B、细胞周期同步化细胞同步化(synchronization)：自然过程中发生或经人为处理造成的细胞周期同步化。（一）自然同步化1、多核体：如：粘菌、疮原虫。2、某些水生动物受精卵：如海胆、两栖类3、增殖抑制解除后的同步分裂：如真菌的休眠孢子移入适宜环境后，一起发芽，同步分裂。26
26 细胞同步化(synchronization): 自然过程中发生或 经人为处理造成的细胞周期同步化。 （一）自然同步化 1、多核体：如：粘菌、疟原虫。 2、某些水生动物受精卵：如海胆、两栖类。 3、增殖抑制解除后的同步分裂：如真菌的休眠 孢子移入适宜环境后，一起发芽，同步分裂。 B、细胞周期同步化：
（二）人工同步化1、选择同步化1）有丝分裂选择法：M期细胞与培养皿的附着性低，振荡脱离器壁收集。优点：操作简单，同步化程度高，细胞不受药物伤害。缺点：获得的细胞数量较少（分裂细胞约占1%~2%) 。2）细胞沉降分离法：M期细胞体积大，可用离心分离。优点：可用于任何悬浮培养的细胞。缺点：同步化程度较低。27
27 1、选择同步化 1）有丝分裂选择法：M期细胞与培养皿的附着 性低，振荡脱离器壁收集。 优点：操作简单，同步化程度高，细胞不受 药物伤害。 缺点：获得的细胞数量较少（分裂细胞约占 1%～2%） 。 2）细胞沉降分离法： M期细胞体积大，可用离 心分离。 优点：可用于任何悬浮培养的细胞。 缺点：同步化程度较低。 （二）人工同步化
2、诱导同步化1）DNA合成阻断法：选用DNA合成的抑制剂，可逆地抑制DNA合成。常用TDR双阻断法：在细胞处于对数生长期的培养基中加入过量TDR （Hela 2mol/L : CHO 7.5mol/L ） 。 S期细胞被抑制，停在G1/S交界处。移去TDR，释放时简天于Ts时，再次加入过量TDR。优点：同步化程度高缺点：产生非均衡生长，个别细胞体积增大。2）中期阻断法用秋水仙素等细胞分裂抑制剂将细胞阻断在中期。优点是无非均衡生长现象，缺点是可逆性较差28
28 2、诱导同步化 1）DNA合成阻断法：选用DNA合成的抑制 剂，可逆地抑制DNA合成。常用TDR双 阻断法： 在细胞处于对数生长期的培养基中加入过量 TDR（Hela 2mol/L；CHO 7.5mol/L）。S期 细胞被抑制，停在G1/S交界处。移去TDR， 释放时间大于Ts时，再次加入过量TDR。 优点：同步化程度高 缺点：产生非均衡生长，个别细胞体积增大。 2）中期阻断法 用秋水仙素等细胞分裂抑制剂将细胞阻断 在中期。优点是无非均衡生长现象，缺点 是可逆性较差
12.3细胞周期调控（哺乳动物）细胞周期的控制系统(cell-cycle control system)细胞周期的控制类似于中央控制系统(central control system)29
29 12.3 细胞周期调控(哺乳动物) ◆细胞周期的控制系统 (cell-cycle control system) 细胞周期的控制类似于中央控制系统 (central control system)
MCDK1G1CYCLINACDK6CDK4CDK4CYCLIN DICYCLINU2CYCLIND3CDK2CDK1CYCLINEE2FCYCLINAE2FP107P107RBRBDP-1CDK1RBE2FCYCLIN BCDC25CDC25E2FRB8RBCDK1E2FCYCLINACDK2RBCYCLINACDK7CYCLINHG2CDC25AThe cell cycle is regulated by the cyclins,combinewithcyclindependentkinases (cdks))toformactivatedkinasesthat30phosphorylate targets leading to cell cycle regulation
30 The cell cycle is regulated by the cyclins，combine with cyclin dependent kinases (cdks) to form activated kinases that phosphorylate targets leading to cell cycle regulation