离@机操作 平衡、定温、定速、定时
离心机操作 ⚫ 平衡、定温、定速、定时
(三)常用离心方法 差速离心法 沉降速度法 密度梯度离心 沉降平衡法 等密度梯度离心
（三）常用离心方法 差速离心法 沉降速度法 密度梯度离心 沉降平衡法 等密度梯度离心
1,差速离心（differential centrifugation) 采用不同的离心速度和离心时间，使沉降速 度不同的颗粒分批分离的方法。 特点：用于分离大小和密度差异较大的颗粒。 优点：操作简单。 缺点：1)分离效果较差，不能一次得到纯颗粒： 2)壁效应严重。 3)沉降的颗粒受到挤压
1．差速离心 （differential centrifugation） 采用不同的离心速度和离心时间，使沉降速 度不同的颗粒分批分离的方法。 特点：用于分离大小和密度差异较大的颗粒。 优点：操作简单 。 缺点：1）分离效果较差， 不能一次得到纯颗粒。 2）壁效应严重。 3）沉降的颗粒受到挤压
(a) (b) (c) (d) (e) 溶剂 小颗粒 中颗粒 A 大颗粒 高心时间 差速离心分离示意图 (a)离心前的悬浮液 (b)~(e)离心不同时间后颗粒的沉降情况
差速离心分离示意图 （a）离心前的悬浮液 （b）～（e）离心不同时间后颗粒的沉降情况
LOW-SPEED SUPERNATANT SUBJECTED TO CENTRIFUGATION→ MEDIUM-SPEED CENTRIFUGATION- pellet contains pellet contains mitochondria cell ◆whole cells -lysosomes homogenate nuclei peroxisomes cytoskeletons SUPERNATANT SUBJECTED TO HIGH-SPEED CENTRIFUGATION pellet contains ribosomes viruses pellet contains SUPERNATANT SUBJECTED TO VERY- large microsomes HIGH-SPEED CENTRIFUGATION small vesicles macromolecules-