(2)米伦氏反应:Tyr黄色 (3)坂口反应:Arqg 红色 (4)乙醛酸反应:Typ 鲜红色 5.紫外吸收性:A=280nm(Tyr、Phe、Trp) 6.氨基酸的分离分析:互不相溶的两相:固定相 流动相 (1)滤纸层析滤纸吸附水 有机溶剂 Kd=CA/CBRf(值)=X/Y
5. 紫外吸收性：λ= 280 nm (Tyr 、 Phe 、 Trp) （2）米伦氏反应：Tyr 黄色 (3) 坂口反应： Arg 红色 （4）乙醛酸反应：Typ 鲜红色 6. 氨基酸的分离分析：互不相溶的两相：固定相 流动相 （1）滤纸层析：滤纸吸附水 有机溶剂 Kd = C A / C B Rf（值）= X / Y
在滤纸层析中,从原点至氨基酸停留点的距离(x)与原点至溶剂前沿的距离(Y)之比,即 y称为B值(图32)0只要溶剂系统温度湿度和滤纸型号等实验条件确定则每种藩 酸的R值是恒定的。 十原点A (1)丁醇一酸 Glu G 溶剂 前沿 r 长 氨基酸 显色点 Tyr His 滤纸 0- ③ Val 原点 A 将Pro 6 图3-22滤纸层析中的 图321氨基酸的双向滤纸层析图谱 R2值,B2=
(2)离子交换层析: 树一8O3五(氢型) N五a 树脂-80Xat钠到)+-cf-COOH、树脂8GB-CH-CO0 或 (pE<pI) 树脂一NOH-(氢氧型)NH2 k:3 或 +R-CH-C0树脂一 NEt.HCHC00+ 树脂一NR扌C (pH>pI 分离氨基酸混合物经常使用强酸型阻离子交换树脂。在交换柱中,树脂先用碱处理成钠 型,将氨基酸混合液(H28)上柱。在pH2-3时,氨基酸主要以阳离子形式在,与树脂 上的钠离子发生交换而被“挂”在树脂上。氮基酸在树脂上结合的牢程度即氮基酸与树脂间 的亲和力,主要决定于它们之间的静电吸引,其次是氨基酸侧链与树脂基质聚苯乙烯之间的疏 水相互作用。在pH3左右氨基酸与阳离子交换树脂之间的静电吸引的大小次序是碱性氨基酸 (R2+)>中性氨基酸(R+)>酸性氨基酸(R°)。因此氨基酸的洗出顺序大体上是酸性氨基酸,中 性氨基酸,最后是碱性氨基酸。由于氨基酸和树脂之间还存在疏水相互作用,所以氨基酸的全 部洗出顺序如图3-25所示。为了使氨基酸从树脂柱上洗脱下来,需要降低它们之间的亲和力 有效的方法是逐步提高洗脱剂的pH和盐浓度(离子强度),这样各种氨基酸将以不同的速度 被洗脱下来。目前已有全部自动化的氨基酸分析仪( amino acid analyzer)。氨基酸分析仪的 图解见图3-28。氨基酸混合物的分离图谱见图3-25
（2）离子交换层析：
(3 HPLC 溶剂 贮存器 漆剂 过滤器 ∠近样室 ↓—恒温装豎 泵 柱 检测器 A 记录仪 收集器 图3-28高效液相色谱的图解 (4)气相色谱:流动相为气体
（3）HPLC： （4） 气相色谱：流动相为气体
第二节蛋白质 重点内容 1、构型与构像 2、-螺旋与β-折叠 3、蛋白质的三级、四级结构与功能 4、蛋白质的理化性质与变性作用 5、蛋白质的别构作用 6、蛋白质的分离分析
第二节 蛋白质 重点内容 1、构型与构像 2、α-螺旋与β-折叠 3、蛋白质的三级、四级结构与功能 4、蛋白质的理化性质与变性作用 5、蛋白质的别构作用 6、蛋白质的分离分析