测微仪 连接管 连接管 50毫升玻璃注射器 夹子玻璃注射器 充满 矿物油 测微注射器 聚光管 连持卵管 连注射器 94 94 显微操作仪 平台 94 去除橡皮垫 省略日镜以利作图消晰 图69显微注射仪示意图 6
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显微注射法获得转基因園的成活率 100 90 80 70 目 60 ☑鼠 100 0 即使 10 0 ☑ 注 出生后成活 转基因后代
7 显微注射法获得转基因鼠的成活率
二、逆转录病毒法 步骤: 1.逆转录病毒载体的构建 2选择和培养包装细胞系 3.重组病毒DNA导入包装细胞 4.收集重组病毒颗粒 5.感染胚细胞,使细胞转化 此法是目前制备转基因鸡最 有效和最成功的方法。 ww3n.con3ar装 密 8
8 二、逆转录病毒法 步骤: 1.逆转录病毒载体的构建 2.选择和培养包装细胞系 3.重组病毒DNA导入包装细胞 4.收集重组病毒颗粒 5.感染胚细胞,使细胞转化 此法是目前制备转基因鸡最 有效和最成功的方法
二、逆转录病毒法 转染或感染 感染性病毒 RNA转录 包装 R兴CDNA]LTR 穿梭馥体 RNA转录 一一病毒蛋白 回 A(n 醒 Pr gag po! 不包装 空壳病毒 反转录病毒载体的工作原理:寄生在受体细胞中的重组病毒由 于没有包装信号,能生产病毒RNA和所有蛋白质,但不能包装 成病毒颗粒;病毒载体转化受体细胞后,载体上的包装信号将 使包装蛋白把载体包装成为侵染性的病毒颗粒
9 反转录病毒载体的工作原理:寄生在受体细胞中的重组病毒由 于没有包装信号,能生产病毒RNA和所有蛋白质,但不能包装 成病毒颗粒;病毒载体转化受体细胞后,载体上的包装信号将 使包装蛋白把载体包装成为侵染性的病毒颗粒。 二、逆转录病毒法