普通大肠杆菌为14N-DNA,14N和15N是N元素的两 种非放射性同位素,其中,15N比14N“重”。当 分别提取出其相应DNA后,在进行CsCI等密度梯度 离心时,15N-DNA与14N-DNA由于两者“重量”的差 别而位于离心管不同位置,前者称为“重”DNA, 后者称为“轻”DNA。因而可通过密度梯度离心而 区分开来。 16
16 普通大肠杆菌为14N-DNA, 14N和15N是N元素的两 种非放射性同位素,其中,15N比 14N“重”。当 分别提取出其相应DNA后,在进行CsCl等密度梯度 离心时,15N-DNA与14N-DNA由于两者“重量”的差 别而位于离心管不同位置,前者称为“重”DNA, 后者称为“轻”DNA。因而可通过密度梯度离心而 区分开来
15N-DNA 14N-DNA 15N 在含N的培养基上 生长的大肠杆菌 奎食的森释吉 含密度梯度CsC1 的离心管 超速离心 ”重”DNA带 轻"DNA带 (位于高密度区 位于低密度区) 用紫外吸收检测离 心管中DNA的位置 重"DNA带 ”轻“DNA带 17
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大肠杆菌 14NH4CI 大肠杆菌 (15N-DNA) ◆第一代取样 ◆第二代取样 ◆第三代取样 (分离DNA) ◆■■■▣ 18
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亲代DNA分子 及& 15N-DNAI4NDNA混合 第一子代分子 §& 个V 然义不 第二子代分子
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为了证实DA分子中只有一条是新合成的, Mese l son和Stahl将提取出的第1代大肠杆菌DNA加 热处理,使其变性后仍通过CsCl超速离心分离, 在紫外吸收扫描图上可见两个比重不同的紫外吸 收峰,从而确证了第1代细菌的DNA是由两条比重 不同的链所组成,排除了其它可能性。 20
20 为了证实DNA分子中只有一条是新合成的, Meselson和Stahl将提取出的第1代大肠杆菌DNA加 热处理,使其变性后仍通过CsCl超速离心分离, 在紫外吸收扫描图上可见两个比重不同的紫外吸 收峰,从而确证了第1代细菌的DNA是由两条比重 不同的链所组成,排除了其它可能性