DNA的理化性质背景知识DNP在盐溶液中的溶解度会受盐浓度的影响DNP在低浓度盐溶液中,几乎不溶解,如在0.14mol/L氯化钠中溶解度最低,仅为在水中溶解度的1%;随着盐浓度的增加溶解度也增加,在1mol/L氯化钠中溶解度比纯水中高2倍;RNP在盐溶液中的溶解度受盐浓度的影响较小在0.14mol/L氯化钠中溶解度较大。因此,在提取时,常用此法分离这两种核蛋白
DNP在盐溶液中的溶解度会受盐浓度的影响。 DNP在低浓度盐溶液中,几乎不溶解,如在 0.14 mol/L氯 化钠中溶解度最低,仅为在水中溶解度的 1%; 随着盐浓度的增加溶解度也增加,在1 mol/L氯化钠中溶解 度比纯水中高 2倍; RNP在盐溶液中的溶解度受盐浓度的影响较小 在0.14mol/L氯化钠中溶解度较大。因此,在提取时,常用 此法分离这两种核蛋白。 背景知识 DNA的理化性质
核酸提取的一般流程背景知识I.破碎细胞或包膜一一内容物释放II.核酸分离、纯化III.沉淀或吸附核酸,并去除杂质IV.核酸溶解在适量缓冲液或水中
I. 破碎细胞或包膜——内容物释放 II. 核酸分离、纯化 III. 沉淀或吸附核酸,并去除杂质 IV. 核酸溶解在适量缓冲液或水中 背景知识 核酸提取的一般流程
DNA提取的几种方法背景知识浓盐法阴离子去污法苯酚抽提法
DNA提取的几种方法 浓盐法 阴离子去污法 苯酚抽提法 背景知识
DNA提取的几种方法背景知识浓盐法利用RNP和DNP在电解溶液中溶解度不同,将二者分离,常用的方法是用1mol/LNaCl抽提,得到的DNP粘液,然后与氯仿:异戊醇(24:1)一起摇荡使乳化,离心除去蛋白质,此时蛋白质凝胶停留在水相及氯仿相中间,而DNA位于上层水相中,用2倍体无水乙醇可将DNA钠盐沉淀出来
浓盐法 利用RNP和DNP在电解溶液中溶解度不同,将二者 分离,常用的方法是用 1 mol/L NaCl 抽提,得到的 DNP粘液,然后与氯仿:异戊醇(24:1)一起摇荡使乳 化,离心除去蛋白质,此时蛋白质凝胶停留在水相及氯 仿相中间,而DNA位于上层水相中,用2倍体无水乙醇 可将 DNA 钠盐沉淀出来。 背景知识 DNA提取的几种方法
DNA提取的几种方法背景知识阴离子去污法由于细胞中DNA与蛋白质之间常借静电引力或配位键结合,阴离子去污剂能够破坏这种价键,所以常用阴离子去污剂提取DNA用SDS或二甲苯酸钠等去污剂使蛋白质变性,可以直接从生物材料中提取DNA
阴离子去污法 由于细胞中DNA与蛋白质之间常借静电引力或配位键结合, 阴离子去污剂能够破坏这种价键,所以常用阴离子去污剂提 取DNA 用 SDS 或 二甲苯酸钠等去污剂使蛋白质变性,可以直接从 生物材料中提取DNA。 背景知识 DNA提取的几种方法