布鲁氏菌胞内寄生的初步认识Agaisse等的研究发现，诸如李氏杆菌、布鲁氏菌、结核分枝杆菌等胞内寄生菌，它们能够隐藏于宿主巨噬细胞可能存在两种机制：①通过分泌、释放多种因子，阻断溶酶体与含有病原菌的吞筐体融合，干扰抗原递呈，抵御不同宿主免疫系统的杀伤和清除；②需要宿主细胞本身的成份一特异的宿主因子（hostfactor）的协同方可顺利实现，若祛除或破坏宿主因子将对胞内寄生菌的入侵以及在胞内生存、生长与繁殖产生影响。2008届石河子大学博士研究生论文答辩
Agaisse等的研究发现，诸如李氏杆菌、布鲁氏菌、结核分枝 杆菌等胞内寄生菌，它们能够隐藏于宿主巨噬细胞可能存在 两种机制： ①通过分泌、释放多种因子，阻断溶酶体与含有病原菌的吞 噬体融合，干扰抗原递呈，抵御不同宿主免疫系统的杀伤和 清除； ②需要宿主细胞本身的成份—特异的宿主因子（host factor） 的协同方可顺利实现，若祛除或破坏宿主因子将对胞内寄生 菌的入侵以及在胞内生存、生长与繁殖产生影响。 布鲁氏菌胞内寄生的初步认识 2008届石河子大学博士研究生论文答辩
需要解决的问题布鲁氏菌部分表面蛋白在布鲁氏菌侵染巨噬细胞过程中的分子致病机制是什么？2008届石河子大学博士研究生论文答辩
布鲁氏菌部分表面蛋白在布鲁氏菌侵染 巨噬细胞过程中的分子致病机制是什么？ 需要解决的问题 2008届石河子大学博士研究生论文答辩
资助项目国际科技合作重点项目资助，新疆重要人畜共患病分子诊断及致病机理的研究/批准号2006DFA33740；973前期专项，羊种布鲁氏菌M5-90活苗致弱改造和鉴别诊断方法的研究/批准号2007CB116309;国家自然科学基金项目，新疆绵羊种布鲁氏杆菌(B.Ovis)主要外膜蛋白在侵染巨噬细胞过程的作用/批准号30460102。2008届石河子大学博士研究生论文答辩
• 国际科技合作重点项目资助，新疆重要人 畜共患病分子诊断及致病机理的研究/批 准号2006DFA33740； • 973前期专项，羊种布鲁氏菌M5-90活苗 致弱改造和鉴别诊断方法的研究/批准号 2007CB116309； • 国家自然科学基金项目，新疆绵羊种布鲁 氏杆菌(B.ovis)主要外膜蛋白在侵染巨噬 细胞过程的作用/批准号30460102。 资助项目 2008届石河子大学博士研究生论文答辩
实验研究的目的和意义①布鲁氏菌侵入巨噬细胞的过程是病原和宿主细胞在不同时问阶段，多种分子相互作用的过程，通过绘制布鲁氏菌表面蛋白和巨噬细胞结合蛋白的互作网，从而揭示布鲁氏菌侵入巨噬细胞的分子作用机制；②研制新型药物分子，使该分子能够与巨噬细胞的宿主因子结合，从而阻遇布鲁氏菌侵入机体所需的宿主因子2008届石河子大学博士研究生论文答辩
①布鲁氏菌侵入巨噬细胞的过程是病原和宿主细胞在不同时间阶 段，多种分子相互作用的过程，通过绘制布鲁氏菌表面蛋白和巨 噬细胞结合蛋白的互作网，从而揭示布鲁氏菌侵入巨噬细胞的分 子作用机制； ②研制新型药物分子，使该分子能够与巨噬细胞的宿主因子结合， 从而阻遏布鲁氏菌侵入机体所需的宿主因子； 实验研究的目的和意义 2008届石河子大学博士研究生论文答辩
技术路线布鲁氏菌目标基因的克布鲁氏菌侵染巨噬细胞隆与序列分析模型的建立巨噬细胞cDNA文库的酵母双杂交诱饵系统pGBKT7-Bait的构建构建与鉴定分析YTHS筛选与布鲁氏菌表面蛋白互作的巨噬细胞捕获蛋白免疫共沉淀确定与布鲁氏菌表面蛋白互作的巨噬细胞靶分子2008届石河子大学博士研究生论文答辩
酵母双杂交诱饵系统 pGBKT7-Bait的构建 B.ovis 019株侵染绵羊 巨噬细胞模型的建立 绵羊巨噬细胞cDNA文库 的构建与鉴定分析 YTHS筛选与布鲁氏菌表面蛋白 互作的巨噬细胞捕获蛋白 免疫共沉淀确定与布鲁氏菌表 面蛋白互作的巨噬细胞靶分子 B.ovis 019株目标基因 的克隆与序列分析 布鲁氏菌目标基因的克 隆与序列分析 酵母双杂交诱饵系统 pGBKT7-Bait的构建 布鲁氏菌侵染巨噬细胞 模型的建立 巨噬细胞cDNA文库的 构建与鉴定分析 YTHS筛选与布鲁氏菌表面蛋 白互作的巨噬细胞捕获蛋白 免疫共沉淀确定与布鲁氏菌表 面蛋白互作的巨噬细胞靶分子 技术路线 2008届石河子大学博士研究生论文答辩