(2)凝胶层析 凝胶色谱：是利用具有网状结构的凝胶的分子筛作用， 根据被分离物质的分子大小不同来进行分离。 葡聚糖凝胶 a b 聚丙烯酰胺凝胶 凝胶基质 Gel bead 凝胶珠 molecules Volume of effluent molecules 分子筛色谱 凝胶排阻色谱 大分子 小分子
凝胶过滤层析过程示意图 大分子 小分子 凝胶基质 凝胶珠 （2）凝胶层析 凝胶色谱：是利用具有网状结构的凝胶的分子筛作用， 根据被分离物质的分子大小不同来进行分离。 分子筛色谱 凝胶排阻色谱 葡聚糖凝胶 聚丙烯酰胺凝胶
凝胶量与型号和层析柱大小与规格及凝胶用量 层析柱规格 凝胶的规格和用量(g) 直径 (cm) 高(cm) 容量(ml) G25 G50 G100 G200 0.9 15 9.5 2.5 1 0.6 0.3 0.9 30 19 5 2 1.2 0.6 0.9 60 38 10 以 2.5 1.2 1.6 20 40 10 2.5 1.2 1.6 40 80 20 e 5.0 2.4 1.6 70 140 35 14 9.0 4.4 1.6 100 200 50 20 12.5 6 2.6 40 210 50 20 12 7 2.6 70 370 90 35 20 12 2.6 100 530 130 50 30 17 2.6 60 1000 250 110 70 35
凝胶层析实例：蛋白质脱盐 ● 高分子（如蛋白质、核酸、多糖等)溶液中的小 分子杂质，可以借助凝胶层析法将其除去，这一 操作称为脱盐。 ●葡聚糖凝胶Sephadex-G25因流动阻力小，交联度 适宜，常用于蛋白质溶液的脱盐。 复习回顾 透析袋 透析液 蛋白质 溶液 开始透析 透析达到平衡
凝胶层析实例：蛋白质脱盐 ⚫ 高分子（如蛋白质、核酸、多糖等）溶液中的小 分子杂质，可以借助凝胶层析法将其除去，这一 操作称为脱盐。 ⚫ 葡聚糖凝胶Sephadex-G25因流动阻力小，交联度 适宜，常用于蛋白质溶液的脱盐。 复习回顾
练习题 ●7-2.针对配基的生物学特异性的蛋白质分离方法是 ()。 ●A.凝胶过滤 B.离子交换层析 ●C.亲和层析 D.纸层析 ●答案(C) ●7-3.用于蛋白质分离过程中的脱盐和更换缓冲液的色谱 是(C) ●A.离子交换色谱B.亲和色谱 ●C.凝胶过滤色谱D.反相色谱 ●答案(C)
练习题 ⚫ 7-2．针对配基的生物学特异性的蛋白质分离方法是 （ ）。 ⚫ A.凝胶过滤 B.离子交换层析 ⚫ C.亲和层析 D.纸层析 ⚫ 答案（ C ） ⚫ 7-3．用于蛋白质分离过程中的脱盐和更换缓冲液的色谱 是（ C ） ⚫ A．离子交换色谱 B.亲和色谱 ⚫ C.凝胶过滤色谱 D.反相色谱 ⚫ 答案（ C ）