目 录 ·5 1.一般生产技术 132 2.发酵工程生产技术 133 二、药用真菌发酵工程技术的应用…… 135 1.灵芝液体深层发酵技术 135 2.云芝液体深层发酵技术 136 3。冬虫夏草菌液体深层发酵… 137 4.猴头菌的液体发酵技术… 138 第五章药用植物组织培养技术的应用… 145 第一节药用植物茎培养的技术… 145 一、离体茎培养的基本过程… 145 1.主要材料… 145 2.茎培养的具体过程 148 3.离体茎的培养结果… 148 二、影响茎培养的因素…… 149 1.植物生长激素 149 2.茎段的褐变… 149 3.植株的年龄及生理状态 149 4.芽的部位…… 149 5.茎尖的大小… 149 第二节药用植物茎尖培养的应用技术… 150 一、药用植物的快速繁殖… 150 1.快速繁殖体系的建立 151 2.影响快速繁殖的主要因素与解决方法 155 二、药用植物的脱毒培养… 156 1.植物组织培养脱毒技术的现状 157 2.茎尖培养脱毒的理论基础 158 3.茎尖培养育成脱毒苗的方法 159 4.通过茎尖培养提高植株脱毒率的有效措施 165 5.茎尖培养脱毒的注意事项 167 第三节药用植物茎尖培养的应用实例… 167 一、药用植物脱毒培养的应用实例… 167 1.地黄病毒病及脱毒培养… 167 2.甘薯病毒病及脱毒培养 169 二、药用植物快速繁殖的应用实例… 173 1。芦荟的快速繁殖… 173 2.枸杞的快速繁殖… 174 3.贝母的快速繁殖 175 第四节药用植物种质资源的超低温保存与人工种子… 178 一、药用植物种质资源的超低温保存……179
1. 一般生产技术 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 132 2. 发酵工程生产技术 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 133 二、药用真菌发酵工程技术的应用 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 135 1. 灵芝液体深层发酵技术 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 135 2. 云芝液体深层发酵技术 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 136 3. 冬虫夏草菌液体深层发酵 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 137 4. 猴头菌的液体发酵技术 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 138 第五章 药用植物组织培养技术的应用!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 145 第一节 药用植物茎培养的技术!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 145 一、离体茎培养的基本过程 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 145 1. 主要材料 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 145 2. 茎培养的具体过程 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 148 3. 离体茎的培养结果 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 148 二、影响茎培养的因素 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 149 1. 植物生长激素 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 149 2. 茎段的褐变 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 149 3. 植株的年龄及生理状态 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 149 4. 芽的部位 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 149 5. 茎尖的大小 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 149 第二节 药用植物茎尖培养的应用技术!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 150 一、药用植物的快速繁殖 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 150 1. 快速繁殖体系的建立 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 151 2. 影响快速繁殖的主要因素与解决方法 !!!!!!!!!!!!!!!! 155 二、药用植物的脱毒培养 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 156 1. 植物组织培养脱毒技术的现状 !!!!!!!!!!!!!!!!!!! 157 2. 茎尖培养脱毒的理论基础 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 158 3. 茎尖培养育成脱毒苗的方法 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 159 4. 通过茎尖培养提高植株脱毒率的有效措施 !!!!!!!!!!!!!! 165 5. 茎尖培养脱毒的注意事项 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 167 第三节 药用植物茎尖培养的应用实例!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 167 一、药用植物脱毒培养的应用实例 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 167 1. 地黄病毒病及脱毒培养 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 167 2. 甘薯病毒病及脱毒培养 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 169 二、药用植物快速繁殖的应用实例 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 173 1. 芦荟的快速繁殖 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 173 2. 枸杞的快速繁殖 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 174 3. 贝母的快速繁殖 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 175 第四节 药用植物种质资源的超低温保存与人工种子!!!!!!!!!!!!! 178 一、药用植物种质资源的超低温保存 !!!!!!!!!!!!!!!!!!! 179 目 录 ·5·
·6 中草药生物技术 1.种质资源保存概述 179 2.种质资源超低温保存的原理 179 3.种质资源超低温保存的程序和影响因素 ……180 4.药用植物种质资源超低温保存应用实例 183 二、植物体细胞胚胎发生与人工种子… 184 1。植物体细胞胚… 184 2.人工种子的概念、结构和原理… 185 3.人工种子制作的基本过程… 186 4.人工种子实用化的关键技术… 188 5.药用植物人工种子制作应用实例… 190 6.人工种子的意义与发展前景… 191 第六章药用植物育种技术及应用… 197 第一节药用植物的单倍体育种… 197 一、单倍体与单倍体育种… 197 二、单倍体在药用植物育种中的作用… 198 三、应用组织培养技术进行单倍体育种…… 199 1.应用花药(或花粉)培养技术培育单倍体 199 2.应用子房培养技术培育单倍体… 206 四、中草药单倍体育种的应用实例… 208 1.花药培养技术培育单倍体的应用实例 208 2.子房培养技术培育单倍体的应用实例 209 第二节药用植物的多倍体育种… 210 一、多倍体与多倍体育种… 210 二、多倍体在药用植物育种中的作用… 211 三、应用组织培养技术进行多倍体育种… 212 1.应用胚乳培养技术培育三倍体…212 2.应用组织培养技术培育多倍体… 215 四、药用植物的多倍体育种的应用实例…219 1.胚乳培养技术培育多倍体的应用实例 219 2.组织培养技术培育多倍体的应用实例 220 第三节药用植物的细胞突变体育种………… 222 一、突变与细胞突变体育种…223 二、利用细胞变异筛选突变体的优缺点…223 三、利用植物组织细胞培养技术进行突变体育种的途径…224 1。应用单细胞培养技术培育突变体… 224 2.应用体细胞无性系变异培育突变体… 231 四、中草药的突变体育种的应用实例…… 236 1.单细胞培养技术培育突变体的应用实例…………236 2.体细胞无性系变异产生突变体的应用实例 …236
1. 种质资源保存概述 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 179 2. 种质资源超低温保存的原理 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 179 3. 种质资源超低温保存的程序和影响因素 !!!!!!!!!!!!!!! 180 4. 药用植物种质资源超低温保存应用实例 !!!!!!!!!!!!!!! 183 二、植物体细胞胚胎发生与人工种子 !!!!!!!!!!!!!!!!!!! 184 1. 植物体细胞胚 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 184 2. 人工种子的概念、结构和原理 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 185 3. 人工种子制作的基本过程 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 186 4. 人工种子实用化的关键技术 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 188 5. 药用植物人工种子制作应用实例 !!!!!!!!!!!!!!!!!! 190 6. 人工种子的意义与发展前景 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 191 第六章 药用植物育种技术及应用!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 197 第一节 药用植物的单倍体育种!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 197 一、单倍体与单倍体育种 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 197 二、单倍体在药用植物育种中的作用 !!!!!!!!!!!!!!!!!!! 198 三、应用组织培养技术进行单倍体育种 !!!!!!!!!!!!!!!!!! 199 1. 应用花药(或花粉)培养技术培育单倍体 !!!!!!!!!!!!!!! 199 2. 应用子房培养技术培育单倍体 !!!!!!!!!!!!!!!!!!! 206 四、中草药单倍体育种的应用实例 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 208 1. 花药培养技术培育单倍体的应用实例 !!!!!!!!!!!!!!!! 208 2. 子房培养技术培育单倍体的应用实例 !!!!!!!!!!!!!!!! 209 第二节 药用植物的多倍体育种!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 210 一、多倍体与多倍体育种 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 210 二、多倍体在药用植物育种中的作用 !!!!!!!!!!!!!!!!!!! 211 三、应用组织培养技术进行多倍体育种 !!!!!!!!!!!!!!!!!! 212 1. 应用胚乳培养技术培育三倍体 !!!!!!!!!!!!!!!!!!! 212 2. 应用组织培养技术培育多倍体 !!!!!!!!!!!!!!!!!!! 215 四、药用植物的多倍体育种的应用实例 !!!!!!!!!!!!!!!!!! 219 1. 胚乳培养技术培育多倍体的应用实例 !!!!!!!!!!!!!!!! 219 2. 组织培养技术培育多倍体的应用实例 !!!!!!!!!!!!!!!! 220 第三节 药用植物的细胞突变体育种!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 222 一、突变与细胞突变体育种 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 223 二、利用细胞变异筛选突变体的优缺点 !!!!!!!!!!!!!!!!!! 223 三、利用植物组织细胞培养技术进行突变体育种的途径 !!!!!!!!!!! 224 1. 应用单细胞培养技术培育突变体 !!!!!!!!!!!!!!!!!! 224 2. 应用体细胞无性系变异培育突变体 !!!!!!!!!!!!!!!!! 231 四、中草药的突变体育种的应用实例 !!!!!!!!!!!!!!!!!!! 236 1. 单细胞培养技术培育突变体的应用实例 !!!!!!!!!!!!!!! 236 2. 体细胞无性系变异产生突变体的应用实例 !!!!!!!!!!!!!! 236 ·6· 中草药生物技术
目 录 ·7 第七章酶工程技术及应用… 241 第一节酶工程的基本技术… 241 一、酶 242 1.酶的发现历史及其化学本质 242 2.酶作为催化剂的特点… 242 二、酶工程简介… 244 1.酶的合成… 244 2.酶的分离纯化… 244 3.酶的固定化… 245 4.细胞的固定化…… 250 5.固定化酶反应器概述…… 250 6.固定化酶反应器的选择 256 7.固定化酶反应器操作 257 第二节酶工程技术在制药工业中的应用… 257 一、青霉素酰化酶在新型抗生素生产中的应用… 257 二、酶应用于生物大分子… 258 三、固定化酶在生物传感方面的应用… 259 第三节酶工程技术研究及应用进展……………… 260 一、紫衫醇及其药源问题… 260 二、紫杉醇生物合成途径及其相关酶克隆研究现状…261 三、从10-DAB开始酶法半合成紫杉醇的可行性与其优势… 263 四、与紫杉醇相关的酶催化研究现状…264 1.紫杉醇及其类似物的酶催化修饰 264 2.紫杉醇骨架前体紫杉萜的酶催化合成………265 3.紫杉醇全合成过程中外消旋同分异构体混合物的酶法拆分… 266 五、酶法半合成紫衫醇需要解决的主要问题与研究方向… 267 第八章药用植物基因工程技术… 270 第一节目的基因的克隆… 270 一、根据基因编码产物的功能克隆基因的方法… 270 二、根据已知核苷酸或蛋白序列克隆基因的方法… 271 1.同源克隆… 271 2.电子克隆… 272 三、利用各种遗传标记技术克隆基因的方法… 273 四、通过创造突变体克隆基因的方法… 274 1。转座子标签法… 274 2.T-DNA标签法… 275 五、根据基因的差异表达克隆基因的方法… 276 1.差减杂交… 276 2.mRNA差异显示…… 276
第七章 酶工程技术及应用!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 241 第一节 酶工程的基本技术!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 241 一、酶 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 242 1. 酶的发现历史及其化学本质 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 242 2. 酶作为催化剂的特点 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 242 二、酶工程简介 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 244 1. 酶的合成 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 244 2. 酶的分离纯化 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 244 3. 酶的固定化 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 245 4. 细胞的固定化 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 250 5. 固定化酶反应器概述 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 250 6. 固定化酶反应器的选择 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 256 7. 固定化酶反应器操作 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 257 第二节 酶工程技术在制药工业中的应用!!!!!!!!!!!!!!!!!! 257 一、青霉素酰化酶在新型抗生素生产中的应用 !!!!!!!!!!!!!!! 257 二、酶应用于生物大分子 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 258 三、固定化酶在生物传感方面的应用 !!!!!!!!!!!!!!!!!!! 259 第三节 酶工程技术研究及应用进展!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 260 一、紫杉醇及其药源问题 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 260 二、紫杉醇生物合成途径及其相关酶克隆研究现状 !!!!!!!!!!!!! 261 三、从 10-DAB 开始酶法半合成紫杉醇的可行性与其优势 !!!!!!!!!! 263 四、与紫杉醇相关的酶催化研究现状 !!!!!!!!!!!!!!!!!!! 264 1. 紫杉醇及其类似物的酶催化修饰 !!!!!!!!!!!!!!!!!! 264 2. 紫杉醇骨架前体紫杉萜的酶催化合成 !!!!!!!!!!!!!!!! 265 3. 紫杉醇全合成过程中外消旋同分异构体混合物的酶法拆分 !!!!!!! 266 五、酶法半合成紫杉醇需要解决的主要问题与研究方向 !!!!!!!!!!! 267 第八章 药用植物基因工程技术!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 270 第一节 目的基因的克隆!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 270 一、根据基因编码产物的功能克隆基因的方法 !!!!!!!!!!!!!!! 270 二、根据已知核苷酸或蛋白序列克隆基因的方法 !!!!!!!!!!!!!! 271 1. 同源克隆 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 271 2. 电子克隆 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 272 三、利用各种遗传标记技术克隆基因的方法 !!!!!!!!!!!!!!!! 273 四、通过创造突变体克隆基因的方法 !!!!!!!!!!!!!!!!!!! 274 1. 转座子标签法 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 274 2. T-DNA 标签法 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 275 五、根据基因的差异表达克隆基因的方法 !!!!!!!!!!!!!!!!! 276 1. 差减杂交 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 276 2. mRNA 差异显示 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 276 目 录 ·7·
·8 中草药生物技术 3.代表性差示分析 277 4.抑制性差减杂交 277 5.DNA微阵列… 277 第二节植物基因转化载体系统的构建…………………… 278 一、根癌农杆菌T质粒基因转化载体构建 278 1.Ti质粒的改造及卸甲载体构建… 278 2.中问载体的构建…… 279 3.中间载体上的启动子元件… 280 4.中间载体对植物的转化 281 二、发根农杆菌Ri质粒基因转化载体构建… 282 1.发根农杆菌的分类…282 2.R质粒的结构特征和发根农杆菌对植物的转化机制… 283 3Ri质粒载体的构建… 286 第三节目的基因的遗传转化系统…………… 286 一、载体型植物遗传转化系统… 286 1.转化受体系统的建立…… 286 2.根癌农杆菌T质粒介导的遗传转化法 287 3.发根农杆菌Ri质粒介导的遗传转化法… 289 二、DNA直接转化系统… 293 三、种质转化系统…… 295 四、各种转化系统的比较… 296 第四节转基因植物的检测… 297 一、报告基因的检测… 297 1.新霉素磷酸转移酶基因的检测 298 2.潮霉素磷酸转移酶基因的检测 298 3.庆大霉素抗性基因的检测… 298 4.氯霉素乙酰转移酶基因的检测 298 5.B-葡萄糖苷酸酶基因的检测… 298 6.荧光素酶基因的检测… 299 7.冠瘿碱合成酶基因的检测… 300 8.绿色荧光蛋白基因的检测… 300 二、外源基因整合水平上的鉴定… 300 1.PCR检测转化植株… 301 2.Southern杂交检测转化植株… 301 三、外源基因转录水平上的检测… 302 1.Northern杂交检测 302 2.反转录PCR检测… 303 四、外源基因翻译水平上的检测… 304 1.Western杂交检测… 304
3. 代表性差示分析 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 277 4. 抑制性差减杂交 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 277 5. DNA 微阵列 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 277 第二节 植物基因转化载体系统的构建!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 278 一、根癌农杆菌 Ti 质粒基因转化载体构建 !!!!!!!!!!!!!!!! 278 1. Ti 质粒的改造及卸甲载体构建 !!!!!!!!!!!!!!!!!!! 278 2. 中间载体的构建 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 279 3. 中间载体上的启动子元件 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 280 4. 中间载体对植物的转化 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 281 二、发根农杆菌 Ri 质粒基因转化载体构建 !!!!!!!!!!!!!!!! 282 1. 发根农杆菌的分类 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 282 2. Ri 质粒的结构特征和发根农杆菌对植物的转化机制 !!!!!!!!!! 283 3. Ri 质粒载体的构建 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 286 第三节 目的基因的遗传转化系统!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 286 一、载体型植物遗传转化系统 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 286 1. 转化受体系统的建立 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 286 2. 根癌农杆菌 Ti 质粒介导的遗传转化法 !!!!!!!!!!!!!!!! 287 3. 发根农杆菌 Ri 质粒介导的遗传转化法 !!!!!!!!!!!!!!!! 289 二、DNA 直接转化系统 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 293 三、种质转化系统 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 295 四、各种转化系统的比较 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 296 第四节 转基因植物的检测!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 297 一、报告基因的检测 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 297 1. 新霉素磷酸转移酶基因的检测 !!!!!!!!!!!!!!!!!!! 298 2. 潮霉素磷酸转移酶基因的检测 !!!!!!!!!!!!!!!!!!! 298 3. 庆大霉素抗性基因的检测 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 298 4. 氯霉素乙酰转移酶基因的检测 !!!!!!!!!!!!!!!!!!! 298 5. β-葡萄糖苷酸酶基因的检测 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 298 6. 荧光素酶基因的检测 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 299 7. 冠瘿碱合成酶基因的检测 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 300 8. 绿色荧光蛋白基因的检测 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 300 二、外源基因整合水平上的鉴定 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 300 1. PCR 检测转化植株 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 301 2. Southern 杂交检测转化植株!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 301 三、外源基因转录水平上的检测 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 302 1. Northern 杂交检测!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 302 2. 反转录 PCR 检测 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 303 四、外源基因翻译水平上的检测 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 304 1. Western 杂交检测 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 304 ·8· 中草药生物技术
目 录 ·9 2.免疫技术检测… 305 五、基因工程在中草药遗传改良中的应用前景和问题…… 306 第九章药用植物基因工程技术的应用…311 第一节药用植物抗性基因工程……… 311 一、药用植物抗虫基因工程… 311 1。苏云金芽孢杆菌杀虫晶体蛋白基因… 311 2.蛋白酶抑制剂基因 315 3.-淀粉酶抑制剂基因…316 4.植物凝集素基因 316 二、药用植物抗病及其他抗性基因工程…318 1.病毒外壳蛋白基因及其应用… 318 2.核糖体失活蛋白基因及其应用 319 3。几丁质酶基因及其应用… 320 4.B-1,3-葡聚糖酶基因及其应用 321 5.抗菌肽基因及其应用 321 6.病毒卫星RNA的利用…… 322 7.病毒复制酶基因及其应用 323 8.溶菌酶基因及其应用… 323 9.疏堇… 323 10.植物防卫素… 323 11.其他抗性基因… 324 第二节药用植物的代谢工程… 327 一、黄酮类化合物及其代谢工程… 327 1.黄酮类化合物的生物功能 328 2.黄酮类化合物的生物合成途径 328 3.黄酮类化合物合成的代谢工程 329 二、萜类物质及其代谢工程 331 1.青蒿素的代谢工程…… 332 2.紫杉醇的代谢工程… 334 3.其他萜类物质及其代谢工程…… 337 三、生物碱及其代谢工程…… 338 1.菇类吲哚生物碱及其代谢工程… 338 2.莨菪烷生物碱及其代谢工程… 341 3.其他生物碱及其代谢工程… 344 四、其他植物次生代谢物及其代谢工程… 344 第三节毛状根培养技术的应用… 345 一、毛状根培养在次生代谢产物生产中的应用… 345 1.利用毛状根培养生产次生代谢物的优点 …346 2.影响毛状根生长和次生代谢产物合成的因素 …347
2. 免疫技术检测 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 305 五、基因工程在中草药遗传改良中的应用前景和问题 !!!!!!!!!!!! 306 第九章 药用植物基因工程技术的应用!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 311 第一节 药用植物抗性基因工程!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 311 一、药用植物抗虫基因工程 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 311 1. 苏云金芽孢杆菌杀虫晶体蛋白基因 !!!!!!!!!!!!!!!!! 311 2. 蛋白酶抑制剂基因 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 315 3. α-淀粉酶抑制剂基因 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 316 4. 植物凝集素基因 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 316 二、药用植物抗病及其他抗性基因工程 !!!!!!!!!!!!!!!!!! 318 1. 病毒外壳蛋白基因及其应用 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 318 2. 核糖体失活蛋白基因及其应用 !!!!!!!!!!!!!!!!!!! 319 3. 几丁质酶基因及其应用 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 320 4. β-1,3-葡聚糖酶基因及其应用 !!!!!!!!!!!!!!!!!!! 321 5. 抗菌肽基因及其应用 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 321 6. 病毒卫星 RNA 的利用 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 322 7. 病毒复制酶基因及其应用 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 323 8. 溶菌酶基因及其应用 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 323 9. 硫堇 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 323 10. 植物防卫素 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 323 11. 其他抗性基因 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 324 第二节 药用植物的代谢工程!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 327 一、黄酮类化合物及其代谢工程 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 327 1. 黄酮类化合物的生物功能 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 328 2. 黄酮类化合物的生物合成途径 !!!!!!!!!!!!!!!!!!! 328 3. 黄酮类化合物合成的代谢工程 !!!!!!!!!!!!!!!!!!! 329 二、萜类物质及其代谢工程 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 331 1. 青蒿素的代谢工程 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 332 2. 紫杉醇的代谢工程 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 334 3. 其他萜类物质及其代谢工程 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 337 三、生物碱及其代谢工程 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 338 1. 萜类吲哚生物碱及其代谢工程 !!!!!!!!!!!!!!!!!!! 338 2. 莨菪烷生物碱及其代谢工程 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 341 3. 其他生物碱及其代谢工程 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 344 四、其他植物次生代谢物及其代谢工程 !!!!!!!!!!!!!!!!!! 344 第三节 毛状根培养技术的应用!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 345 一、毛状根培养在次生代谢产物生产中的应用 !!!!!!!!!!!!!!! 345 1. 利用毛状根培养生产次生代谢物的优点 !!!!!!!!!!!!!!! 346 2. 影响毛状根生长和次生代谢产物合成的因素 !!!!!!!!!!!!! 347 目 录 ·9·