【原理】当一定量的血液按比例加入血小板稀释液中时，稀释液将血 液中的红细胞及白细胞溶解，仅余血小板，置于血细胞计数板内，于显微 镜下计数一定窖内的血小板数，然后换算出每升血液中所含血小板的数量。 【试剂】 血小板稀释液(10g/草酸铵》 草酸铵 10g EDTA-Naz 0.12g 蒸馏水加至1000m1(过滤后保存于4℃) 【操作与仪器】微量吸管、试管、玻棒、血细胞计数板，显微镜： 【操作】 1.在试管内加入血小板稀释液0.38ml。 2.用一次性微量吸管准确地吸取末梢血20μl,拭净吸管外多余血液 立即将血液加入稀释液中，充分混匀。 3.静置5min,待红细胞完全溶解后摇匀，用玻棒蘸取不得混悬液充入 血细胞计数池。 4.放置5min,待血小板完全下沉后用高倍镜进行计数。 5.用高倍镜计数血细胞计数盘中央大方格的四个角及中央共5个中方 格内血小板数。 6.按以下公式进行计算 血小板数/几=5个中方格内的血小板数(N)×5×10×20×10°=N×10°/L 式中：×5将5个中方格换算成一个大方格，即0.1μl的血小板数 ×10是将一个大方格的容积(0.1μ1)换算成1μl的血小板数
【原理】当一定量的血液按比例加入血小板稀释液中时，稀释液将血 液中的红细胞及白细胞溶解，仅余血小板，置于血细胞计数板内，于显微 镜下计数一定窖内的血小板数，然后换算出每升血液中所含血小板的数量。 【试剂】 血小板稀释液（10g/草酸铵） 草酸铵 10g EDTA-Na2 0.12g 蒸馏水加至 1000ml（过滤后保存于 4℃） 【操作与仪器】微量吸管、试管、玻棒、血细胞计数板，显微镜。 【操作】 1.在试管内加入血小板稀释液 0.38ml。 2.用一次性微量吸管准确地吸取末梢血 20l，拭净吸管外多余血液， 立即将血液加入稀释液中，充分混匀。 3.静置 5min，待红细胞完全溶解后摇匀，用玻棒蘸取不得混悬液充入 血细胞计数池。 4.放置 5min，待血小板完全下沉后用高倍镜进行计数。 5.用高倍镜计数血细胞计数盘中央大方格的四个角及中央共 5 个中方 格内血小板数。 6.按以下公式进行计算 血小板数/L=5 个中方格内的血小板数（N）×5×10×20×106 =N×109 /L 式中：×5 将 5 个中方格换算成一个大方格，即 0.1l 的血小板数 ×10 是将一个大方格的容积（0.1l）换算成 1l 的血小板数
×20是为血液稀释倍数 ×10°是将ul换算成L 【注意事项】 1.用具及稀释液要清洁无污染。 2.采血时穿刺皮肤要深约3mm,按常规采血后应先作血小板计数，采 血和注入稀释液的动作要快，避免血小板凝聚或血液凝固。 3.混悬液充入计数池前应充分摇匀，充入计数池后静置15mim,时间过 短血小板不能全部沉淀，时间过长则血小板可能破坏，从而影响结果的准 确性。 4计数时光线要适中，以便看清折光的血小板，注意与灰尘、细胞碎片、 微生物、细微颗粒等进行区别。 5.标本采取后应在30min内计数完毕，如放置时间过长，会导致血小板 破坏，血小板计数值偏低。 【参考值】(100~300)×10/L 【临床意义】 1.血小板减少 (1)血小板生成减少：见于再生障碍性贫血、急性白血病、巨幼细胞 贫血等。 (2)血小板破坏增多：见于原发性血小板减少性紫瘢(TP),SLE等。 (3)血小板消耗过多：见于弥散性血管内凝血(DIC)、血栓性血小板 减少性紫癜等。 (4)血小板分布异常：见于脾肿大（肝硬化，Bati综合征），血液被
×20 是为血液稀释倍数 ×106 是将l 换算成 L 【注意事项】 1.用具及稀释液要清洁无污染。 2.采血时穿刺皮肤要深约 3mm，按常规采血后应先作血小板计数，采 血和注入稀释液的动作要快，避免血小板凝聚或血液凝固。 3.混悬液充入计数池前应充分摇匀，充入计数池后静置 15min，时间过 短血小板不能全部沉淀，时间过长则血小板可能破坏，从而影响结果的准 确性。 4.计数时光线要适中，以便看清折光的血小板，注意与灰尘、细胞碎片、 微生物、细微颗粒等进行区别。 5.标本采取后应在 30min 内计数完毕，如放置时间过长，会导致血小板 破坏，血小板计数值偏低。 【参考值】（100～300）×109 /L 【临床意义】 1.血小板减少 （1）血小板生成减少：见于再生障碍性贫血、急性白血病、巨幼细胞 贫血等。 （2）血小板破坏增多：见于原发性血小板减少性紫癜（ITP），SLE 等。 （3）血小板消耗过多：见于弥散性血管内凝血（DIC）、血栓性血小板 减少性紫癜等。 （4）血小板分布异常：见于脾肿大（肝硬化，Banti 综合征），血液被
稀释。 2.血小板增多 (1)骨髓增殖性疾病：如慢性粒细胞白血病，原发性血小板增多症， 真性红细胞增多症等。 (2)反应性增多：如急性感染，急性溶血等。 第二章骨髓细胞学检查 【要求】熟悉骨髓细胞发育的一般规律，正常骨髓象和常见血液病骨 髓象。 【器材与仪器】骨髓细胞染色涂片、香柏油、显微镜 【操作步骤】 1.低倍镜检查 (1)判断骨髓增程度：在观察取材、涂片、染色等情况是否满意的 基础上，一般以涂片中有核细胞与成熟红细胞之比来判断骨髓有核细胞的 增生程度。通常分为五能。 (2)计数巨核细胞数：逐一视野浏览，计数涂片上所有巨核细胞数， 并予分类（改用油镜检查）。 (3)其他：观察涂片边缘、尾部、骨髓小粒周围，有无体积大或成堆 分布的异常细胞，如转移癌细胞、Reed-Stemberg细胞、多核巨细胞，恶性 组织细胞、戈谢细胞、尼曼-皮克细胞等（可改用油镜加以辨认）。 2.油镜检查 (1)有核细胞分类计数：选择涂片的体尾部交界处细胞分布比较均匀
稀释。 2.血小板增多 （1）骨髓增殖性疾病：如慢性粒细胞白血病，原发性血小板增多症， 真性红细胞增多症等。 （2）反应性增多：如急性感染，急性溶血等。 第二章 骨髓细胞学检查 【要求】熟悉骨髓细胞发育的一般规律，正常骨髓象和常见血液病骨 髓象。 【器材与仪器】骨髓细胞染色涂片、香柏油、显微镜 【操作步骤】 1.低倍镜检查 （1）判断骨髓增程度：在观察取材、涂片、染色等情况是否满意的 基础上，一般以涂片中有核细胞与成熟红细胞之比来判断骨髓有核细胞的 增生程度。通常分为五能。 （2）计数巨核细胞数：逐一视野浏览，计数涂片上所有巨核细胞数， 并予分类（改用油镜检查）。 （3）其他：观察涂片边缘、尾部、骨髓小粒周围，有无体积大或成堆 分布的异常细胞，如转移癌细胞、Reed-Sternberg 细胞、多核巨细胞，恶性 组织细胞、戈谢细胞、尼曼-皮克细胞等（可改用油镜加以辨认）。 2.油镜检查 （1）有核细胞分类计数：选择涂片的体尾部交界处细胞分布比较均匀
的部位，迂回移动涂片进行有核细胞分类计数，一般分类计灵敏有核细胞 200~500个。按细胞的系列、发育不同阶段分别计数，并计算出各自的百 分率。 (2)观察各系统的增生程度和各阶段细胞数量和质量的变化：红细胞 系、粒细胞系、淋巴细胞系及单核细胞系各阶段比例、染色及形态有无异 常现象。 (3)计算粒红比值：将各阶段的粒系细胞百分比之和与各阶段有核红 细胞百分比之和相除而得到粒红比值。 (4)其他：观察血小板的多少和形态：观察浆细胞、网状细胞等数量 和形态：观察有无寄生虫、如疟原虫、墨热病小体等和其它细胞。 【血细胞发育一般规律】血细胞在各阶段发育过程中，其形态学变化 有一定的规律性，从原始到成熟可见以下变化： 1.细胞大小及外形 (1)大小：通常从原始到成熟，胞体由大逐渐变小。但巨核细胞相反， 细胞越成熟，胞体越大。另外，早幼粒细胞也较原粒细胞为大。 (2)外形：红细胞系始终呈圆形，粒细胞及淋巴细胞系则保持圆形或 椭圆形，单核细胞系由圆形或椭圆形变为不规则形，巨核细胞系由圆形变 为明显不规则形。 2.细胞核 (1)大小：由大到小，但红细胞系的细胞核最后消失，巨核细胞的胞 核则由小变大。 (2)核形：幼红细胞核始终呈圆形，最后脱核而消失，成熟红细胞无
的部位，迂回移动涂片进行有核细胞分类计数，一般分类计灵敏有核细胞 200～500 个。按细胞的系列、发育不同阶段分别计数，并计算出各自的百 分率。 （2）观察各系统的增生程度和各阶段细胞数量和质量的变化：红细胞 系、粒细胞系、淋巴细胞系及单核细胞系各阶段比例、染色及形态有无异 常现象。 （3）计算粒红比值：将各阶段的粒系细胞百分比之和与各阶段有核红 细胞百分比之和相除而得到粒红比值。 （4）其他：观察血小板的多少和形态：观察浆细胞、网状细胞等数量 和形态；观察有无寄生虫、如疟原虫、墨热病小体等和其它细胞。 【血细胞发育一般规律】血细胞在各阶段发育过程中，其形态学变化 有一定的规律性，从原始到成熟可见以下变化： 1.细胞大小及外形 （1）大小：通常从原始到成熟，胞体由大逐渐变小。但巨核细胞相反， 细胞越成熟，胞体越大。另外，早幼粒细胞也较原粒细胞为大。 （2）外形：红细胞系始终呈圆形，粒细胞及淋巴细胞系则保持圆形或 椭圆形，单核细胞系由圆形或椭圆形变为不规则形，巨核细胞系由圆形变 为明显不规则形。 2.细胞核 （1）大小：由大到小，但红细胞系的细胞核最后消失，巨核细胞的胞 核则由小变大。 （2）核形：幼红细胞核始终呈圆形，最后脱核而消失，成熟红细胞无
核。各系白细胞原始阶段胞核均呈圆形或椭圆形，随着细胞成熟，粒细胞 核的一侧逐渐凹陷，最后形成分叶状：单核细胞则变为不规则形：淋巴细 胞及浆细胞系的核形保持不变。巨核细胞胞核逐渐增大并分叶，分叶不规 则。堆叠成为一巨大的核。 (3)核位置：红细胞系胞核位置居中（呈岛状，核四周均有胞质）： 粒细胞、单核细胞及浆细胞的核常偏位：淋巴细胞核常一侧着边，仅核的 一侧有胞质。 (4)染色质：由细致、均匀、稀疏到粗糙紧密，甚至紧缩成块，着色 由浅变深。 (5)核膜：由不明显到明显。 (6)核仁：由清晰到模糊不清最后消失。一般原始阶段均有核仁，早 幼阶段核仁模糊不清或消失，中幼阶段多无核仁。 3.细胞质 (1)量：由少量到较多量，但淋巴细胞系不同。 (2)颗粒：从无到有，由非特异性颗粒到特异性颗粒。如原始粒细胞 一般无颗粒，早幼粒细胞出现非特异性嗜天青颗粒，中幼粒以后各阶段细 胞嗜天青颗粒基本消失而代之以大量特异性颗粒（中性、嗜酸性、嗜碱性 颗粒)。淋巴细胞颗粒较少，部分细胞可含少量非特异性颗粒。红细胞系胞 质中无颗粒。 4胞核与胞质之比，一般由大变小，即由核大质少到核小质多。 【骨髓细胞形态学特点】 1.红细胞系统
核。各系白细胞原始阶段胞核均呈圆形或椭圆形，随着细胞成熟，粒细胞 核的一侧逐渐凹陷，最后形成分叶状；单核细胞则变为不规则形；淋巴细 胞及浆细胞系的核形保持不变。巨核细胞胞核逐渐增大并分叶，分叶不规 则。堆叠成为一巨大的核。 （3）核位置：红细胞系胞核位置居中（呈岛状，核四周均有胞质）； 粒细胞、单核细胞及浆细胞的核常偏位；淋巴细胞核常一侧着边，仅核的 一侧有胞质。 （4）染色质：由细致、均匀、稀疏到粗糙紧密，甚至紧缩成块，着色 由浅变深。 （5）核膜：由不明显到明显。 （6）核仁：由清晰到模糊不清最后消失。一般原始阶段均有核仁，早 幼阶段核仁模糊不清或消失，中幼阶段多无核仁。 3.细胞质 （1）量：由少量到较多量，但淋巴细胞系不同。 （2）颗粒：从无到有，由非特异性颗粒到特异性颗粒。如原始粒细胞 一般无颗粒，早幼粒细胞出现非特异性嗜天青颗粒，中幼粒以后各阶段细 胞嗜天青颗粒基本消失而代之以大量特异性颗粒（中性、嗜酸性、嗜碱性 颗粒）。淋巴细胞颗粒较少，部分细胞可含少量非特异性颗粒。红细胞系胞 质中无颗粒。 4.胞核与胞质之比，一般由大变小，即由核大质少到核小质多。 【骨髓细胞形态学特点】 1.红细胞系统