1.质粒(plasmid 质粒是存在于细胞 染色体外的小型双链 DNA分子，2-200Kb之 质粒 间本身含有复制功能 细菌染色体 的遗传结构能在宿主 细胞独立自主进行复制， 并在细胞分裂时保持 恒定地传给子代细胞. 特点 能在宿主细胞内独立自主复制；带有某些遗传信息， 会赋予宿主细胞一些遗传性状。 缺点：该载体一般只能接受小于15kb的外源DNA片段.插入 过大，会导致重组体扩增减慢，甚至插入片段先进丢失
1. 质粒 (plasmid) 特点 能在宿主细胞内独立自主复制；带有某些遗传信息, 会赋予宿主细胞一些遗传性状。 质粒是存在于细胞 染色体外的小型双链 DNA分子,2-200Kb之 间.本身含有复制功能 的遗传结构,能在宿主 细胞独立自主进行复制, 并在细胞分裂时,保持 恒定地传给子代细胞. 缺点:该载体一般只能接受小于15kb的外源DNA片段.插入 过大,会导致重组体扩增减慢,甚至插入片段先进丢失
质粒载体-pBR322 4.3kb多拷贝松弛型，内含一个(O)、一个抗氨 苄青霉素（Ampr)和一个抗四环素(Ter)标记 基因，在Ampr中有两个内切酶位点(PstI、Pvu), 在Tetr中有三个内切酶位点(EcoRV、BamHI、 SalD
质粒载体--pBR322 4.3kb多拷贝松弛型，内含一个（Ori)、一个抗氨 苄青霉素（Ampr ）和一个抗四环素（Tetr ）标记 基因，在Ampr 中有两个内切酶位点（PstI、PvuI)， 在Tetr 中有三个内切酶位点（EcoRV、BamHI、 SalI)
C1a123 Eco RI4361 Hind IⅢ29 4atIⅡ4286 EcoRV185 SealI 3846 Bam HI 375 Pvu I 3735 Sph I 562 PstI 3609 SalI 651 TCR Xn2aⅢ939 pBR322 NruI 972 (4363藏基对) Ava I 1425 复制起始区 BalI 1444 y1m2475 Pou iI2066 Nde I 2297 Th11I2219 Sna I 2246 PBR322质粒的物理图谱 目录
目 录
PUC系列质粒是由pBR322质粒中的氨苄青抗性基因、 复制起始点与大肠杆菌acZ基因片段改建而成的. Tag I 外源基因麵入位点 SalI SalI pUC 7:Eco RI,Bam HI,Acc I,Pst I,Acc I,Bam HI,EcoRI,Haem HincⅡ Hlinc II pUC lac poZ SmaI SalI pUC:8:EcoRI, ,Bam HI,AccI,PtI,HindⅢ，HaeⅢ XamI HincⅡ Hae Ⅱ SalI SmaI TagI Hae II pUC9:Hind旺，Pstl,AccI, BamHI, ,EcoRI,HaeⅢ HircⅡ XmaI pUC系列质粒的物理图谐
PUC系列质粒是由pBR322质粒中的氨苄青抗性基因、 复制起始点与大肠杆菌lacZ基因片段改建而成的
标记基因的种类 1)抗性标记基因 a.抗生素抗性基因：Apr,Tcr,Kanr, b.重金属抗性基因：Cur,Znr,Cdr c.代谢抗性基因：抗除草剂基因 2)营养标记基因 主要是参与氨基酸，核苷酸及其他必需营养物合 成酶类的基因，这类基因在酵母转化中使用最频繁， 如TRP1,URA3,LEU2,HS4等
1）抗性标记基因 a. 抗生素抗性基因: Apr ，Tc r ，Kanr， b. 重金属抗性基因: Cur ，Znr ，Cd r c. 代谢抗性基因: 抗除草剂基因 2）营养标记基因 主要是参与氨基酸，核苷酸及其他必需营养物合 成酶类的基因， 这类基因在酵母转化中使用最频繁， 如TRP1，URA3，LEU2，HIS4等。 标记基因的种类