LacZ△M15 LacZ' LacZ△M15 IPTG/x-gal LacZ 蓝色 LacZ△M15 IPTG/x-gal 白色 LacZ Q DNA
LacZ ΔM15 LacZ´ LacZ ΔM15 IPTG/x-gal LacZ´ 蓝色 LacZ ΔM15 LacZ ´Ω DNA IPTG/x-gal 白色
在载体中加入一个短区段，含LacZ基因的调控区和前 140个aa的编码信息，在这个编码区中插入一个多克隆位 点，它并不破坏阅读框架，相当于在B-半乳糖苷酶的氨基 端插入了几个氨基酸，而不影响未加几个氨基酸时的功能。 lacZ△M15编码缺失第11-41位氨基酸的B-半乳糖苷酶， 但无酶学活性
在载体中加入一个短区段，含LacZ基因的调控区和前 140个aa的编码信息，在这个编码区中插入一个多克隆位 点，它并不破坏阅读框架，相当于在β-半乳糖苷酶的氨基 端插入了几个氨基酸，而不影响未加几个氨基酸时的功能。 lacZΔM15编码缺失第11-41位氨基酸的β-半乳糖苷酶， 但无酶学活性
当LacZ'与lacZ△M15的产物混合在一起时却有酶学 活性，所以在载体上加lacZ/(MCS),并在受体菌中引 入lacZ△M15即可实现-互补。 在生色底物(x-gl)存在下形成蓝色菌落，而外源 基因插入到质粒的MCS后，几乎不可避免地导致产生 互补能力的氨基酸片段
当LacZ´与lacZΔM15的产物混合在一起时却有酶学 活性，所以在载体上加lacZ/（MCS），并在受体菌中引 入lacZΔM15即可实现α-互补。 在生色底物（x-gal）存在下形成蓝色菌落，而外源 基因插入到质粒的MCS后，几乎不可避免地导致产生α- 互补能力的氨基酸片段
0-互补： LacZ基因上缺失近操纵基因区段的突变体与带有完 整的近操纵基因区段的B-半乳糖苷酶阴性的突变体 之间实现互补。 lacZ△M15 放在F质粒上，随宿主传代 lacZ 放在载体上，作为筛选标记 相应的受体菌：TG1,XL1-Blue,JM101等
α-互补： LacZ基因上缺失近操纵基因区段的突变体与带有完 整的近操纵基因区段的β-半乳糖苷酶阴性的突变体 之间实现互补。 lacZΔM15 放在F质粒上，随宿主传代 lacZ ´ 放在载体上，作为筛选标记 相应的受体菌：TG1，XL1-Blue，JM101等
多克隆位点 裂开的N端 amp pUC18 amp pUC18 2686bp B半乳糖苷酶 2686bp 外源DNA N端编码序列 裂开的N端 启动子 转化 转化 染色体 B一半乳糖苷酶 C貔码序列 重组体pUC18 细菌在含X-g和 pUC18 乳精操纵子诱导 剂的琼脂上培养 细菌在含X-gl 和羽糖操纵子诱 导剂的京胎上培养 含重组体pUC18 的白色菌落 蓝色菌落 含载体pUC18 的蓝色菌落