《农药生物测定》实验指导书（植物保护专业适用）二0一八年六月
《农药生物测定》 实验指导书 （植物保护专业适用） 二 O 一八年六月
前言本实验指导是作为植物保护专业本科生《农药生物测定》课程相配套的实验指导教材。本教材包括14个实验及死亡率机率值换算表，实验内容包括：杀虫剂触杀毒力测定、杀虫剂胃毒毒力测定、杀虫剂内吸毒力测定、杀虫剂熏蒸毒力测定、杀菌剂孢子萌发测定法、杀菌剂生长速率测定法、扩散法测定杀菌剂生物活性、杀菌剂生物活性测定（圆叶片法）、除草剂生物测定（黄瓜幼苗形态法）、草剂生物测定（番茄水培法）、除草剂温室盆栽实验、杀虫剂田间药效试验、杀菌剂田间药效试验、除草剂田间药效试验。本书是《农药生物测定》的辅助实验指导教材，通过本教材所列实验的基本知识及实验技能的掌握，可加深学生对课程内容的理解，促进学生对各项实验技能的掌握。由于编者水平有限，蔬漏之处在所难免，请老师和同学们批评指正，以便再印时及时修改、补充。编者2018年6月
前 言 本实验指导是作为植物保护专业本科生《农药生物测定》课程相配套的实验 指导教材。 本教材包括 14 个实验及死亡率机率值换算表，实验内容包括：杀虫剂触杀 毒力测定、杀虫剂胃毒毒力测定、杀虫剂内吸毒力测定、杀虫剂熏蒸毒力测定、 杀菌剂孢子萌发测定法、杀菌剂生长速率测定法、扩散法测定杀菌剂生物活性、 杀菌剂生物活性测定（圆叶片法）、除草剂生物测定（黄瓜幼苗形态法）、草剂生 物测定（番茄水培法）、除草剂温室盆栽实验、杀虫剂田间药效试验、杀菌剂田 间药效试验、除草剂田间药效试验。 本书是《农药生物测定》的辅助实验指导教材，通过本教材所列实验的基本 知识及实验技能的掌握，可加深学生对课程内容的理解，促进学生对各项实验技 能的掌握。 由于编者水平有限，疏漏之处在所难免，恳请老师和同学们批评指正，以便 再印时及时修改、补充。 编者 2018 年 6 月
目录实验一杀虫剂综合毒力测定实验二杀虫剂触杀毒力测定36实验二杀虫剂胃毒毒力测定实验三杀虫剂内吸毒力测定010实验四杀虫剂熏蒸毒力测定实验五杀菌剂孢子萌发测定法12实验六杀菌剂生长速率测定法1416实验七扩散法测定杀菌剂生物活性实验八杀菌剂生物活性测定-圆叶片法1920实验九除草剂生物测定一黄瓜幼苗形态法实验十草剂生物测定一番茄水培法22实验十一除草剂温室盆栽实验24实验十二杀虫剂田间药效试验26.28实验十三杀菌剂田间药效试验实验十四除草剂田间药效试验30附表生物统计机率值换算表32
目 录 实验一 杀虫剂综合毒力测定. 1 实验二 杀虫剂触杀毒力测定. 3 实验二 杀虫剂胃毒毒力测定. 6 实验三 杀虫剂内吸毒力测定. 8 实验四 杀虫剂熏蒸毒力测定. 10 实验五 杀菌剂孢子萌发测定法. 12 实验六 杀菌剂生长速率测定法. 14 实验七 扩散法测定杀菌剂生物活性. 16 实验八 杀菌剂生物活性测定——圆叶片法 . 19 实验九 除草剂生物测定—黄瓜幼苗形态法 . 20 实验十 草剂生物测定—番茄水培法. 22 实验十一 除草剂温室盆栽实验. 24 实验十二 杀虫剂田间药效试验. 26 实验十三 杀菌剂田间药效试验. 28 实验十四 除草剂田间药效试验. 30 附表 生物统计机率值换算表. 32
内蒙古农业大学自编教材《农药生物测定实验指导》实验一杀虫剂综合毒力测定一，实验目的：1、通过本试验学习掌握杀虫剂室内毒力初筛试验的操作技术。2、观察昆虫中毒征象特征一一兴奋、击倒、抽搐、麻痹、昏迷、死亡等。3、明确标准目标昆虫代表性的实用意义。二、实验原理：为了初步确定某些化学物质是否对某些害虫具有毒杀能力，应首先进行一次淘汰试验，或叫初筛试验，又称初步综合杀虫毒力试验。这种试验不涉及毒杀方式和毒杀能力的大小，因此，不严格限制用药量和均匀度，一般采用较高的浓度，尽量发挥综合毒效（包括胃毒、触杀、薰蒸等作用）。一般农药初筛毒力测定方法，根据试虫对象不同，多采用浸渍法、喷雾法、喷粉法、饲料混药法等。每处理需试虫15-30头，可以不设重复，每次试验均要设空白对照，施药时要注意各处理用药等量均匀一致，设置温度一般在20-28℃，相对湿度60-80%，通气良好。一般液剂在0.1-1%，粉剂1-10%。三，主要仪器及试材：试虫：小菜蛾（3龄）。供试药剂：药剂A、药剂B。试验器材：养虫室、喷雾塔、量筒、镊子、吸管、烧杯、培养皿、毛笔等。四.实验方法与步骤1、药剂配制：将A、B药剂配成0.1%的溶液备用。2、试虫移取：取小菜蛾3龄幼虫集中混匀后，用毛笔刷入培养皿，每处理10头，重复一次。3、喷布质量检定用9cm的白色园纸片来检查喷雾雾滴的大小和喷布是否均匀一致，如不符合要求，可调节喷头及位置，使喷布质量达到基本要求。4、处理方法：采用喷雾法，选用potter喷雾塔，喷布药液前，用清水及欲喷洒的药液大量喷布。换药前需将受药盘及雾化室底部用布充分擦净，然后大量喷布试验的药液。在接有小菜蛾的培养血中加入一定新鲜菜叶后，用移液管吸取3ml药液进行喷布，约10秒后，待药液全部沉降，取出培养皿，做好标记，空白对照只喷洒清水。待药剂干后，将试虫连同饲料置于恢复室内培养24小时后检查结果。五，实验注意事项：1
内蒙古农业大学自编教材《农药生物测定实验指导》 1 实验一 杀虫剂综合毒力测定 一. 实验目的： 1、通过本试验学习掌握杀虫剂室内毒力初筛试验的操作技术。 2、观察昆虫中毒征象特征——兴奋、击倒、抽搐、麻痹、昏迷、死亡等。 3、明确标准目标昆虫代表性的实用意义。 二. 实验原理： 为了初步确定某些化学物质是否对某些害虫具有毒杀能力，应首先进行一次淘汰试验， 或叫初筛试验，又称初步综合杀虫毒力试验。这种试验不涉及毒杀方式和毒杀能力的大小， 因此，不严格限制用药量和均匀度，一般采用较高的浓度，尽量发挥综合毒效（包括胃毒、 触杀、薰蒸等作用）。 一般农药初筛毒力测定方法，根据试虫对象不同，多采用浸渍法、喷雾法、喷粉法、饲 料混药法等。每处理需试虫 15-30 头，可以不设重复，每次试验均要设空白对照，施药时要 注意各处理用药等量均匀一致，设置温度一般在 20-28℃，相对湿度 60-80%，通气良好。一 般液剂在 0.1-1%，粉剂 1-10%。 三. 主要仪器及试材： 试虫：小菜蛾（3 龄）。 供试药剂：药剂 A、药剂 B。 试验器材：养虫室、喷雾塔、量筒、镊子、吸管、烧杯、培养皿、毛笔等。 四. 实验方法与步骤 1、药剂配制：将 A、B 药剂配成 0.1%的溶液备用。 2、试虫移取： 取小菜蛾 3 龄幼虫集中混匀后，用毛笔刷入培养皿，每处理 10 头，重复一次。 3、喷布质量检定 用 9cm 的白色园纸片来检查喷雾雾滴的大小和喷布是否均匀一致，如不符合要求，可 调节喷头及位置，使喷布质量达到基本要求。 4、处理方法： 采用喷雾法，选用 potter 喷雾塔，喷布药液前，用清水及欲喷洒的药液大量喷布。换药 前需将受药盘及雾化室底部用布充分擦净，然后大量喷布试验的药液。 在接有小菜蛾的培养皿中加入一定新鲜菜叶后，用移液管吸取 3ml 药液进行喷布，约 10 秒后，待药液全部沉降，取出培养皿，做好标记，空白对照只喷洒清水。待药剂干 后，将试虫连同饲料置于恢复室内培养 24 小时后检查结果。 五. 实验注意事项：
内蒙古农业大学自编教材《农药生物测定实验指导》1、目标试虫的选择：应选用具有一定的代表性及经济价值，耐药性较强、生长健壮、自然死亡率底，虫龄虫体大小一致，最好采用人工饲养的试虫。2、环境条件的选择：温度在20-28℃，相对湿度在60%-80%，通气良好。3、处理设计：每处理需试虫15-30头，可以不设重复，每次试验均要设空白对照，施药时要注意各处理用药等量均匀一致。六实验结果处理：处理24小时，48小时后，检查死活虫数，计算死亡率及校正死亡率，并比较不同药剂的毒力大小。试虫死活标准，一般以能正常活动或飞翔的或能正常行动的作为活虫，其余中毒的均为死虫。死虫数死亡率×100%总虫数处理死亡率－对照死亡率校正死亡率=×100%1-对照死亡率表1杀虫剂初步毒力试验记载表处理24小时处理48小时浓度试试验处理供试死死死亡死亡校正死(或剂校正死虫药剂方法昆虫虫虫量)数率(%)亡率(%)率(%)亡率(%)数数七思考题：1、将筛选药剂的毒力试验结果记入杀虫剂初步毒力试验记载表，并写成报告。2、杀虫剂初步毒力测定在杀虫剂的筛选中有什么重要意义。2
内蒙古农业大学自编教材《农药生物测定实验指导》 2 1、目标试虫的选择：应选用具有一定的代表性及经济价值，耐药性较强、生长健壮、自然 死亡率底，虫龄虫体大小一致，最好采用人工饲养的试虫。 2、环境条件的选择：温度在 20-28℃，相对湿度在 60%-80%，通气良好。 3、处理设计：每处理需试虫 15-30 头，可以不设重复，每次试验均要设空白对照，施药时 要注意各处理用药等量均匀一致。 六. 实验结果处理： 处理 24 小时，48 小时后，检查死活虫数，计算死亡率及校正死亡率，并比较不同药剂 的毒力大小。试虫死活标准，一般以能正常活动或飞翔的或能正常行动的作为活虫，其 余中毒的均为死虫。 100% 1 100% 对照死亡率 处理死亡率 对照死亡率 校正死亡率 总虫数 死虫数 死亡率 表 1 杀虫剂初步毒力试验记载表 试验 药剂 浓度 (或剂 量) 处理 方法 供试 昆虫 试 虫 数 处理 24 小时 处理 48 小时 死 虫 数 死亡 率(%) 校正死 亡率(%) 死 虫 数 死亡 率(%) 校正死 亡率(%) 七. 思考题： 1、将筛选药剂的毒力试验结果记入杀虫剂初步毒力试验记载表，并写成报告。 2、杀虫剂初步毒力测定在杀虫剂的筛选中有什么重要意义