《农药生物测定》实验指导（植物保护专业适用）二0一八年六月
《农药生物测定》 实验指导 （植物保护专业适用） 二 O 一八年六月
目录实验一杀虫剂综合毒力测定实验二杀虫剂触杀毒力测定T6实验二杀虫剂胃毒毒力测定.8实验三杀虫剂内吸毒力测定.10实验四杀虫剂熏蒸毒力测定12实验五杀菌剂孢子萌发测定法.14实验六杀菌剂生长速率测定法16实验七扩散法测定杀菌剂生物活性实验八杀菌剂生物活性测定——一圆叶片法.19.20实验九除草剂生物测定一黄瓜幼苗形态法22实验十草剂生物测定一番茄水培法.24实验十一除草剂温室盆栽实验.26实验十二杀虫剂间药效试验..28实验十三杀菌剂田间药效试验.30实验十四除草剂田间药效试验.32附表生物统计机率值换算表
目 录 实验一 杀虫剂综合毒力测定 . 1 实验二 杀虫剂触杀毒力测定 . 3 实验二 杀虫剂胃毒毒力测定 . 6 实验三 杀虫剂内吸毒力测定 . 8 实验四 杀虫剂熏蒸毒力测定 .10 实验五 杀菌剂孢子萌发测定法.12 实验六 杀菌剂生长速率测定法.14 实验七 扩散法测定杀菌剂生物活性.16 实验八 杀菌剂生物活性测定——圆叶片法 .19 实验九 除草剂生物测定—黄瓜幼苗形态法.20 实验十 草剂生物测定—番茄水培法.22 实验十一 除草剂温室盆栽实验.24 实验十二 杀虫剂田间药效试验.26 实验十三 杀菌剂田间药效试验.28 实验十四 除草剂田间药效试验.30 附表 生物统计机率值换算表 .32
内蒙古农业大学自编教材《农药生物测定实验指导实验一杀虫剂综合毒力测定一，实验目的：1、通过本试验学习掌握杀虫剂室内毒力初筛试验的操作技术。2、观察昆虫中毒征象特征一一兴奋、击倒、抽搐、麻痹、昏迷、死亡等。3、明确标准目标昆虫代表性的实用意义。二、实验原理：为了初步确定某些化学物质是否对某些害虫具有毒杀能力，应首先进行一次淘汰试验，或叫初筛试验，又称初步综合杀虫毒力试验。这种试验不涉及毒杀方式和毒杀能力的大小，因此，不严格限制用药量和均匀度，一般采用较高的浓度，尽量发挥综合毒效（包括胃毒、触杀、薰蒸等作用）。一般农药初筛毒力测定方法，根据试虫对象不同，多采用浸渍法、喷雾法、喷粉法、饲料混药法等。每处理需试虫15-30头，可以不设重复，每次试验均要设空白对照，施药时要注意各处理用药等量均匀一致，设置温度一般在20-28℃，相对湿度60-80%，通气良好。一般液剂在0.1-1%，粉剂1-10%。三，主要仪器及试材：试虫：小菜蛾（3龄）。供试药剂：药剂A、药剂B。试验器材：养虫室、喷雾塔、量筒、镊子、吸管、烧杯、培养皿、毛笔等。四.实验方法与步骤1、药剂配制：将A、B药剂配成0.1%的溶液备用。2、试虫移取：取小菜蛾3龄幼虫集中混匀后，用毛笔刷入培养皿，每处理10头，重复一次。3、喷布质量检定用9cm的白色园纸片来检查喷雾雾滴的大小和喷布是否均匀一致，如不符合要求，可调节喷头及位置，使喷布质量达到基本要求。4、处理方法：采用喷雾法，选用potter喷雾塔，喷布药液前，用清水及欲喷洒的药液大量喷布。换药前需将受药盘及雾化室底部用布充分擦净，然后大量喷布试验的药液。在接有小菜蛾的培养血中加入一定新鲜菜叶后，用移液管吸取3ml药液进行喷布，约10秒后，待药液全部沉降，取出培养皿，做好标记，空白对照只喷洒清水。待药剂干后，将试虫连同饲料置于恢复室内培养24小时后检查结果。五，实验注意事项：1
内蒙古农业大学自编教材《农药生物测定实验指导》 1 实验一 杀虫剂综合毒力测定 一. 实验目的： 1、通过本试验学习掌握杀虫剂室内毒力初筛试验的操作技术。 2、观察昆虫中毒征象特征——兴奋、击倒、抽搐、麻痹、昏迷、死亡等。 3、明确标准目标昆虫代表性的实用意义。 二. 实验原理： 为了初步确定某些化学物质是否对某些害虫具有毒杀能力，应首先进行一次淘汰试验， 或叫初筛试验，又称初步综合杀虫毒力试验。这种试验不涉及毒杀方式和毒杀能力的大小， 因此，不严格限制用药量和均匀度，一般采用较高的浓度，尽量发挥综合毒效（包括胃毒、 触杀、薰蒸等作用）。 一般农药初筛毒力测定方法，根据试虫对象不同，多采用浸渍法、喷雾法、喷粉法、饲 料混药法等。每处理需试虫 15-30 头，可以不设重复，每次试验均要设空白对照，施药时要 注意各处理用药等量均匀一致，设置温度一般在 20-28℃，相对湿度 60-80%，通气良好。一 般液剂在 0.1-1%，粉剂 1-10%。 三. 主要仪器及试材： 试虫：小菜蛾（3 龄）。 供试药剂：药剂 A、药剂 B。 试验器材：养虫室、喷雾塔、量筒、镊子、吸管、烧杯、培养皿、毛笔等。 四. 实验方法与步骤 1、药剂配制：将 A、B 药剂配成 0.1%的溶液备用。 2、试虫移取： 取小菜蛾 3 龄幼虫集中混匀后，用毛笔刷入培养皿，每处理 10 头，重复一次。 3、喷布质量检定 用 9cm 的白色园纸片来检查喷雾雾滴的大小和喷布是否均匀一致，如不符合要求，可 调节喷头及位置，使喷布质量达到基本要求。 4、处理方法： 采用喷雾法，选用 potter 喷雾塔，喷布药液前，用清水及欲喷洒的药液大量喷布。换药 前需将受药盘及雾化室底部用布充分擦净，然后大量喷布试验的药液。 在接有小菜蛾的培养皿中加入一定新鲜菜叶后，用移液管吸取 3ml 药液进行喷布，约 10 秒后，待药液全部沉降，取出培养皿，做好标记，空白对照只喷洒清水。待药剂干 后，将试虫连同饲料置于恢复室内培养 24 小时后检查结果。 五. 实验注意事项：
内蒙古农业大学自编教材《农药生物测定实验指导》1、目标试虫的选择：应选用具有一定的代表性及经济价值，耐药性较强、生长健壮、自然死亡率底，虫龄虫体大小一致，最好采用人工饲养的试虫。2、环境条件的选择：温度在20-28℃，相对湿度在60%-80%，通气良好。3、处理设计：每处理需试虫15-30头，可以不设重复，每次试验均要设空白对照，施药时要注意各处理用药等量均匀一致。六实验结果处理：处理24小时，48小时后，检查死活虫数，计算死亡率及校正死亡率，并比较不同药剂的毒力大小。试虫死活标准，一般以能正常活动或飞翔的或能正常行动的作为活虫，其余中毒的均为死虫。死虫数死亡率×100%总虫数处理死亡率－对照死亡率校正死亡率=×100%1-对照死亡率表1杀虫剂初步毒力试验记载表处理24小时处理48小时浓度试试验处理供试死死死亡死亡校正死(或剂校正死虫药剂方法昆虫虫虫量)数率(%)亡率(%)率(%)亡率(%)数数七思考题：1、将筛选药剂的毒力试验结果记入杀虫剂初步毒力试验记载表，并写成报告。2、杀虫剂初步毒力测定在杀虫剂的筛选中有什么重要意义。2
内蒙古农业大学自编教材《农药生物测定实验指导》 2 1、目标试虫的选择：应选用具有一定的代表性及经济价值，耐药性较强、生长健壮、自然 死亡率底，虫龄虫体大小一致，最好采用人工饲养的试虫。 2、环境条件的选择：温度在 20-28℃，相对湿度在 60%-80%，通气良好。 3、处理设计：每处理需试虫 15-30 头，可以不设重复，每次试验均要设空白对照，施药时 要注意各处理用药等量均匀一致。 六. 实验结果处理： 处理 24 小时，48 小时后，检查死活虫数，计算死亡率及校正死亡率，并比较不同药剂 的毒力大小。试虫死活标准，一般以能正常活动或飞翔的或能正常行动的作为活虫，其 余中毒的均为死虫。 100% 1 100% 对照死亡率 处理死亡率 对照死亡率 校正死亡率 总虫数 死虫数 死亡率 表 1 杀虫剂初步毒力试验记载表 试验 药剂 浓度 (或剂 量) 处理 方法 供试 昆虫 试 虫 数 处理 24 小时 处理 48 小时 死 虫 数 死亡 率(%) 校正死 亡率(%) 死 虫 数 死亡 率(%) 校正死 亡率(%) 七. 思考题： 1、将筛选药剂的毒力试验结果记入杀虫剂初步毒力试验记载表，并写成报告。 2、杀虫剂初步毒力测定在杀虫剂的筛选中有什么重要意义
内蒙古农业大学自编教材《农药生物测定实验指导》实验二杀虫剂触杀毒力测定微量点滴法一。实验目的：1、学习和掌握触杀毒力精密测定技术一微量点滴法。2、学习农药生物测定数据的处理方法一绘图法，最小二乘法和机率值分析法，求出致死中量（LDso）和致死中浓度（LCso）。3、明确杀虫剂杀虫毒力表示方法的意义和应用。二，实验原理：在进行农药杀虫作用方式的实验后，了解某些化合物具有触杀作用的基础上，为了明确其触杀强度以及比较几种药剂的触杀毒力大小时，需采用精密触杀毒力测定技术来求出它的致死中量（或致死中浓度）。目前许多有机合成杀虫剂大多数都具有触杀作用，因而触杀毒力测定具有一定的重要性，测定方法虽然很多，但基本上可分为两大类：一是全部施药法：如定量喷粉法、定量喷雾法和用一定浓度药液浸渍法等。其优点是操作方便，比较符合实际施药情况。但药剂容易被试虫吞食产生胃毒作用。二是局部施药法：是自前比较精确的触杀毒力测定方法。一般包括药膜法和微量点滴法。微量点滴法是将一定浓度和容积的药液点滴在试虫体的一定部位，溶剂挥发后，药剂即可自体壁进入体内发挥触杀作用，药剂不致被试虫吞食。本实验采用微量点滴法来测定农药的触杀毒力作用。三．主要仪器及试材：1、试虫：棉铃虫（3龄）2、药剂：氯氰菊酯等3、实验仪器及用具：养虫室、毛细管点滴器、分析天平、滤纸、通针、培养皿（5cm）、容量瓶、具塞小试管及试管架、镊子、移液管、丙酮等。四．实验方法与步骤：（一）试验前的准备工作1、试虫的移取：选取3龄棉铃虫，大小均匀一致的个体，放在垫有吸水纸的培养皿内，每皿10头，为一个处理。每个处理重复三次，分别在分析天平上称重，求出平均体重，备用。2、称药配药：将试药小心地移入洗净干燥的称量瓶中，在分析天平上准确称取一定量试药，放入小烧杯内，加少量丙酮溶解，再移入容量瓶中，加丙酮定容。摇匀即为母液，备用。3、毛细管点滴器的质量检定：检查毛细管微量点滴器是否通畅，并练习使用。（二）预备试验3
内蒙古农业大学自编教材《农药生物测定实验指导》 3 实验二 杀虫剂触杀毒力测定 ——微量点滴法 一．实验目的： 1、学习和掌握触杀毒力精密测定技术—微量点滴法。 2、学习农药生物测定数据的处理方法—绘图法，最小二乘法和机率值分析法，求出致死中 量（LD50）和致死中浓度（LC50）。 3、明确杀虫剂杀虫毒力表示方法的意义和应用。 二．实验原理： 在进行农药杀虫作用方式的实验后，了解某些化合物具有触杀作用的基础上，为了明确 其触杀强度以及比较几种药剂的触杀毒力大小时，需采用精密触杀毒力测定技术来求出它的 致死中量（或致死中浓度）。目前许多有机合成杀虫剂大多数都具有触杀作用，因而触杀毒 力测定具有一定的重要性，测定方法虽然很多，但基本上可分为两大类：一是全部施药法： 如定量喷粉法、定量喷雾法和用一定浓度药液浸渍法等。其优点是操作方便，比较符合实际 施药情况。但药剂容易被试虫吞食产生胃毒作用。二是局部施药法：是目前比较精确的触杀 毒力测定方法。一般包括药膜法和微量点滴法。微量点滴法是将一定浓度和容积的药液点滴 在试虫体的一定部位，溶剂挥发后，药剂即可自体壁进入体内发挥触杀作用，药剂不致被试 虫吞食。本实验采用微量点滴法来测定农药的触杀毒力作用。 三．主要仪器及试材： 1、试虫：棉铃虫（3 龄） 2、药剂：氯氰菊酯等 3、实验仪器及用具：养虫室、毛细管点滴器、分析天平、滤纸、通针、培养皿（5cm）、容 量瓶、具塞小试管及试管架、镊子、移液管、丙酮等。 四．实验方法与步骤： （一）试验前的准备工作 1、试虫的移取： 选取 3 龄棉铃虫，大小均匀一致的个体，放在垫有吸水纸的培养皿内，每皿 10 头，为 一个处理。每个处理重复三次，分别在分析天平上称重，求出平均体重，备用。 2、称药配药： 将试药小心地移入洗净干燥的称量瓶中，在分析天平上准确称取一定量试药，放入小烧 杯内，加少量丙酮溶解，再移入容量瓶中，加丙酮定容。摇匀即为母液，备用。 3、毛细管点滴器的质量检定： 检查毛细管微量点滴器是否通畅，并练习使用。 （二）预备试验