刘新文，重组DNA技术 第三节重组DNA技术与分子医学的关系 ■疾病基因的发现、发展新药物、DNA诊断、基因 治疗及遗传病的防治 一、疾病相关基因分析 1、功能克隆（functional cloning):根据基因的功能 (通常是根据其蛋白质)产物来寻找、克隆与疾病相 关的基因 2、定位克隆（positional cloning):从一种致病基因 的染色体定位出发逐步缩小范围，最后克隆该基因 二、 制造生物活性蛋白
刘新文，重组DNA技术 第三节 重组DNA技术与分子医学的关系 疾病基因的发现、发展新药物、DNA诊断、基因 治疗及遗传病的防治 一、疾病相关基因分析 1、功能克隆（functional cloning）：根据基因的功能 （通常是根据其蛋白质）产物来寻找、克隆与疾病相 关的基因 2、定位克隆（positional cloning）：从一种致病基因 的染色体定位出发逐步缩小范围，最后克隆该基因 二、制造生物活性蛋白
刘新文，重组DNA技术 三、基因诊断 >基因诊断：利用分子生物学的基本原理和技术，在 DNA或RNA水平上分析、鉴定与某些疾病有关基因 的改变（基因结构及其表达水平的异常) >遗传病的产前诊断、感染性疾病的快速诊断、某些 肿瘤的早期诊断以及器官移植供体的选择和法医学鉴 定等 四、基因治疗 >基因治疗（gene therapy)：将某种遗传物质转移 到患者细胞内，使其在体内发挥作用，从而达到治疗 疾病目的的方法
刘新文，重组DNA技术 三、基因诊断 基因诊断：利用分子生物学的基本原理和技术，在 DNA或RNA水平上分析、鉴定与某些疾病有关基因 的改变（基因结构及其表达水平的异常） 遗传病的产前诊断、感染性疾病的快速诊断、某些 肿瘤的早期诊断以及器官移植供体的选择和法医学鉴 定等 四、基因治疗 基因治疗（gene therapy）：将某种遗传物质转移 到患者细胞内，使其在体内发挥作用，从而达到治疗 疾病目的的方法
刘新文， 重组DNA技术 1、基因治疗的方法（分类) (1)基因矫正（gene correction):将致病基因的异 常碱基进行纠正，而保留正常部分 (2)基因置换（gene replacement):正常基因通过同 源重组，原位置换疾病基因 (3)基因增补(gene augmentation):正常基因非定 点整合，补偿疾病基因的功能或使原有功能加强 (4)基因失活（gene inactivation):采用各种方式抑 制或破坏某种基因的表达，如反义RNA和RNA干扰 (RNAi)技术、核酶与三链DNA、基因敲除（gene knock-out)等
刘新文，重组DNA技术 1、基因治疗的方法 （分类） （1）基因矫正（gene correction）：将致病基因的异 常碱基进行纠正，而保留正常部分 （2）基因置换（gene replacement）：正常基因通过同 源重组，原位置换疾病基因 （3）基因增补（gene augmentation）：正常基因非定 点整合，补偿疾病基因的功能或使原有功能加强 （4）基因失活（gene inactivation）：采用各种方式抑 制或破坏某种基因的表达，如反义RNA和RNA干扰 (RNAi)技术、核酶与三链DNA、基因敲除（gene knock-out）等
刘新文，重组DNA技术 概述 1973,Cohen等人首次使用DNA克隆技术成功 一、克隆与克隆化 ◆克隆即指同一副本或拷贝(copy) 的集合； 获取同一拷贝的过程叫克隆化。 【实例】肝组织→分离肝实质细胞→单一肝实 质细胞繁殖一细胞克隆 ◆自众多分子中分离获得相同分子，即为分子 可隆，在分子生物学和遗传学领域所谈的分子 可隆专指DNA可隆. 的融
刘新文，重组DNA技术 概述 1973，Cohen等人首次使用DNA克隆技术成功 一 、克隆与克隆化 克隆即指同一副本或拷贝（copy）的集合； 获取同一拷贝的过程叫克隆化。 【实例】肝组织分离肝实质细胞单一肝实 质细胞繁殖-细胞克隆 自众多分子中分离获得相同分子，即为分子 可隆，在分子生物学和遗传学领域所谈的分子 可隆专指DNA可隆
刘新文 重组DNA技术 质粒载体 质粒的特点： 1、环状DNA,2kb~数百kb。 2、某些质粒可以重组到染色体中复制，形 成附加体。 3、质粒的遗传信息可以赋予细胞某些性状 (抗药性等)，这些形状的有无常用于鉴定质 粒是否存在于活细胞中。 4、质粒复制分两型一一严谨型、松弛型
刘新文，重组DNA技术 一、质粒的特点： 1、环状DNA，2kb～数百kb。 2、某些质粒可以重组到染色体中复制，形 成附加体。 质粒载体 3、质粒的遗传信息可以赋予细胞某些性状 （抗药性等） ，这些形状的有无常用于鉴定质 粒是否存在于活细胞中。 4、质粒复制分两型——严谨型、松弛型