上气通大学 Shanghai Jiao Tong University 鸡胚的构造和病毒培养 Herpes simplex virus 单纯疱疹病毒 羊膜腔 Chorioallantoic membrane inoculation Poxvirus 痘病毒 Amniotic cavity Rous sarcoma virus 劳氏肉瘤病毒 Shell- Shell membrane Albumin Air sac Influenza virus 流感病毒 mniotic inoculation Mumps virus 腮腺炎病毒 olk sac inoculation Herpes simplex virus 单纯疱疹病毒 Allantoic cavity Allantoic inoculation 尿襄腔Yolk sac Influenza virus 流感病毒 腮腺炎病毒 卵黄囊 Chorioallantoic Mumps virus membrane Newcastle disease virus新城疫病毒 尿囊绒膜 Avian adenovirus 鸟类腺病毒 No.21
Shanghai Jiao Tong University No.21 鸡胚的构造和病毒培养 羊膜腔 尿囊腔 卵黄囊 尿囊绒膜 单纯疱疹病毒 痘病毒 劳氏肉瘤病毒 流感病毒 腮腺炎病毒 单纯疱疹病毒 流感病毒 腮腺炎病毒 新城疫病毒 鸟类腺病毒
上浒充通大￥ Shanghai Jiao Tong University Amnion inoculation Embryo inoculation Air sac Chorioallantoic membrane inoculation Amniotic cavity Chorioallantoic membrane a Shell Yolk sac inoculation Allantoic cavity Yolk sac Albumin (b) Figure 6.21 ()A technician inoculates fertilized chicken eggs with viruses in the first stage of preparing vaccines.This process requires the highest levels of sterile and aseptic precautions.(b)Cultivating animal viruses in a developing bird embryo.The shell is perforated using sterile techniques,and a virus preparation is injected into a site selected to grow the viruses.Targets include the allantoic cavity,a fluid-filled sac that functions in embryonic waste removal; a he amniotic cavity,a sac that cushions and protects the embryo itself;the chorioallantoic membrane,which functions in embryonic gas exchange;the yolk sac,a membrane that mobilizes yolk for the nourishment of the embryo;and the embryo itself
Shanghai Jiao Tong University No.22
细胞培养层 大多数动物病毒感染敏感细胞培养层能引 起其显微表现的改变，即致细胞病变效应 (cytopathic effect,,CPE),例如细胞聚 集成团、肿大、圆缩、脱落，细胞融合形 成多核细胞，细胞内出现包涵体 (inclusion body),乃至细胞裂解等。 若标本经过适当稀释进行接种并辅以 染色处理，病毒可在培养的细胞单层 上形成肉眼可见的局部病损区域，即 蚀斑 (plaque)或称空斑。 rmal and infected cell cultures.(a)Macroscopic view of a Petri dish containing a monolayer(single layer of attached cells) ques)(h)Microscopic und listurbed cell
Shanghai Jiao Tong University No.23 1、病毒的培养 若标本经过适当稀释进行接种并辅以 染色处理，病毒可在培养的细胞单层 上形成肉眼可见的局部病损区域，即 蚀斑（plaque）或称空斑。 大多数动物病毒感染敏感细胞培养层能引 起其显微表现的改变，即致细胞病变效应 （cytopathic effect,CPE），例如细胞聚 集成团、肿大、圆缩、脱落，细胞融合形 成多核细胞，细胞内出现包涵体 （inclusion body），乃至细胞裂解等。 细胞培养层
上游充通大￥ Shanghai Jiao Tong University 植物病毒的培养 植物病毒 敏感植物叶片 No.24
Shanghai Jiao Tong University No.24 植物病毒的培养 植物病毒 敏感植物叶片 产生坏死斑，或称 枯斑
上气通大学 Shanghai Jiao Tong University 2、 病毒纯化 病毒是有感染性的生物体 标准 纯化的病毒应保持感染性 病毒具有化学大分子的属性 纯化的病毒应具有理化性质均一性 主要化学组成为蛋白质 蛋白质提纯方法 方法 (盐析、等电点沉淀、有机溶剂沉淀、凝胶层析、离子交换等 差速离心 具有一定的大小、形状和密度 梯度离心 No.25 (超速离心)
Shanghai Jiao Tong University No.25 蛋白质提纯方法 （盐析、等电点沉淀、有机溶剂沉淀、凝胶层析、离子交换等 2、 病毒纯化 标准 纯化的病毒应保持感染性 病毒是有感染性的生物体 病毒具有化学大分子的属性 纯化的病毒应具有理化性质均一性 方法 主要化学组成为蛋白质 具有一定的大小、形状和密度 差速离心 梯度离心 （超速离心）