刘新文,重组DNA技术 质粒载体 ◆严谨控制型质粒,拷贝数少,复制受染色体 控制。 ◆松弛控制性质粒,拷贝数多,不受细胞内染 色体控制。 5、质粒含易位子和易位现象。 Φ易位子是质粒上的特定DNA序列,它可以从 所在质粒易位于其它质粒或染色体中,它对 细菌的进化有意义
刘新文,重组DNA技术 松弛控制性质粒,拷贝数多,不受细胞内染 色体控制。 5、质粒含易位子和易位现象。 易位子是质粒上的特定DNA序列,它可以从 所在质粒易位于其它质粒或染色体中,它对 细菌的进化有意义。 质粒载体 严谨控制型质粒,拷贝数少,复制受染色体 控制
刘新文 重组DNA技术 质粒载体 理想载体的条件: 1、具有自主复制能力; 2、具有较多的拷贝数,易与宿主细胞的染 色体DNA分开; 3、分子量相对较小,能够容纳目的基因; 4、具有较多单一限制性内切酶位点; 5、有一个或多个筛选标记; 6、具有较高的遗传稳定性
刘新文,重组DNA技术 质粒载体 理想载体的条件: 1、具有自主复制能力; 2、具有较多的拷贝数,易与宿主细胞的染 色体DNA分开; 3、分子量相对较小,能够容纳目的基因; 4、具有较多单一限制性内切酶位点; 5、有一个或多个筛选标记; 6、具有较高的遗传稳定性
刘新文,重组DNA技术 质粒载体 FcoRt Chapter 28 Re 1、克隆载体 BamHI 1977年由Boliver 等人自E.coli的 Ampicillin Tetracyeline resistance Sa!l 天然质粒建成。 (ampk) ■外源基因插入位 点EcoR I 含一个复制起始 点(ori) ■抗药基因terr和 ampr Origin of replication (ori) Pvull The constructed plasmid pBR322
刘新文,重组DNA技术 The constructed plasmid pBR322 质粒载体 外源基因插入位 点EcoRⅠ 含一个复制起始 点(ori) 抗药基因terr 和 ampr 1977年由Boliver 等人自E.coli的 天然质粒建成。 1、克隆载体