mRNA分高、纯化与分高 ◆通常用于构建CDNA的是真核细胞的mRNA ◆由于CDNA从mRNA合成而来,代表了基因 组的可转录部分,不含内含子序列,因此 可被用于在大肠杆菌中表达编码蛋白 ◆由于每类细胞和组织只表达一套特定的基 因,因此从特定组织中制备的mRNA通常 会富集某些特异序列。所以起始材料的选 择十分重要
mRNA分离、纯化与分离 通常用于构建cDNA的是真核细胞的mRNA 由于cDNA从mRNA合成而来,代表了基因 组的可转录部分,不含内含子序列,因此 可被用于在大肠杆菌中表达编码蛋白 由于每类细胞和组织只表达一套特定的基 因,因此从特定组织中制备的mRNA通常 会富集某些特异序列。所以起始材料的选 择十分重要
◆mRNA的提取 全长mRNA具有 Introduction of 个 polyA的3末 Sequence Tag 端,可以被用于 Full-Length InRNA mRNA的分离; 可以用寡聚纤维 CAP 5'UTR CDS 3'UTR polyA 素柱。选择性地 ATG TAAAAAAA 吸附mRNA Signature of3’-end 纯化 Oligo Sequence Tag Oligo TAADAAAAA Signature of 5-end
mRNA的提取 全长mRNA具有 一个polyA的3’末 端,可以被用于 mRNA的分离; 可以用寡聚纤维 素柱,选择性地 吸附mRNA 纯化