(三)半不连续合成semidiscontinuous replication 在DNA复制过程中,一条链是连续合成的,而另 一条链是不连续合成。 体内仅含催化5’→3’合成的DNA酶。 60年代冈琦片段的发现解决了这个问题: 合成5’-→3”前导链(leading strand)是连续 的,方向与复制叉一致。 合成3’→5’随从链时,方向与叉相反,合成 不连续,各片段连成一条链。(图11-5)
(三)半不连续合成semidiscontinuous replication 在DNA复制过程中,一条链是连续合成的,而另 一条链是不连续合成。 体内仅含催化5’3’合成的DNA酶。 60年代冈琦片段的发现解决了这个问题: 合成5’3’前导链(leading strand)是连续 的,方向与复制叉一致。 合成3’ 5’随从链时,方向与叉相反,合成 不连续,各片段连成一条链。(图11-5)
二、复制过程和参与酶及因子 (一)复制的起始(分两步) 1、螺旋的松弛与解链 (1)拓扑异构酶-能改变DNA空间构型的酶 作用:DNA复制时松弛超螺旋,以利复制叉的 行进及DNA合成,合成后再引向超螺旋。 功能:不清楚,可催化体外拓扑异构化反应, 分两型
二、复制过程和参与酶及因子 (一)复制的起始(分两步) 1、螺旋的松弛与解链 (1)拓扑异构酶-能改变DNA空间构型的酶 作用: DNA复制时松弛超螺旋,以利复制叉的 行进及DNA合成,合成后再引向超螺旋。 功能:不清楚,可催化体外拓扑异构化反应, 分两型
拓扑异构酶! (topoisomerase-l) 作用:(图11-6加) 松弛超螺旋,不需ATP, 机制:切开环状一条链 打结与解结 环状双链DNA的合成 环连与解环连 原核:对负超螺旋>正 真核:对正、负均有作用。 拓扑异构酶!1-旋转酶 (gyrase) 作用: 松弛超螺旋 松+ATP超(·) 切开环状两条链
拓扑异构酶I (topoisomerase- I ) 作用:(图11-6加) 松弛超螺旋,不需ATP, 机制:切开环状一条链 打结与解结 环状双链DNA的合成 环连与解环连 原核:对负超螺旋正 真核:对正、负均有作用。 拓扑异构酶I I -旋转酶(gyrase) 作用: 松弛超螺旋 松 + ATP 超 ( - ) 切开环状两条链
打结与解结 环连与解环连 (图11-6) (2)解链酶 (helicase) - 复制蛋白rep 作用:ATP供能时,解开DNA双链。 原核:编码解链酶的基因是dnaB,DnaB表示蛋白 产 物。前导链结合rep蛋白,阝 随从链结合解链酶I 亚 (图11-7》 (3)、 单链结合蛋白-single strand binding protein-SSB 作用: SSB与解开DNA单链结合,保护稳定 DNA。 与新复制DNA单链结合,以防降解
打结与解结 环连与解环连 (图11-6) (2)解链酶 (helicase)-复制蛋白rep 作用:ATP供能时,解开DNA双链。 原核:编码解链酶的基因是dnaB,DnaB表示蛋白 产 物。前导链结合rep蛋白,随从链 结合解链酶II Ⅲ (图11-7)。 (3)单链结合蛋白-single strand binding protein-SSB 作用: SSB与解开DNA单链结合,保护稳定 DNA。 与新复制DNA单链结合,以防降解
2、引发(需引发酶及引发前体参与) (1)引物酶(primase) 作用:以DNA为模板,自5’→3?合成RNA小片 段, 3’末端为-OH,长短:十几到几十个核苷酸。 原核:dnaG基因编码DnaG蛋白即引物酶。 (2)引发前体(preprimosome.) 由多种蛋白因子组成复合物。 作用:合成RNA引物,沿随从链复制叉的行进方 向移动,在不同部位,合成RNA引物。 总结:合成RNA引物,在引物3’-OH末段进行 DNA片 段合成。(表11-1) /一X A7T I
2、引发 (需引发酶及引发前体参与) (1)引物酶(primase) 作用:以DNA为模板,自5’3’合成RNA小片 段, 3’末端为-OH,长短:十几到几十个核苷酸。 原核:dnaG基因编码DnaG蛋白即引物酶。 (2)引发前体(preprimosome) 由多种蛋白因子组成复合物。 作用:合成RNA引物,沿随从链复制叉的行进方 向移动,在不同部位,合成RNA引物。 总结:合成RNA引物,在引物3’-OH末段进行 DNA片 段合成。(表11-1) (二) DNA链的延长