株生长强弱等方面加以区别。一般多倍体表现为茎粗壮、叶厚而皱、叶色变深、生长速度减慢、花器变大等。②气孔鉴定:用刀片和镊子撕取一小块叶片下表皮(应呈透明薄膜状),置于载玻片上,滴一滴蒸馏水,加上盖玻片,在显微镜下观察气孔的密度,并用目镜测微尺测量气孔保卫细胞的长度和宽度。统计气孔保卫细胞中叶绿体的数目。测定50个气孔的大小及其保卫细胞中叶绿体的数目,计算平均值。多倍体的气孔一般比二倍体长,单位面积气孔数比二倍体少,保卫细胞内叶绿体数目比二倍体多。测量气孔长度的方法:先求目镜测微尺每小格的长度换算值。在显微镜下看准目镜测微尺与镜台测微尺前后两个完全重叠的刻度,数出双方两个重叠刻度间所包括的小格数目,依下式将目镜测微尺每小格换算为实际长度(um)。目镜测微尺每小格长度(rm)=镜台测微尺小格数×每小格长度(μm)目镜测微尺小格数用目镜测微尺量出气孔长、宽的格数,乘以换算值即得实际长度(μm)。当变换显微镜的目镜、物镜的放大倍数时,须重新调整换算值。不同的显微镜,即使用同样的放大倍数观察,也必须分别测算其换算值,不能彼此代用。气孔的密度用目镜测微网测量,计算单位面积气孔的数目。③花粉粒鉴定:将四倍体与二倍体的新鲜花粉撒于载玻片上,在显微镜下观察花粉的形态和大小。测定100个花粉粒的直径,计算其平均值。多倍体产生的花粉一般比二倍体大。通过以上间接方法,初步鉴定出可能是多倍体的植株,进一步进行直接鉴定。(2)直接鉴定法:将诱变植株的根尖细胞或花粉母细胞制片染色,在显微镜下检测染色体的数目是否真正加倍(方法同实验一植物根尖细胞有丝分裂染色体制片与观察)。五、实验结果分析1、统计不同药液浓度、不同处理方法及不同处理时间后多倍体植物的诱导率。实验材料药液浓度处理方法处理时间处理材料数目变异株数诱变率备注14
14 株生长强弱等方面加以区别。一般多倍体表现为茎粗壮、叶厚而皱、叶色变深、 生长速度减慢、花器变大等。 ② 气孔鉴定:用刀片和镊子撕取一小块叶片下表皮(应呈透明薄膜状),置 于载玻片上,滴一滴蒸馏水,加上盖玻片,在显微镜下观察气孔的密度,并用目 镜测微尺测量气孔保卫细胞的长度和宽度。统计气孔保卫细胞中叶绿体的数目。 测定 50 个气孔的大小及其保卫细胞中叶绿体的数目,计算平均值。多倍体的气 孔一般比二倍体长,单位面积气孔数比二倍体少,保卫细胞内叶绿体数目比二倍 体多。 测量气孔长度的方法:先求目镜测微尺每小格的长度换算值。在显微镜下看 准目镜测微尺与镜台测微尺前后两个完全重叠的刻度,数出双方两个重叠刻度间 所包括的小格数目,依下式将目镜测微尺每小格换算为实际长度(μm)。 目镜测微尺小格数 镜台测微尺小格数 每小格长度( ) 目镜测微尺每小格长度( ) m m 用目镜测微尺量出气孔长、宽的格数,乘以换算值即得实际长度(μm)。当 变换显微镜的目镜、物镜的放大倍数时,须重新调整换算值。不同的显微镜,即 使用同样的放大倍数观察,也必须分别测算其换算值,不能彼此代用。 气孔的密度用目镜测微网测量,计算单位面积气孔的数目。 ③ 花粉粒鉴定:将四倍体与二倍体的新鲜花粉撒于载玻片上,在显微镜下 观察花粉的形态和大小。测定 100 个花粉粒的直径,计算其平均值。多倍体产生 的花粉一般比二倍体大。 通过以上间接方法,初步鉴定出可能是多倍体的植株,进一步进行直接鉴定。 (2) 直接鉴定法:将诱变植株的根尖细胞或花粉母细胞制片染色,在显微镜 下检测染色体的数目是否真正加倍(方法同实验一植物根尖细胞有丝分裂染色体 制片与观察)。 五、实验结果分析 1、统计不同药液浓度、不同处理方法及不同处理时间后多倍体植物的诱导率。 实验材料 药液浓度 处理方法 处理时间 处理材料数目 变异株数 诱变率 备注
2、观察变异植物(四倍体)与对照植物(二倍体)的形态特征,将观测结果填入下表:气孔染色体保卫细胞花粉粒实验材料备注叶片形态气孔密度数目直径(长×宽)叶绿体数二倍体(2X)四倍体(4X)六、实验作业和思考题1、秋水仙素诱导多倍体的原理是什么?2、你认为利用秋水仙素诱导多倍体的技术要点有哪些?15
15 2、观察变异植物(四倍体)与对照植物(二倍体)的形态特征,将观测结果填 入下表: 实验材料 染色体 数目 叶片形态 气孔密度 气孔 (长×宽) 保卫细胞 叶绿体数 花粉粒 直径 备注 二倍体(2X) 四倍体(4X) 六、实验作业和思考题 1、秋水仙素诱导多倍体的原理是什么? 2、你认为利用秋水仙素诱导多倍体的技术要点有哪些?
实验五玉米一对性状的遗传分析玉米不仅是重要的粮食和饲料作物,也是良好的遗传研究材料。玉米是二倍体植物,染色体数目少(2n=20),而且在多数染色体上都各有不同数目与大小的染色粒,使染色体的个体性突出,便于识别。玉米的许多性状,如植株色泽、株高、穗长、籽粒类型等都存在相当广泛的变异,多数变异可以直接观察和辨别。玉米雌雄同株异花,进行自交、杂交都非常便利;一次授粉即可在一个果穗中得到几百个籽粒供遗传分析。玉米的适应性强,在很多环境中都能种植,也易于管理。所以1910年以后,玉米逐渐代替了豌豆成为遗传学研究的材料。一、实验目的通过对玉米一对相对性状的遗传杂交实验,进行分离规律的验证。在对玉米胚乳性状的了解基础上,使用法对分离后代进行统计学分析。二、实验原理在育种实践中,两个亲本杂交的子一代(F)遗传性状表现一致,但到第二代(F2),遗传性状就发生分离。从一个杂种F2群体看,个体间植株的高矮、穗子的大小、芒的有无、籽粒的色泽、成熟的早晚、抗逆性的强弱等遗传相对性状均出现分离。这是基于控制相对性状的一对等位基因位于同一对同源染色体上,在减数分裂形成配子时,随着同源染色体的分离,而分别分配到不同的配子中。由于形成的两种等概率的配子受精机会均等,在完全显性条件下,自交子代分离为3/4:1/4,即3:1。在F2代可以观察显、隐性性状的分离。一般用%测验进行资料的验证。O一分离实得个体数E一分离理论个体数在求出2值后,根据自由度N(即类型组数减去1)来查表,求其概率P值。如果P>0.05时,则差异不显著。(见附录四)16
16 实验五 玉米一对性状的遗传分析 玉米不仅是重要的粮食和饲料作物,也是良好的遗传研究材料。玉米是二倍 体植物,染色体数目少(2n=20),而且在多数染色体上都各有不同数目与大小的 染色粒,使染色体的个体性突出,便于识别。玉米的许多性状,如植株色泽、株 高、穗长、籽粒类型等都存在相当广泛的变异,多数变异可以直接观察和辨别。 玉米雌雄同株异花,进行自交、杂交都非常便利;一次授粉即可在一个果穗中得 到几百个籽粒供遗传分析。玉米的适应性强,在很多环境中都能种植,也易于管 理。所以 1910 年以后,玉米逐渐代替了豌豆成为遗传学研究的材料。 一、实验目的 通过对玉米一对相对性状的遗传杂交实验,进行分离规律的验证。在对玉米 胚乳性状的了解基础上,使用 2 法对分离后代进行统计学分析。 二、实验原理 在育种实践中,两个亲本杂交的子一代(F1)遗传性状表现一致,但到第二 代(F2),遗传性状就发生分离。从一个杂种 F2 群体看,个体间植株的高矮、穗 子的大小、芒的有无、籽粒的色泽、成熟的早晚、抗逆性的强弱等遗传相对性状 均出现分离。这是基于控制相对性状的一对等位基因位于同一对同源染色体上, 在减数分裂形成配子时,随着同源染色体的分离,而分别分配到不同的配子中。 由于形成的两种等概率的配子受精机会均等,在完全显性条件下,自交子代分离 为 3/4:1/4,即 3:1。在 F2 代可以观察显、隐性性状的分离。一般用 2测验进行资 料的验证。 O—分离实得个体数 E—分离理论个体数 在求出 2 值后,根据自由度 N(即类型组数减去 1)来查 2 表,求其概率 P 值。如果 P>0.05 时,则差异不显著。(见附录四)
三、实验材料及器材1、材料:玉米饱满籽粒(非甜)×皱籽粒(甜)的F1自交果穗2、器材:计算器、标记笔、表等四、实验方法和步骤将玉米果穗按照不同性状分别计数统计,记录后填入表格,然后进行分析。项目观察数(0)理论数(E)偏差d-0-E差方 d=(O-E)2(O-E)_ d?EA=Ey自由度 N=P=E五、实验作业和思考题1、上述实验材料所获得的观察资料,全班汇总填表,然后分别进行测验,根据自由度和估算的值,查阅值表,求其概率值P,验证分离规律。2、通过分析各对性状的遗传表现作出解释。17
17 三、实验材料及器材 1、材料:玉米饱满籽粒(非甜)皱籽粒(甜)的 F1 自交果穗 2、器材:计算器、标记笔、 2 表等 四、实验方法和步骤 将玉米果穗按照不同性状分别计数统计,记录后填入表格,然后进行分析。 项目 观察数(O) 理论数(E) 偏差 d= OE 差方 d 2 =(OE) 2 E d E O E 2 2 自由度 N= E d 2 2 P= 五、实验作业和思考题 1、上述实验材料所获得的观察资料,全班汇总填表,然后分别进行 2 测验,根 据自由度和估算的 2 值,查阅 2 值表,求其概率值 P,验证分离规律。 2、通过分析各对性状的遗传表现作出解释
实验六玉米两对性状的遗传分析一、实验目的采用两对相对性状的杂交遗传分析实验材料验证独立分配规律。利用对分离后代进行统计学分析。二、实验原理应用杂交方法进行植物新品种的选育,其原理就是利用基因重组。独立分配则是基因重组的一种重要形式。位于非同源染色体上的两对或两对以上的等位基因,在减数分裂形成配子时,随着非同源染色体的组合,非等位的独立基因亦进行重组。这种重组机会均等,互不干扰,所以两对独立基因产生等概率的不同配子。在完全显性的情况下,依据雌雄配子随机结合,两对基因之差的个体自交子代应有四种不同的表现型,其比例为9:3:3:1。玉米籽粒有非甜与甜、黄色与白色等相对差异。现已知控制甜粒性状的隐形基因W位于第6号染色体上,控制颜色的基因C位于第9号染色体,两个基因存在于非同源染色体上,所以杂种后代的分离表现出独立遗传,用检验可验证(方法同一对性状)。三、实验材料及器材1、材料:黄色、非甜粒×白色、甜粒的玉米F自交果穗2、器材:计算器、标记笔、表等18
18 实验六 玉米两对性状的遗传分析 一、实验目的 采用两对相对性状的杂交遗传分析实验材料验证独立分配规律。利用 2 对分 离后代进行统计学分析。 二、实验原理 应用杂交方法进行植物新品种的选育,其原理就是利用基因重组。独立分配 则是基因重组的一种重要形式。位于非同源染色体上的两对或两对以上的等位基 因,在减数分裂形成配子时,随着非同源染色体的组合,非等位的独立基因亦进 行重组。这种重组机会均等,互不干扰,所以两对独立基因产生等概率的不同配 子。在完全显性的情况下,依据雌雄配子随机结合,两对基因之差的个体自交子 代应有四种不同的表现型,其比例为 9:3:3:1。 玉米籽粒有非甜与甜、黄色与白色等相对差异。现已知控制甜粒性状的隐形 基因 W 位于第 6 号染色体上,控制颜色的基因 C 位于第 9 号染色体,两个基因 存在于非同源染色体上,所以杂种后代的分离表现出独立遗传,用 2检验可验证 (方法同一对性状)。 三、实验材料及器材 1、材料:黄色、非甜粒白色、甜粒的玉米 F1 自交果穗 2、器材:计算器、标记笔、 2 表等