第二节生物化学分析技术六、分子杂交技术(molecularhybridization)DNA变性:当溶液中的DNA分子处于高温或高pH值(13)条件下,维持双螺旋在一起的碱基互补对就被破坏,DNA双链解离成两条单链,这一过程叫DNA变性DNA复性:当温度降低至合适温度或恢复pH值至中性,两条裂解的单链按碱基互补配对原则重新形成双链结构,这一过程叫DNA复性,又叫DNA杂交
第二节 生物化学分析技术 (molecular hybridization)
DNADenaturation and RenaturationDouble-strandedDNAmolecules1000LHeatDenaturedsingle-strandedDNAmoleculesICool slowlyReannealeddouble-strandedDNAmolecules0
核酸分子杂交:按照碱基互补配对原则,将不同来源的序列互补单链的DNA/DNA,RNA/RNA,RNA/DNA,互补配对成双链杂交分子,这一过程叫核酸分子杂交。linearplasmidDNAmolecule with cohesive endscircularplasmidDNAmoloculeANNEALTTAACOVALENTRESTRICTIONLINKAGEBYNUCLEASLEINTDNALIGASECLEAVAGEplasmid DNAmoleculecontainingchromosomalDNAinsertAoneofmanyDNAfragmentsproducedbycuttingchromosomalDNAwiththe same restriction nuclease
第二节生物化学分析技术在不破坏细胞或细胞器的情况下,用核苷酸探针对特殊的核苷酸顺序在其原位进行杂交,叫原位杂交(insituhybridization)。可用于DNA、RNA定位研究。原位杂交检测菱缩性胃炎p53mRNA表达
在不破坏细胞或细胞器的情况下, 原位杂交(in situ hybridization)。 第二节 生物化学分析技术 原位杂交检测萎缩性胃炎p53 mRNA表达
荧光原位杂交(fluorescenceinsituhybridization,FiSH):Fluoresence ln Situ HybridizationQQLabelingwithfluorescentdyeDNAorobeDenature&MIXIMXMXHybridizeFISH技术的原理图解
荧光原位杂交 (fluorescence in situ hybridization, FISH): FISH技术的原理图解