图2-10D1C显微镜下的硅藻(伪彩色) DIC显微镜使细胞的结构,特别是一些较大的细胞器,如核、线粒体等,立体感特别 强,适合于显微操作。目前像基因注入、核移植、转基因等的显微操作常在这种显微镜下进 行。 (八)、倒置显微镜 组成和普通显微镜一样,只不过物镜与照明系统颠倒,前者在载物台之下,后者在载物 台之上(图2-11),用于观察培养的活细胞,具有相差物镜
图 2-10 DIC 显微镜下的硅藻(伪彩色) DIC 显微镜使细胞的结构,特别是一些较大的细胞器,如核、线粒体等,立体感特别 强,适合于显微操作。目前像基因注入、核移植、转基因等的显微操作常在这种显微镜下进 行。 (八)、倒置显微镜 组成和普通显微镜一样,只不过物镜与照明系统颠倒,前者在载物台之下,后者在载物 台之上(图 2-11),用于观察培养的活细胞,具有相差物镜
图2-11莱卡倒置显微镜 进入20世纪80年代以来,光学显微镜的设计和制作又有了很大的发展,其发展趋势主 要表现在,注重实用性和多功能方面的改进。在装配设计上趋于采用组合方式,集普通光镜加 相差、荧光、暗视野、DC、摄影装置于一体,从而操作灵活,使用方便。 二、电子显微镜 (一)、透射电子显微镜 1、基本原理 在光学显微镜下无法看清小于0.2μ的细微结构,这些结构称为亚显微结构 (submicroscopic structures)或超微结构(ultramicroscopic structures;ultrastructures)。 要想看清这些结构,就必须选择波长更短的光源,以提高显微镜的分辨率。1932年Ruska发
图 2-11 莱卡倒置显微镜 进入 20 世纪 80 年代以来,光学显微镜的设计和制作又有了很大的发展,其发展趋势主 要表现在,注重实用性和多功能方面的改进。在装配设计上趋于采用组合方式,集普通光镜加 相差、荧光、暗视野、DIC、摄影装置于一体,从而操作灵活,使用方便。 二、电子显微镜 (一)、透射电子显微镜 1、基本原理 在光学显微镜下无法看清小于 0.2µm 的细微结构,这些结构称为亚显微结构 (submicroscopic structures)或超微结构(ultramicroscopic structures;ultrastructures)。 要想看清这些结构,就必须选择波长更短的光源,以提高显微镜的分辨率。1932 年 Ruska发
明了以电子束为光源的透射电子显微镜(transmission electron microscope,TEM),电子束 的波长要比可见光和紫外光短得多,并且电子束的波长与发射电子束的电压平方根成反比,也 就是说电压越高波长越短。目前TEM的分辨力可达0.2nm。 电子显微镜(图2-12)与光学显微镜的成像原理基本一样,所不同的是前者用电子束作 光源,用电磁场作透镜。另外,由于电子束的穿透力很弱,因此用于电镜的标本须制成厚度约 50nm左右的超薄切片。这种切片需要用超薄切片机(ultramicrotome)制作。电子显微镜的 放大倍数最高可达近百万倍、由电子照明系统、电磁透镜成像系统、真空系统、记录系统、电 源系统等5部分构成。 表2-2不同光源的波长 名 电子束 称 可见光 紫外光 X射线 a射线 0.1Kv 10Kv 波长(nm) 390-760 13-390 0.05-13 0.005-1 0.123 0.0122
明了以电子束为光源的透射电子显微镜(transmission electron microscope,TEM),电子束 的波长要比可见光和紫外光短得多,并且电子束的波长与发射电子束的电压平方根成反比,也 就是说电压越高波长越短。目前 TEM 的分辨力可达 0.2nm。 电子显微镜(图 2-12)与光学显微镜的成像原理基本一样,所不同的是前者用电子束作 光源,用电磁场作透镜。另外,由于电子束的穿透力很弱,因此用于电镜的标本须制成厚度约 50nm 左右的超薄切片。这种切片需要用超薄切片机(ultramicrotome)制作。电子显微镜的 放大倍数最高可达近百万倍、由电子照明系统、电磁透镜成像系统、真空系统、记录系统、电 源系统等 5 部分构成。 表 2-2 不同光源的波长 名 称 可见光 紫外光 X 射线 α 射线 电子束 0.1Kv 10Kv 波长(nm) 390~760 13~390 0.05~13 0.005~1 0.123 0.0122