3.3细胞破碎技术 1)、固体剪切法(珠磨法,c最有效的物理破碎法) 操作简介 日 漏u畦 7 7 E 图3.5动力分离器,可调节其缝隙 (0.02~0.03m)将微球与细胞加以分离 图3.6 Netzsch- Molinex KE5搅拌磨简图 A一细胞悬浮液进口;B-微珠加入口;C-破碎细胞出口; 电动机2一三角皮带3一轴承;4—联轴节 D-冷却剂夹套;E一礤片;F一分隔礤片;G-动力分离器 5-筒状施网;6一搅拌藁片;7—降温夹套冷 却水进出口:8—底部筛板;9—温度测量口 10—循环泵
3.3 细胞破碎技术 1)、固体剪切法(珠磨法, c最有效的物理破碎法) 操作简介
3.3细胞破碎技术 计算 破碎遵循一级动力学定律,即 do B d t 对上述方程积分得 血(cn/(cx-c)=起 对于n次连续搅拌研磨操作,则得蛋白质的物料平衡式 +(ka/n C B=v/Q θ:平均停留时间,V:磨腔的总体积,Q:发酵液的流量
3.3 细胞破碎技术 计算 破碎遵循一级动力学定律, 即 对上述方程积分得 对于n次连续搅拌研磨操作,则得蛋白质的物料平衡式 :平均停留时间,V:磨腔的总体积,Q:发酵液的流量
3.3细胞破碎技术 影响因素 a)转盘外缘速度(见下图k=K 适合条件:圆盘外缘速度<20m/s,一般在5-15m 百画 搅拌速率、微珠体积 20 与蛋白质释放的关系 70%、△-809, 断10d -859下的蛋白质 6}8 释放率(珠粒:0.55 085mm,料液100Lh 搅拌器外缘速度/(m/s) 细胞浓度409) b)珠粒添量和大小 添量:(见上图,添量体积一般占总体积的80-90%) 粒径:一般在0.2mm(实验室)<0.4mm(工业)。最终由实验确定
3.3 细胞破碎技术 影响因素 a) 转盘外缘速度(见下图): 适合条件:圆盘外缘速度< 20 m/s, 一般在 5-15 m/s。 b) 珠粒添量和大小 添量:(见上图,添量体积一般占总体积的80-90%) 粒径:一般在0.2mm(实验室), < 0.4 mm(工业)。最终由实验确定
3.3细胞破碎技术 c)温度:温度在5-40°C范围内对破碎影响较小。但研磨产热 功率个,温度↑。如产物热不稳定,必须控温 d)细胞浓度x:最佳x由实验确定。一般产热量随细胞浓度的 降低而下降,但单位细胞重量的能耗个。 e)破碎效率:E=Rxq R:每kg成品细胞(如酵母)释放的蛋白量,Q:物料流量, P’:珠磨机消耗的功率。 f流量Q:破碎为一级反应。Q个E个,R↓;Q↓,E↓,R↑
3.3 细胞破碎技术 c) 温度:温度在5-40C范围内对破碎影响较小。但研磨产热, 功率 ,温度 。如产物热不稳定,必须控温。 d) 细胞浓度x:最佳x由实验确定。一般产热量随细胞浓度的 降低而下降,但单位细胞重量的能耗 。 e) 破碎效率: R:每kg成品细胞(如酵母)释放的蛋白量,Q:物料流量, P’:珠磨机消耗的功率。 f) 流量Q:破碎为一级反应。Q, E,R;Q,E,R