骨髓瘤小鼠 脾 取腹水 单克隆抗体和多克隆抗体产生区别示意图 抗原 B细胞 骨髓瘤细胞 ● +PEG,融合 杂交瘤细胞 Abl 抗血清 HAT培养, Ab2 Ab3 稀释 Ab4 Ab3 Abl Ab2 Ab4 Abl 普通抗血清(多克隆抗体) Ab2 Ab3 单克隆抗体
Ab1 Ab3 Ab4 单克隆抗体 抗原 Ab1 Ab1 抗血清 Ab2 Ab3 Ab4 Ab2 Ab3 Ab4 普通抗血清(多克隆抗体) 脾B细胞 骨髓瘤小鼠 取腹水 骨髓瘤细胞 HAT培养, 稀释 单克隆抗体和多克隆抗体产生区别示意图 杂交瘤细胞 + PEG, 融合
多克隆抗体制备流程 (一)免疫原的制备 ●】 (二)免疫动物 ● (三)免疫血清的收集 (四)免疫血清的鉴定 (五)免疫血清的保存
多克隆抗体制备流程 • (一)免疫原的制备 • (二)免疫动物 • (三)免疫血清的收集 • (四)免疫血清的鉴定 • (五)免疫血清的保存
操作步骤 一、免疫原的制备 免疫原(immunogen)指能刺激机体免疫 系统产生特异性抗体或致敏淋巴细胞的抗 原最重要的性质是免疫原性 (immunogenicity 免疫原一天然抗原、人工合成抗原; 蛋白质、多糖、脂类、核酸抗原;
操作步骤 一、免疫原的制备 免疫原(immunogen)指能刺激机体免疫 系统产生特异性抗体或致敏淋巴细胞的抗 原最重要的性质是免疫原性 (immunogenicity) 免疫原—天然抗原、人工 合成抗原; 蛋白质、多糖、脂类、核酸抗原;
(一)细胞性抗原制备: 绵羊红细胞(SRBC)-溶血素; 细菌-抗菌抗体(动物免疫血清) (二)可溶性抗原制备: 指蛋白质、多糖和脂类等
(一)细胞性抗原制备: 绵羊红细胞(SRBC)- 溶血素; 细菌- 抗菌抗体(动物免疫血清) (二)可溶性抗原制备: 指蛋白质、多糖和脂类等
1)细胞的破碎(物理法、化学法) ·反复冻融法 ·超声破碎法 ·自溶法 。 酶处里法 ·表面活性剂处理法
1)细胞的破碎(物理法、化学法) • 反复冻融法 • 超声破碎法 • 自溶法 • 酶处里法 • 表面活性剂处理法