷脂酰肌醇分子附着于细胞膜上（5）,故而命名 truncated-cadherin（即 T-cadherin，又称 CDH13 或 H-cadherin）。近年来对经典的 Cadherin 分子的深入研究发现，E-，N-cadherin 分子缺失或突变与多种肿瘤如肝癌、 胃癌、乳腺癌、肺癌的发生及转移特征密切相关（6，7，8,9,10）。将 E-cadherin 分子 重新导入缺失 E-cadherin 分子表达的肿瘤细胞，则肿瘤细胞的增殖及侵犯能力显著受 抑（11）。近年已开始有 T-cadherin 分子在肝癌、乳腺癌、肺癌、结直肠癌、卵巢癌及 皮肤鳞癌中表达显著下降、缺失的报导（12，13，14，15,16,17,18），推测 T-cadherin 分子在这些肿瘤中可能扮演肿瘤抑制基因角色,但尚无人对其在不同肿瘤中的基因功能 及其分子机制进行研究。2003 年，申请人（黄志勇）最新研究表明，将 T-cadherin 基 因导入缺失表达 T-cadherin 分子的大鼠脑胶质母细胞瘤 C6 细胞使其过度表达 T-cadherin 分子，C6 细胞的增殖及侵袭能力显著受抑，首次证实 T-cadherin 在大鼠脑 胶质母细胞瘤中的肿瘤抑制基因功能，并进一步揭示其抑制机制是 T-cadherin 分子通 过诱导 P21 CIP1/WAF1 表达致使肿瘤细胞于细胞周期 G2 期阻滞。该文发表于 Molecular and Cellular Biology 2003,23:566-578（19）。这一研究发现为进一步研究 T-cadherin