根据DNA变性和复性发展的一种实验 技术,就是核酸分子杂交( nucleic acid hybridization),指两条来源不同但具有 同源性的核酸单链在一定条件下,根据碱 基互补的原则缔结成双链分子的过程。 杂交体:1) DNA/DNA 2) DNA/RNA 3 RNARNA 杂交双方分别称为探针与待测核酸
根据DNA变性和复性发展的一种实验 技术,就是核酸分子杂交( nucleic acid hybridization),指两条来源不同但具有 同源性的核酸单链在一定条件下,根据碱 基互补的原则缔结成双链分子的过程。 杂交体: 1)DNA/DNA 2)DNA/RNA 3)RNA/RNA 杂交双方分别称为探针与待测核酸
四、探针( probe) 指带有可检测标记物的能与特定核酸序 列发生特异性互补的已知核酸片段 根据核酸性质分,探针种类: 1)基因组DNA探针 2)cDNA探针 3)单链DNA探针 4)RNA探针 5)寡核苷酸探针
四、探针( probe) 指带有可检测标记物的能与特定核酸序 列发生特异性互补的已知核酸片段 根据核酸性质分, 探针种类: 1)基因组DNA探针 2)cDNA探针 3)单链DNA探针 4) RNA探针 5)寡核苷酸探针
RNA探针特点 o单链探针:无自身杂交 稳定性高:RNA/RNA> RNA/DNA> DNA/DNA o游离探针由 RNase降解,背景低 防核酸酶水解
RNA探针特点 ¤单链探针:无自身杂交 ¤稳定性高:RNA/RNA>RNA/DNA>DNA/DNA ¤游离探针由RNase降解,背景低 ¤防核酸酶水解
寡核苷酸探针特点 *长度20-50nt *人工合成 *适合于点突变研究 杂交时间短 *灵敏度较低
寡核苷酸探针特点 *长度20-50 nt *人工合成 *适合于点突变研究 *杂交时间短 *灵敏度较低
五、探针的制备
五、探针的制备