第五节:蛋白质的重要性质 ■蛋白质与多肽一样,能够发生两性离解 也有等电点。在等电点时 Isoelectric oint pr),蛋白质的溶解度最小,在电 场中不移动。 在不同的pH环境下,蛋白质的电学性质 鷹不同。在外液pH低于等电点的溶液中 蛋白质粒子带正电荷,在电场中向负极 移动:在外液pH高于等电点的溶液中 蛋白质粒子带负电荷,在电场中向正极 移动。这种现象称为蛋白质电泳 (E| ectrophoresis)带电粒子在电场中移 动的现象
◼ 蛋白质与多肽一样,能够发生两性离解, 也有等电点。在等电点时(Isoelectric point pI),蛋白质的溶解度最小,在电 场中不移动。 ◼ 在不同的pH环境下,蛋白质的电学性质 不同。在外液pH低于等电点的溶液中, 蛋白质粒子带正电荷,在电场中向负极 移动;在外液pH高于等电点的溶液中, 蛋白质粒子带负电荷,在电场中向正极 移动。这种现象称为蛋白质电泳— (Electrophoresis)带电粒子在电场中移 动的现象。 ( 1 ) 蛋 白 质 的 两 性 离 解 和 电 泳 现 象 第五节:蛋白质的重要性质
电泳 蛋白质在等 Partial proton 电点pH条 digest sample streak 件下,不发 生电泳现象。 利用蛋白质a 的电泳现象, 可以将蛋白 质进行分离 纯化。 Direction of Hurter migration
电泳 ◼ 蛋白质在等 电点pH条 件下,不发 生电泳现象。 利用蛋白质 的电泳现象, 可以将蛋白 质进行分离 纯化
由于蛋白质的分子量很大(1-100nm) ⌒它在水中能够形成胶体溶液。蛋白质溶 2液具有胶体溶液的典型性质,如丁达尔 现象、布郎运动等。 由于胶体溶液中的蛋白质不能通过半透 膜,因此可以应用透析法将非蛋白的小 分子杂质除去。 透析法:以半透膜提纯蛋白质的方法叫透 析法 半透膜:只允许溶剂小分子通过,而溶质 大分子不能通过,如羊皮纸、火棉胶、 玻璃纸等
◼ 由于蛋白质的分子量很大(1-100nm), 它在水中能够形成胶体溶液。蛋白质溶 液具有胶体溶液的典型性质,如丁达尔 现象、布郎运动等。 ◼ 由于胶体溶液中的蛋白质不能通过半透 膜,因此可以应用透析法将非蛋白的小 分子杂质除去。 透析法:以半透膜提纯蛋白质的方法叫透 析法 半透膜:只允许溶剂小分子通过,而溶质 大分子不能通过,如羊皮纸、火棉胶、 玻璃纸等 ( 2 ) 蛋 白 质 的 胶 体 性 质
蛋白质胶体溶液的稳定性与它的分子量 3大小、所带的电荷和水化作用有关。 改变溶液的条件,将影响蛋白质的溶解 性质 的适当的条件下,蛋白质能够从溶液中 沉淀出来。 电荷保 雀持其稳定性,水膜和电荷一旦除去重 白质溶液的稳定性就被破坏,蛋白质就 会从溶液中沉淀下来,此现象即为蛋白 质的沉淀作用
◼ 蛋白质胶体溶液的稳定性与它的分子量 大小、所带的电荷和水化作用有关。 ◼ 改变溶液的条件,将影响蛋白质的溶解 性质 ◼ 在适当的条件下,蛋白质能够从溶液中 沉淀出来。 ◼ 定义:蛋白质在溶液中靠水膜和电荷保 持其稳定性,水膜和电荷一旦除去,蛋 白质溶液的稳定性就被破坏,蛋白质就 会从溶液中沉淀下来,此现象即为蛋白 质的沉淀作用。 ( 3 ) 蛋 白 质 的 沉 淀 作 用
可逆沉淀 在温和条件下,通过改变溶液的pH或电 ≡荷状况,使蛋白质从胶体溶液中沉淀分 离 然在沉淀过程中结构和性质都没有发生 变化,在适当的条件下,可以重新溶解 张脑液,所以这种沉淀又称为排变性 可逆沉淀是分离和纯化蛋白质的基本方 法,如等电点沉淀法、盐析法和有机溶 剂沉淀法等
◼ 在温和条件下,通过改变溶液的pH或电 荷状况,使蛋白质从胶体溶液中沉淀分 离。 ◼ 在沉淀过程中,结构和性质都没有发生 变化,在适当的条件下,可以重新溶解 形成溶液,所以这种沉淀又称为非变性 沉淀。 ◼ 可逆沉淀是分离和纯化蛋白质的基本方 法,如等电点沉淀法、盐析法和有机溶 剂沉淀法等。 ( 3 ) 蛋 白 质 的 沉 淀 作 用 可逆沉淀