第七章细胞融合与核移植
第七章 细胞融合与核移植
第一节细胞融合 细胞融合又称体细胞杂交 人细胞 鼠细胞 或超性杂交。 膜蛋百 膜蛋白 细胞融合 细胞融合一一在自发或人工诱 异核体 导下，两个不同基因型的细胞或原 生质体融合形成一个杂种细胞的现 象。包括： 荧光。标记 荧光·标记 的鼠膜蛋白。 。的人膜蛋白 抗体A 抗体 1.精子和卵子的融合 时问=0分钟 37℃培养 2.正常情况下不能进行有性杂交的 异种细胞，融合成杂种细胞 (hybrid cell)。 时间=40分钟
第一节 细胞融合 ⚫ 细胞融合又称体细胞杂交 或超性杂交。 ⚫ 细胞融合－－在自发或人工诱 导下，两个不同基因型的细胞或原 生质体融合形成一个杂种细胞的现 象。包括： 1.精子和卵子的融合 2.正常情况下不能进行有性杂交的 异种细胞，融合成杂种细胞 （hybrid cell）
1957年发现仙 台病毒在体内和 体外均引起欧利 希氏腹水癌细胞 的融合。1960年 异种哺乳类动物 仙台病毒图 细胞融合成功 a.套膜上的钉芒具有唾液酸苍酶和血球凝集活动 b.自细胞得来的病毒套膜；c.糖蛋白；d.染色体 细胞融合是六十年代发展起来的一门技术，属 于细胞工程学的一个分支，为体细胞遗传学的 发展开辟了道路。应用细胞融合技术，可以跨 越杂交的障碍，结合不同种的优良性状
⚫ 细胞融合是六十年代发展起来的一门技术，属 于细胞工程学的一个分支，为体细胞遗传学的 发展开辟了道路。应用细胞融合技术，可以跨 越杂交的障碍，结合不同种的优良性状。 •1957年发现仙 台病毒在体内和 体外均引起欧利 希氏腹水癌细胞 的融合。1960年 异种哺乳类动物 细胞融合成功
细胞核 病毒颗粒 一、融合方法 细胞核 1 灭活的病毒颗粒黏附于细胞表面 促使细胞融合的制剂称为融合剂 细胞融合剂主要分为病毒与化学 物两大类： 〔2) 细胞膜被病毒颗粒穿通 ● 病毒： 仙台病毒、灭活的疱疹病毒、腮腺 Xo 炎病毒以及新城鸡瘟病毒等，其中仙台 (3) 细胞源连接 病毒最早用于诱导细胞融合，成为早期 细胞融合技术广泛采用的标准融合剂； (4) 细胞核融合，形成杂种细胞
一、融合方法 ⚫ 促使细胞融合的制剂称为融合剂。 细胞融合剂主要分为病毒与化学 物两大类： ⚫ 病毒： 仙台病毒、灭活的疱疹病毒、腮腺 炎病毒以及新城鸡瘟病毒等，其中仙台 病毒最早用于诱导细胞融合，成为早期 细胞融合技术广泛采用的标准融合剂；
化学物： 硝酸钠、聚乙二醇(PEG)、聚醋酸乙烯脂(PVA)、聚乙烯吡 咯酮(PVP)、硫酸多缩葡萄糖、溶血卵磷脂，甘油、油酸盐、 UE. 膜动剂（AZC),磷酸温， 脂质以及三价阳离子载体等。其吊以 PEG应用最广，效果最好。 电融合： 利用电场使细胞排列成串，并紧密接触；再使用电脉冲使细胞接 触部分发生细胞膜融合。 激光融合： 利用激光微束破坏相邻细胞的接触区，从而导致细胞膜的融合。 (诱导鱼类细胞融合，张闻迪)
⚫ 化学物： 硝酸钠、聚乙二醇（PEG）、聚醋酸乙烯脂（PVA）、聚乙烯吡 咯酮（PVP）、硫酸多缩葡萄糖、溶血卵磷脂、甘油、油酸盐、 膜动剂（AZC），磷酸盐，脂质以及二价阳离子载体等。其中以 PEG应用最广，效果最好。 ⚫ 电融合： 利用电场使细胞排列成串，并紧密接触；再使用电脉冲使细胞接 触部分发生细胞膜融合。 ⚫ 激光融合： 利用激光微束破坏相邻细胞的接触区，从而导致细胞膜的融合。 （诱导鱼类细胞融合，张闻迪）