(1)酶与底物的中间络合物学说(Henr和 Wurtz) S+E←ES→P+E 1913年前后, Michaelis和 Menten在前人工作的基础 假定S+E·ES快速建立平衡,底物浓度远远大 于酶浓度,ES分解产物的逆反应忽略不计,推导 出下列方程: (2) Vmax[S]米氏方程 Km+ s
（1）酶与底物的中间络合物学说（Henri和Wurtz） S+E ES P+E 1913年前后，Michaelis和Menten在前人工作的基础 上， 假定 S+E ES 快速建立平衡，底物浓度远远大 于酶浓度， ES分解产物的逆反应忽略不计，推导 出下列方程： V= Vmax [S] Km + [S] （2） 米氏方程
(3)米氏方程的推导 在 Michaelis和 Menten的酶促反应动力学基础上, 1925年, Briggs和 Haldane提出酶反应分两步进行, 即“稳态平衡”理论: 第一步 E+8BEs(1)E的浓度与(1)(2)都有关系 K2 [E]为酶的总浓度 [ES]为中产物浓度 第二步:EsK3:g+p [E]-[ES]为游离酶浓度 K4 (2) [S]为底物浓度 由于[S]>>[E所以 [S]-[ES]≈[S] ES的形成速度为:4mn(6)(3) dt d] ES的分解速度: dt K2 LES]+K3 ESI (4)
（3）米氏方程的推导 ◼ 在Michaelis和Menten的酶促反应动力学基础上， 1925年，Briggs和Haldane提出酶反应分两步进行， 即“稳态平衡”理论： 第一步： 第二步： （1） （2） ES的浓度与（1）（2）都有关系 [E] 为酶的总浓度 [ES] 为中产物浓度 [E]-[ES] 为游离酶浓度 [S] 为底物浓度 由于[S][E]所以 [S]-[ES][S] ES的形成速度为： （3） ES的分解速度： （4）
K1([E]-[ES])XIS]- K2LES]+K3LES] [E]-[ES])X[S] K2+K3 ESI K1 令:2+3 Km KI ([E]-[Es])X[S] [E][S] Km所以[ES] LESI Km s]
令： Km 所以
E][S] IES]= (5) Km s] K3 ES E+P(2) K4 「ETTs y=K3[ES]所以:vK3 (6) Km sl 当所有的酶被底物饱和时,[ES]=[E]则: Vmax=k3IE (7)
（5） （2） 所以： （6） 当所有的酶被底物饱和时，[ES]=[E] 则： Vmax=K3[E] (7)
VmaxEk3[E TEST V=k3 Km ls] 将(7)代入(6)得 100 Vmax S 米氏方程 80 Km + s 60 S]<<Km时,v=Vmax/Km 当[S]>>Km时v=max 20 当[S]=Km时v=Vmax/2 68101214161820 Concentration of Substrate(umo/L)
Vmax=K3[E] (7) （6） 将（7）代入（6）得： V= Vmax [S] Km + [S] 0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 0 20 40 60 80 100 Concentration of Substrate(umol/L) Rate of Reaction(v) 米氏方程 当[S]Km时，v=Vmax/Km[S] 当[S]Km时,v=Vmax 当[S]=Km时,v=Vmax/2