第十三章 知胞凋亡检测
第十三章 细 胞 凋 亡 检 测
细胞调亡的几种检测方法 > 形态学观察：普通光镜、荧光显微镜、透射电子显微镜 >磷脂酰丝氨酸外翻分析(Annexin Vi法) > 线粒体膜势能的检测 >DNA片断化检测：大分子染色体DNA片段、 、DNA Ladder >脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法 terminal -deoxynucleotidyl transferase mediated nick end labeling,TUNEL) >半胱复酸蛋白酶Caspase家族活性的检测
细胞凋亡的几种检测方法 ➢ 形态学观察：普通光镜、荧光显微镜、透射电子显微镜 ➢ 磷脂酰丝氨酸外翻分析（Annexin V法） ➢ 线粒体膜势能的检测 ➢ DNA片断化检测：大分子染色体DNA片段、 DNA Ladder ➢ 脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法 （terminal -deoxynucleotidyl transferase mediated nick end labeling, TUNEL） ➢ 半胱氨酸蛋白酶Caspase家族活性的检测
川形态学特征 空池化 ]山缩 山芽 边集 调亡小体 细胞体积缩小，连接消失，与周围的细胞脱离，然后是细胞质 密度增加，核质浓缩，核膜核仁破碎，胞膜有小泡状形成，膜 内侧磷脂酰丝氨酸外翻到膜表面，胞膜结构仍然完整，最终可 将凋亡细胞遗骸分割句寒为几个凋亡小体
细胞体积缩小，连接消失，与周围的细胞脱离，然后是细胞质 密度增加，核质浓缩，核膜核仁破碎，胞膜有小泡状形成，膜 内侧磷脂酰丝氨酸外翻到膜表面，胞膜结构仍然完整，最终可 将凋亡细胞遗骸分割包裹为几个凋亡小体
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形态学观察 光学显微镜和倒置显微镜： 体积缩小核深染、； 核碎裂、 凋亡小体形成、无炎症反应 荧光显微镜和激光共聚焦显微镜：DNA特异性染料 Hoechest 33342/33258,DAPI 透射电子显微镜：超微结构是诊断调亡的最可靠指标
形态学观察 ✓ 光学显微镜和倒置显微镜：体积缩小、核深染、核碎裂、 凋亡小体形成、无炎症反应 ✓荧光显微镜和激光共聚焦显微镜： DNA特异性染料 （ Hoechest 33342/33258, DAPI） ✓ 透射电子显微镜：超微结构是诊断凋亡的最可靠指标