3 核酸内切酶切开二聚 3 体的5末端形成3 T二T 核酸内切酶 OH和5-P的单链缺口 核酸外切酶从5P到 T〓TP0HS 3’-OH方向切除二聚 核酸外切酶 体,并扩大缺口 A一A 3 DNA聚合酶以另 3 OH 条互补链为模板,从 T〓T 原有链上暴露的3 DNA聚合酶 oH端起合成缺失片 5 A一A 3 段 DNA连接酶 连接酶将新合成链的3 A-A OH与原链的5-P相连接 3 正常DNA
核酸内切酶切开二聚 体的5’末端,形成3’- OH和5’-P的单链缺口 核酸外切酶从5’-P到 3’-OH方向切除二聚 体，并扩大缺口 DNA聚合酶以另一 条互补链为模板，从 原有链上暴露的3’- OH 端起合成缺失片 段 连接酶将新合成链的3’- OH与原链的5’-P相连接
紫外诱变的特点 方便、诱变效果很好的常用诱变剂 在红光下操作或暗培养 参数:紫外灯功率、工作距离、照射时恂
紫外诱变的特点 • 方便、诱变效果很好的常用诱变剂 • 在红光下操作或暗培养 • 参数：紫外灯功率、工作距离、照射时间
4225溴尿嘧啶诱变碱基类似物机③8嫁分 与碱 的结构类似 Bro……H—N 在DNA复制时,它们 可以被 误地掺入 1N—H…N NH—N DNA 起诱变效应 ·H—N 5-BU(酮式)腺嘌呤5-BU(烯醇式)鸟嘌呤 酮式的5-BU结构与胸腺 嘧啶相似,与A配对 A: T BUk G:BUeG氵c 5-BU很容易进行酮式与 :BUe A: T 1 G:C A: BUK 烯醇式结构的互变异构 A: BU G:C一 ←A:TA:BU A: T-G: C A: T 烯醇式5-BU不与A而与G配对 参数:浓度、时间、缓冲液 A:T→G:C
4.2.2 5-溴尿嘧啶诱变——碱基类似物 机理： 与碱基的结构类似， 在DNA复制时，它们 可以被错误地掺入 DNA，引起诱变效应 酮式的5-BU结构与胸腺 嘧啶相似 ，与A配对 5-BU很容易进行酮式与 烯醇式结构的互变异构 烯醇式5-BU不与A而与G配对 A：T→G：C 参数：浓度、时间、缓冲液
诱变育种的基本过程如下 选择合适的出发菌株 制备待处理的菌悬液 诱变处理 筛选 保和扩大试验 合适诱变剂量的选择 在诱变处理前,一般应预先做诱变剂用量对菌体 死亡数量的致死曲线,选择合适的处理剂量
诱变育种的基本过程如下： 在诱变处理前，一般应预先做诱变剂用量对菌体 死亡数量的致死曲线，选择合适的处理剂量。 合适诱变剂量的选择
出发菌株的选择 一是考虑出发菌株是否具有特定生产性状的能力或 潜力,即菌株是否具有产生特定代谢产物的催化酶 系的基因。 菌株来源·自然界直接分离到的野生型菌株 °经历过生产条件考验的菌株 已经历多次育种处理的菌株 其次是出发菌株最好已具备一些有利的性状,如生 长速度快、营养要求低和产孢子早而多的菌株
• 出发菌株的选择 一是考虑出发菌株是否具有特定生产性状的能力或 潜力，即菌株是否具有产生特定代谢产物的催化酶 系的基因。 •自然界直接分离到的野生型菌株 •经历过生产条件考验的菌株 •已经历多次育种处理的菌株 菌株来源 其次是出发菌株最好已具备一些有利的性状，如生 长速度快、营养要求低和产孢子早而多的菌株