存在的问题 ·对特定座位基因转移，目前还存在较大 困难； 随机插入可能引起后代的基因突变
存在的问题 l 对特定座位基因转移，目前还存在较大 困难； l 随机插入可能引起后代的基因突变
二、基因治疗的方法 基因治疗的关键性步骤 目的基因的获得与转移
二 、基因治疗的方法 基因治疗的关键性步骤---- 目的基因的获得与转移
一)目的基因的获得一 正常基因的分离与克隆 基因治疗首先获得目的基因通常从基因组中分离 基因克隆 定位 表达 ↓ 评价表达情况
正常基因的分离与克隆
二)外源基因的转移 通过不同方法，将目的基因转移至受体 细胞
l 通过不同方法，将目的基因转移至受体 细胞
1)物理方法 (1)电穿孔法(electroporotion)将细胞置于高 压脉冲电场中，通过电压使细胞产生可逆性的穿 孔。周围基质中的DNA可渗进细胞，进而表达。 瞬间 。细胞 →细胞膜核膜通透性增加 高压脉冲 DNA渗入细胞