、光谱分析法 (一)紫外可见分光光度法(200nm~760nm) 灵敏度高,可达103g/ml~10g/ml 1.特点准确度高,RSD(%)<2% 仪器价格低康操作简单,易普及,应用广 2.定量:朗伯比耳定律A=B%1cmC
二、光谱分析法 （一）紫外-可见分光光度法（200nm～760nm) 灵敏度高，可达10-7g/ml ～ 10-4g/ml 1. 特点 准确度高，RSD（%）< 2% 仪器价格低廉操作简单，易普及，应用广 2. 定量：朗伯-比耳定律 A = E 1%1cmCl
3.仪器校正和检定 波长校正用汞灯中较强谱线237.38,253.65,275.28,29673, 3131633415,36502404664258354607nm与 57696nm 或用仪器中氘灯的48602nm与65610nm进行校正。 吸收度的检定:用K2CrO(60mg)+0.005moLH2SO4液至 000m 波长(mm)235(最小257(最大)313(最小350(最大) % 1 cm 124.514048621066 杂散光检查:试剂浓度(g/m)测定波长透光率(%) Nal 1.00 220nm 0.8 NaNo5.00340nm<0.8
3. 仪器校正和检定 波长校正用汞灯中较强谱线237.38,253.65,275.28,296.73, 313.16,334.15,365.02,404.66,425.83,546.07nm与 576.96nm 或用仪器中氘灯的486.02nm与656.10nm进行校正。 吸收度的检定：用K2CrO7 (60mg)+0.005mol/LH2SO4液至 1000ml 波长(nm) 235(最小) 257(最大) 313(最小) 350(最大) E 1% 1cm 124.5 144.0 48.62 106.6 杂散光检查： 试剂 浓度(g/ml) 测定波长 透光率(%) NaI 1.00 220nm ＜ 0.8 NaNO2 5.00 340nm ＜ 0.8
4.对溶剂的要求 220~240nm241~250nm251~300nm300nm以 上 溶剂+吸收池A<0.40<0.20<0.10<0.05 5.测定方法 要求供试品溶液的A应在03~0.7 对照品比较法:Cx=(A4)G含量%=cxD100% 常用方法{吸收系数法:含量%=(B%1cm)/(%1cm)×100% 计算分光光度法:VtA的三点校正法 比色法
4. 对溶剂的要求: 220～240nm 241～250nm 251～300nm 300nm以 上 溶剂+吸收池A ＜0.40 ＜0.20 ＜0.10 ＜0.05 5. 测定方法 要求供试品溶液的A应在0.3 ～0.7 对照品比较法：Cx=(Ax/Ar )Cr ; 含量%=Cx×D/W×100 % 常用方法 吸收系数法： 含量%= (E 1% 1cm )x/(E 1% 1cm )r ×100 % 计算分光光度法：VitA的三点校正法 比色法
■硫喷妥钠的含量测定:取供试品0.2500g,用水稀释至50ml, 精密取1m用0.4%NaOH溶液定量稀释至100ml,作为供试品 溶液;另取硫喷妥对照品用0.4%ωNaOH溶液配制浓度为 50g/ml作为对照品溶液。照分光光度法,在304m波长处 分别测得供试品和对照品的吸收度为0.520和0.545,已知1mg 硫喷妥相当于191mg的硫喷妥钠,试计算硫喷妥钠的含量 对照品比较法 供 lcmC供 对 lcm℃对 供_C供 对 C对 供 对
◼ 硫喷妥钠的含量测定：取供试品0.2500g，用水稀释至500ml， 精密取1ml用0.4%NaOH溶液定量稀释至100ml，作为供试品 溶液；另取硫喷妥对照品用0.4%NaOH溶液配制浓度为 5.0µg/ml作为对照品溶液。照分光光度法，在304nm波长处 分别测得供试品和对照品的吸收度为0.520和0.545，已知1mg 硫喷妥相当于1.091mg的硫喷妥钠，试计算硫喷妥钠的含量 对 供 供 对 对 供 对 供 对 供 对 供 A A c c c c A A E c l E c l A A = = = 1% 1cm 1% 1cm 对照品比较法
(2)吸收系数法 lcmC C(g/lOom I cm c(g/ml) E11×1OO A nxⅤ 百分含量= E Icm l×100 x100%
（2）吸收系数法 100 (g/ml) (g/100ml) 1 % 1cm 1 % 1cm 1% 1cm = = = E l A c E l A c A E cl % m n V E l A s % c m = 百分含量