第三章细胞的破碎和分离 3.1分类 3.2细胞破碎理论 3.3细胞破碎技术 34物理法和化学法的比较 3.5破碎方法的选择 3.6细胞破碎的评价 3.7基因工程表达产物
第三章 细胞的破碎和分离 3.1 分类 3.2 细胞破碎理论 3.3 细胞破碎技术 3.4 物理法和化学法的比较 3.5 破碎方法的选择 3.6 细胞破碎的评价 3.7 基因工程表达产物
31分类 物理法 化学法 固体剪切法(珠磨法)酶溶法 液体剪切法 化学降解法(酸碱法) 撞击法 表面活性剂法 超声法 有机溶剂膨胀法 渗透法 萃取法
3.1 分 类 物理法 化学法 固体剪切法(珠磨法) 酶溶法 液体剪切法 化学降解法(酸碱法) 撞击法 表面活性剂法 超声法 有机溶剂膨胀法 渗透法 萃取法
3.2细胞破碎理论 1)、细胞破碎 A压撞B剪切Ca渗透 Cb冻胀D破壁破膜 剪切力F:假定细胞直径为d(in:m),维持球体所需的综合维 持力为6(in:Nm,则破碎细胞所需F(in:Pa)为 F=48/a 如利用流体剪切力τ(Pa)的作用,则在牛顿流体中 则破碎细胞所需的速度梯度为: du 4
3.2 细胞破碎理论 1)、细胞破碎 A 压撞 B 剪切 Ca 渗透 Cb 冻胀 D 破壁破膜 剪切力F: 假定细胞直径为d(in: m),维持球体所需的综合维 持力为(in: N/m),则破碎细胞所需F(in: Pa)为 如利用流体剪切力(Pa)的作用,则在牛顿流体中 则破碎细胞所需的速度梯度为:
3.2细胞破碎理论 意义:细胞直径↓,所需压力或剪切力个,破碎难度↑ 渗透压法:渗透压差(△π)为 △x=盘cR7 △c=细胞内外小分子的浓度差,R=气体常数,T=绝对温度 2)、产物释放 kR break release 如细胞破碎速度与未破碎细胞浓度成正比,则有 cx =k B X
3.2 细胞破碎理论 意义:细胞直径,所需压力或剪切力,破碎难度。 渗透压法:渗透压差()为 c=细胞内外小分子的浓度差,R=气体常数,T = 绝对温度。 2)、产物释放 如细胞破碎速度与未破碎细胞浓度成正比,则有
3.2细胞破碎理论 如破碎cl产物释放的速度与celi外的浓度差成正比,则有 x 0 X k2(2 d t 瑟t x m为产物的最大释放浓度,x为起始细胞浓度,从上三式得 d c dc +(k2+k2)=k2 dt dt 上式为两步释放的速度方程,如细胞破碎或产物释放的其中 步很快,则表现为一级动力学释放过程,此时方程为 破碎速度控制过程: 释放速度控制方程: C k dt B Cm N
3.2 细胞破碎理论 如破碎cell产物释放的速度与cell内外的浓度差成正比,则有 cm为产物的最大释放浓度,x0为起始细胞浓度,从上三式得 上式为两步释放的速度方程,如细胞破碎或产物释放的其中 一步很快,则表现为一级动力学释放过程,此时方程为 破碎速度控制过程: 释放速度控制方程: