★湿热法(moist heat sterilization) : 特点:温度低、时间短、灭菌效果高 原因: 1) 菌体内含水量越高,则凝固温度越低; 2) 蒸汽冷凝会放出潜热; 3) 饱和水蒸汽穿透力强; 4) 湿热易破坏细胞内蛋白质大分子的稳定 性,主要破坏氢键结构
★湿热法(moist heat sterilization) : 特点:温度低、时间短、灭菌效果高 原因: 1) 菌体内含水量越高,则凝固温度越低; 2) 蒸汽冷凝会放出潜热; 3) 饱和水蒸汽穿透力强; 4) 湿热易破坏细胞内蛋白质大分子的稳定 性,主要破坏氢键结构
湿热比干热灭菌更好: 更易于传递热量; 更易破坏保持蛋白质稳定性的氢键等结构; 湿热对一般营养体和孢子的杀灭条件: 多数细菌和真菌的营养细胞:在60℃左右处理5-10分钟; 酵母菌和真菌的孢子:用80℃以上温度处理; 细菌的芽孢:121℃处理15分钟以上;
湿热比干热灭菌更好: 更易于传递热量; 更易破坏保持蛋白质稳定性的氢键等结构; 湿热对一般营养体和孢子的杀灭条件: 多数细菌和真菌的营养细胞:在60℃左右处理5-10分钟; 酵母菌和真菌的孢子:用80℃以上温度处理; 细菌的芽孢:121℃处理15分钟以上;
高压蒸汽灭菌法 利用水的沸点随水蒸气压力的增加而上升,以达到100 ℃以上高温灭菌的方法。 方法:121℃(1kg/cm2或15磅/英寸2)维持15- 20min。 112℃(0.5kg/cm2或8磅/英寸2)20-30min。 115℃(0.75kg/cm2或11磅/英寸2)20-30min。 应根据灭菌物品的性质或成分选择灭菌温度 例如:生理盐水、营养琼脂等培养基用121 ℃。 含葡萄糖、乳糖、氨基酸等培养基用112 ℃。 适用:耐高温物品,玻璃仪器、含水或不含水的物品
高压蒸汽灭菌法 利用水的沸点随水蒸气压力的增加而上升,以达到100 ℃以上高温灭菌的方法。 方法:121℃(1kg/cm2或15磅/英寸2)维持15- 20min。 112℃(0.5kg/cm2或8磅/英寸2)20-30min。 115℃(0.75kg/cm2或11磅/英寸2)20-30min。 应根据灭菌物品的性质或成分选择灭菌温度 例如:生理盐水、营养琼脂等培养基用121 ℃。 含葡萄糖、乳糖、氨基酸等培养基用112 ℃。 适用:耐高温物品,玻璃仪器、含水或不含水的物品
高压蒸汽灭菌锅 •注意事项: •排净冷空气; •灭菌终了,缓慢降压; •灭菌结束,趁热取出物品
高压蒸汽灭菌锅 •注意事项: •排净冷空气; •灭菌终了,缓慢降压; •灭菌结束,趁热取出物品
高温对培养基的影响及其防止措施 高温对培养基的不利影响: ▲会产生混浊或形成不溶性沉淀 ▲营养成分被破坏( PO4 -3存在,葡萄糖生成酮糖, 菌不利用); ▲色泽加深(褐变如产生氨基糖等); ▲改变培养基的pH值(通常下降0.2) ; ▲形成有害物质,抑制微生物生长; 消除有害影响的措施 采用特殊的加热灭菌法 过滤除菌法 加入螯合剂
高温对培养基的影响及其防止措施 高温对培养基的不利影响: ▲会产生混浊或形成不溶性沉淀 ▲营养成分被破坏( PO4 -3存在,葡萄糖生成酮糖, 菌不利用); ▲色泽加深(褐变如产生氨基糖等); ▲改变培养基的pH值(通常下降0.2) ; ▲形成有害物质,抑制微生物生长; 消除有害影响的措施 采用特殊的加热灭菌法 过滤除菌法 加入螯合剂