5菌种的衰退、复壮及保藏 5.1菌种的衰退与复壮的概念 (1).衰退( degeneration):菌种在培养或保 藏过程中,由于自发突变的存在,出现某些原 有优良生产性状的劣化、遗传标记的丢失等现 象,称为菌种的衰退。 衰退的原因:④基因突变,②分离现象。 常见的衰退现象: 菌落和细胞形态的改变; 生长速度缓慢,产孢子越来越少 抵抗力、抗不良环境能力减弱等。 代谢产物生产能力或其对宿主寄生能力下降;
5.1 菌种的衰退与复壮的概念 (1).衰退（degeneration） ：菌种在培养或保 藏过程中，由于自发突变的存在，出现某些原 有优良生产性状的劣化、遗传标记的丢失等现 象，称为菌种的衰退。 衰退的原因：①基因突变，②分离现象。 常见的衰退现象： 菌落和细胞形态的改变； 生长速度缓慢，产孢子越来越少； 抵抗力、抗不良环境能力减弱等。 代谢产物生产能力或其对宿主寄生能力下降； 5 菌种的衰退、复壮及保藏
(2)菌种的复壮( rejuvenation):使衰退的菌种 恢复原来优良性状。独义的复壮是指在菌种已发生衰退的情况 下,通过纯种分离和生产性能测定等方法,从衰退的群体中找 出未衰退的个体,以达到恢复该菌原有典型性状的措施;广义 的复壮是指在菌种的生产性能未衰退前就有意识的经常、进行 纯种的分离和生产性能测定工作,以期菌种的生产性能逐步提 高。实际上是利用自发突变(正变)不断地从生产中选种 菌种的复壮揞施: ①纯种分离:(平板划线法、涂布法、倾注法、单细胞挑取法等)。 ②通过寄主体内生长进行复壮(如 Bacillus thuringiensis的复壮) ③淘汰已衰退的个体(采用比较激烈的理化条件进行处理,以杀死生命力较 差的已衰退个体)。 ④采用有效的菌种保藏方法
(2) 菌种的复壮（rejuvenation）：使衰退的菌种 恢复原来优良性状。狭义的复壮是指在菌种已发生衰退的情况 下，通过纯种分离和生产性能测定等方法，从衰退的群体中找 出未衰退的个体，以达到恢复该菌原有典型性状的措施；广义 的复壮是指在菌种的生产性能未衰退前就有意识的经常、进行 纯种的分离和生产性能测定工作，以期菌种的生产性能逐步提 高。实际上是利用自发突变（正变）不断地从生产中选种 菌种的复壮措施： ①纯种分离：（平板划线法、涂布法、倾注法、单细胞挑取法等）。 ②通过寄主体内生长进行复壮（如Bacillus thuringiensis的复壮） ； ③淘汰已衰退的个体（采用比较激烈的理化条件进行处理，以杀死生命力较 差的已衰退个体）。 ④采用有效的菌种保藏方法
(3)防止菌种衰退的方法: ①控制传代次数(-般在DNA的复制过程中,碱基的错 配率是5x10-4,自发突变的频率为108~109,采用良好的菌种保藏 方法,可以减少移种和传代的数); ②选择合适的培养条件; ③采用不同类型的细胞进行传代(对丝状微生 物而言,通常采用稳定的单核孢子进行接种) ④采用有效的菌种保藏方法
(3)防止菌种衰退的方法： ①控制传代次数（一般在DNA的复制过程中，碱基的错 配率是5x10-4，自发突变的频率为10-8~10-9，采用良好的菌种保藏 方法，可以减少移种和传代的数）； ②选择合适的培养条件； ③采用不同类型的细胞进行传代（对丝状微生 物而言，通常采用稳定的单核孢子进行接种）； ④采用有效的菌种保藏方法
5.2、菌种保藏 (1)目的 ①存活,不丢失,不污染 ②防止优良性状丧失 ③随时为生产、科研提供优良菌种 (2)原理:选用优良的纯种,(最好是休眠体,如分 生孢子、芽胞等),刨造降低微生物代谢活动强度, 生长繁殖受抑制,难以发生突变的环境条件。(其环 境要素是干燥、低温、缺氧、缺营养以及添加保护剂 等)
5.2、菌种保藏： (1) 目的： ①存活，不丢失，不污染 ②防止优良性状丧失 ③随时为生产、科研提供优良菌种 (2) 原理：选用优良的纯种，（最好是休眠体，如分 生孢子、芽胞等），创造降低微生物代谢活动强度， 生长繁殖受抑制，难以发生突变的环境条件。（其环 境要素是干燥、低温、缺氧、缺营养 以及添加保护剂 等）
(3)菌种保藏的方法 连续在培养基上(内)移种 菌种保藏方法 生活态传代培养保藏法L连续在活宿主上(内)移种 固体斜面 湿法〈半固体琼脂柱 休眠态 液体介质(蒸馏水、糖液、其它溶液) 干法「藏在玻璃管内 吸附在合适的载体上
菌 连续在培养基上（内）移种 种 生活态 传代培养保藏法 连续在活宿主上（内）移种 保 固体斜面 藏 湿法 半固体琼脂柱 方 休眠态 液体介质（蒸馏水、糖液、其它溶液） 法 干法 藏在玻璃管内 吸附在合适的载体上 (3)菌种保藏的方法