一 教学要求 • 学习免疫电泳技术操作 • 掌握免疫电泳实验结果的分析方法 实验四 免疫电泳
一 教学要求 • 学习免疫电泳技术操作 • 掌握免疫电泳实验结果的分析方法 实验四 免疫电泳
免疫电泳为区带电泳与双向免疫扩散的结合。先利用 区带电泳技术将不同电荷和分子量的蛋白抗原在琼脂内 分离，然后在与电泳方向平行的方向上开槽，加入抗血 清。37℃下使两者扩散，各区带蛋白在相应的位置与抗 体反应形成弧形沉淀线。免疫电泳原理图解见图1。 二 实验原理
免疫电泳为区带电泳与双向免疫扩散的结合。先利用 区带电泳技术将不同电荷和分子量的蛋白抗原在琼脂内 分离，然后在与电泳方向平行的方向上开槽，加入抗血 清。37℃下使两者扩散，各区带蛋白在相应的位置与抗 体反应形成弧形沉淀线。免疫电泳原理图解见图1。 二 实验原理
图1 免疫电泳原理图解
图1 免疫电泳原理图解
三 材料与器材（略）
三 材料与器材（略）
（1）吸取4 mL琼脂溶液，均匀涂布到载玻片上，注意 要马上用吸管尖把琼脂表面整平，若有气泡立刻除去。 （2）取打孔器在图示的位置打孔（见图2），此二孔位 置要对称。 （3）用微量加样器加入10 uL的羊抗人IgG和羊抗人IgM 抗体，不要溢出。 （4）把载玻片放到电泳槽中，倒入巴比妥缓冲液，琼 脂板两端用滤纸与缓冲液搭桥，接通电源，电压10- 12v/cm电泳1-2h。 （5）样品中有蓝色染料，当蓝色接近另一端时，终止 电泳，小心取出载玻片。 四 操作步骤
（1）吸取4 mL琼脂溶液，均匀涂布到载玻片上，注意 要马上用吸管尖把琼脂表面整平，若有气泡立刻除去。 （2）取打孔器在图示的位置打孔（见图2），此二孔位 置要对称。 （3）用微量加样器加入10 uL的羊抗人IgG和羊抗人IgM 抗体，不要溢出。 （4）把载玻片放到电泳槽中，倒入巴比妥缓冲液，琼 脂板两端用滤纸与缓冲液搭桥，接通电源，电压10- 12v/cm电泳1-2h。 （5）样品中有蓝色染料，当蓝色接近另一端时，终止 电泳，小心取出载玻片。 四 操作步骤