相差、暗室野和荧光显 微镜的基本使用方法 5/03/2019 细胞生物学实验 Cell Biology Experiment
5/03/2019 细胞生物学实验 Cell Biology Experiment 4 相差、暗室野和荧光显 微镜的基本使用方法
+实验目的 1、了解光学显微镜的基本成像原理 2、掌握相差显微镜的原理和基本使用方法 3、了解暗视野显微镜的成像原理和使用方 法 4、学习荧光显微镜的成像原理和基本操作 5/03/2019 细胞生物学实验 Cell Biology Experiment
5/03/2019 细胞生物学实验 Cell Biology Experiment 5 实验目的 1、了解光学显微镜的基本成像原理 2、掌握相差显微镜的原理和基本使用方法 3、了解暗视野显微镜的成像原理和使用方 法 4、学习荧光显微镜的成像原理和基本操作
背景知识 microtubules ar envelope Nucleus uclear pore centriole 显微镜的级别划分 vesicle smooth Mitochondrion Microtubule Kinesin Amino acid 1A 1nm 10nm 100nm ur 10um 0.1mm Atomic Molecular Sub-cellular Cellular 电子显微镜 超分辨率显微锦传统的光学显微镜 5/03/2019 细胞生物学实验 Cell Biology Experiment 6 www.3dchem.com;wikipediaorg/wiki/kinesin;cvcweb.icesutexas.edu;Fotinetal.,Nature2004;hrsbstaff.ednet.ns.ca;www.ebi.ac.uk
背景知识 5/03/2019 细胞生物学实验 Cell Biology Experiment 6 显微镜的级别划分 Atomic Molecular Sub-cellular Cellular www.3dchem.com; wikipedia.org/wiki/Kinesin; cvcweb.ices.utexas.edu; Fotin et al., Nature 2004; hrsbstaff.ednet.ns.ca; www.ebi.ac.uk 1Å 1nm 10nm 100nm 1µm 10µm 0.1mm 1Å 1nm 10nm 100nm 1µm 10µm 0.1mm 1Å 1nm 10nm 100nm 1m 10m 0.1mm Amino Acid Microtubule Mitochondrion Kinesin 电子显微镜 超分辨率显微镜 传统的光学显微镜
口相差显微镜 Phase Contrast Light Pathways 时问 Condense ↑叛帽 时问 初始光束 出射波 干涉光 n≥n(n.m:屈折率) 5/03/2019 细胞生物学实验 Cell Biology Experiment 77
5/03/2019 细胞生物学实验 Cell Biology Experiment 7 相差显微镜 7
」暗视野显微镜 dark field microscope 根据丁达尔效应原理设计的一种在 黑色背景条件下观察被检物体的显 Objective lens 微镜。 ◆聚光镜中央有挡光片,照明光线不 直接进入物镜,只允许被标本反射 Condenser 和衍射的光线进入物镜,因而视野 背景是黑的,物体边缘是亮的。 Dark-field stop ◆可观察4~200nm的微粒子,分辨率 比普通显微镜高50倍。 5/03/2019 细胞生物学实验 Cell Biology Experiment
5/03/2019 细胞生物学实验 Cell Biology Experiment 8 暗视野显微镜 dark field microscope 根据丁达尔效应原理设计的一种在 黑色背景条件下观察被检物体的显 微镜。 聚光镜中央有挡光片，照明光线不 直接进入物镜，只允许被标本反射 和衍射的光线进入物镜，因而视野 背景是黑的，物体边缘是亮的。 可观察 4~200nm的微粒子，分辨率 比普通显微镜高50倍