林病研究法实验指导书
林病研究法实验指导书
目录实验一标本的采集与制作实验二病原微生物培养基的制作和灭菌6实验三病原微生物的分离、纯化和培养12实验四普通光学显微镜的构造及使用方法16实验五显微镜测微尺的校准与使用22实验六病原菌孢子萌发实验..26实验七临时玻片的制作28实验八病原菌的接种实验31实验九质粒DNA的提取与酶切33
目录 实验一 标本的采集与制作.3 实验二 病原微生物培养基的制作和灭菌. 6 实验三 病原微生物的分离、纯化和培养.12 实验四 普通光学显微镜的构造及使用方法.16 实验五 显微镜测微尺的校准与使用.22 实验六 病原菌孢子萌发实验.26 实验七 临时玻片的制作.28 实验八 病原菌的接种实验.31 实验九 质粒 DNA 的提取与酶切.33
实验一标本的采集与制作林木病害标本是鉴定病害的依据，是科学研究的资料，又是陈列展览、宣传、教学用的形象用具，因此标本的采集和制作是一件重要的经常性的工作。标本制作的方法分为干燥法、浸渍法保存和微小的标本可制成玻片。制作和保存标本以能尽量保持原有性状为原则。干燥法简单而经济，应用也最广。一、目的通过采集和制作标本，了解植物病害标本采集的要求，学会标本的采集与记录，掌握植物病害标本的制作方法，进一步巩固病害知识，每人完成1份病害标本制作。二、原理室外采集标本是获取植物病害标本的重要途径，也是熟悉植物病害的症状，了解植物病害发病情况的最好方式。植物病害的发病时期与植物的生育期及当地的气候条件和生产条件有着密切的关系，所以在采集标本前应对某种植物病害的发病条件有着比较清楚的了解。首先，应明确在当地的气候条件和生产条件下，某种植物病害的始发期和盛发期；某种植物病害主要在植物的哪一个生育期间发病；以及某种植物病害主要发生在哪些植物上等等。标本的制作是为了日后能较为方便地观察植物病害的症状，并能及时提供研究的材料。稳妥的保存方法可为教学及相关的科研工作提供可靠的保障。无论用干燥制作法保存标本，还是用浸渍制作法保存标本，都是为了尽量减缓所保存标本变质的速度或不使其腐烂霉变。同时，也是为了尽量使标本保持其原色，以延长标本的使用时间和提高标本的保存质量。三、采集和制作标本用具采集夹、标本夹、标本纸、标本箱（筒）、剪刀、修枝剪、高枝剪、手锯手铲、纸袋、标签、手持放大镜及采集记录本、海拔仪等
实验一 标本的采集与制作 林木病害标本是鉴定病害的依据，是科学研究的资料，又是陈列展览、宣 传、教学用的形象用具，因此标本的采集和制作是一件重要的经常性的工作。 标本制作的方法分为干燥法、浸渍法保存和微小的标本可制成玻片。制作和保 存标本以能尽量保持原有性状为原则。干燥法简单而经济，应用也最广。 一、目的 通过采集和制作标本，了解植物病害标本采集的要求，学会标本的采集与 记录，掌握植物病害标本的制作方法，进一步巩固病害知识，每人完成 1 份病 害标本制作。 二、原理 室外采集标本是获取植物病害标本的重要途径，也是熟悉植物病害的症状， 了解植物病害发病情况的最好方式。植物病害的发病时期与植物的生育期及当 地的气候条件和生产条件有着密切的关系，所以在采集标本前应对某种植物病 害的发病条件有着比较清楚的了解。首先，应明确在当地的气候条件和生产条 件下，某种植物病害的始发期和盛发期；某种植物病害主要在植物的哪一个生 育期间发病；以及某种植物病害主要发生在哪些植物上等等。 标本的制作是为了日后能较为方便地观察植物病害的症状，并能及时提供 研究的材料。稳妥的保存方法可为教学及相关的科研工作提供可靠的保障。无 论用干燥制作法保存标本，还是用浸渍制作法保存标本，都是为了尽量减缓所 保存标本变质的速度或不使其腐烂霉变。同时，也是为了尽量使标本保持其原 色，以延长标本的使用时间和提高标本的保存质量。 三、采集和制作标本用具 采集夹、标本夹、标本纸、标本箱(筒)、剪刀、修枝剪、高枝剪、手锯、 手铲、纸袋、标签、手持放大镜及采集记录本、海拔仪等
四、实验操作病叶片、茎、果的采集和制作：可夹于吸水的标本纸或报纸中，用剪刀剪取病植物上的发病叶片。如杨树灰斑的病叶、杨树叶枯病的病叶、松落针病的病叶、白杨叶锈病的病叶、杨树灰斑病的病叶、丁香白粉病的病叶及梨黑星病的病叶等，装入采集夹中。尽量剪取整个一致的。用标本夹夹紧，数天即成。在压制过程中必须勤换干纸。高温高湿的天气，标本易发霉变色，更须勤换纸。通常前三四日每日换纸一二次以后每二三日换一次，至全部干燥为止。较大较大枝条和坚果采集和制作：挑取病害标本症状典型的采集，高等担子菌的革质或木质的子实体可直接晒干、烤干或风干或放入烘烤箱中以30-45℃烘干。肉质多水的病害标本采集和制作：制作伞菌或其他肉质菌标本：沿中心纵切成厚约1-1.5mm薄片（观察菌褶、菌柄二者关系），并把另一部分柄及挖去约1mm厚的菌盖（以观察色泽、外部形态）贴在涂有明胶液或万能胶的薄纸上，按标本形状将四周薄纸剪去，夹在吸水纸中压干，并勤换纸，干燥后贴在台纸上固定即成。一般情况下，各种病害的标本最好采集10份以上。在采集病斑类的叶片标本时，一个叶片上应只有一种类型的病斑。尤其是在各种病害混合发生时采集标本，更需进行仔细的选择；对于真菌病害，标本应带有子实体，无子实体在回到室内后，鉴定将非常困难。标本采集记录：采集时，要随时作标记。标签上一般应记录如下项目：寄主名称：俗名和学名都有时，应同时记下。采集时间：一般应记录年、月、日。采集地点：一般记录到省、市（县）即可，需要时也可记录到镇（乡）等。海拔高度：按海拔仪指示记录
四、实验操作 病叶片、茎、果的采集和制作： 可夹于吸水的标本纸或报纸中，用剪刀剪取病植物上的发病叶片。如杨树 灰斑的病叶、杨树叶枯病的病叶、松落针病的病叶、白杨叶锈病的病叶、杨树 灰斑病的病叶、丁香白粉病的病叶及梨黑星病的病叶等，装入采集夹中。尽量 剪取整个一致的。用标本夹夹紧，数天即成。在压制过程中必须勤换干纸。高 温高湿的天气，标本易发霉变色，更须勤换纸。通常前三四日每日换纸一二次， 以后每二三日换一次，至全部干燥为止。 较大较大枝条和坚果采集和制作： 挑取病害标本症状典型的采集，高等担子菌的革质或木质的子实体可直接 晒干、烤干或风干或放入烘烤箱中以 30-45℃烘干。 肉质多水的病害标本采集和制作： 制作伞菌或其他肉质菌标本：沿中心纵切成厚约 1-1.5mm 薄片（观察菌褶、 菌柄二者关系），并把另一部分柄及挖去约 1mm 厚的菌盖（以观察色泽、外部 形态）贴在涂有明胶液或万能胶的薄纸上，按标本形状将四周薄纸剪去，夹在 吸水纸中压干，并勤换纸，干燥后贴在台纸上固定即成。 一般情况下，各种病害的标本最好采集 10 份以上。在采集病斑类的叶片标 本时，一个叶片上应只有一种类型的病斑。尤其是在各种病害混合发生时采集 标本，更需进行仔细的选择；对于真菌病害，标本应带有子实体，无子实体在 回到室内后，鉴定将非常困难。 标本采集记录： 采集时，要随时作标记。标签上一般应记录如下项目： 寄主名称：俗名和学名都有时，应同时记下。 采集时间：一般应记录年、月、日。 采集地点：一般记录到省、市(县)即可，需要时也可记录到镇(乡)等。 海拔高度：按海拔仪指示记录
生态环境：按照山坡地、平坦地、沼泽地；砂质土、肥沃土等记录。采集序号：一般按照采集时间的先后顺序记录。采集人姓名：如实填写。提示：寄主名称如有不清楚的，能及时向当地人问明更好；如不能，应记下采集地的位置以及寄主的一些主要性状，以备鉴定时参考。必要时还应将寄主的花、果实以及其他部位标本一起采得，以便凭借寄主的标本对该寄主进行分类鉴定。森林病害标本采集记录卡片标本号采集地点生态环境（林分状况、立地条件）寄主名称（通用名及学名）危害部位标本性质（寄生或腐生）发病程度（发病率及散布程度）症状描述病名或学名鉴定人采集人附注五、实验报告1.请回答标本采集注意事项。2.整理并列出所采集标本类型，症状类型
生态环境：按照山坡地、平坦地、沼泽地；砂质土、肥沃土等记录。 采集序号：一般按照采集时间的先后顺序记录。 采集人姓名：如实填写。 提示：寄主名称如有不清楚的，能及时向当地人问明更好；如不能，应记 下采集地的位置以及寄主的一些主要性状，以备鉴定时参考。必要时还应 将寄主的花、果实以及其他部位标本一起采得，以便凭借寄主的标本对该 寄主进行分类鉴定。 五、实验报告 1. 请回答标本采集注意事项。 2. 整理并列出所采集标本类型，症状类型