(4)质粒的不相溶性 *不相溶群：指那些具有不相溶的质粒组成的一 个群体，一般具有相同的复制子。 现已发现30多个不相溶群
（4）质粒的不相溶性 ﹡ 不相溶群：指那些具有不相溶的质粒组成的一 个群体，一般具有相同的复制子。 现已发现30多个不相溶群
(5)转移性 在自然条件下，很多质粒可以通过细菌接合的 作用转移到新宿主内。 米 要素：移动基因mob,转移基因tra,转移起始 位点。 米 例：pBR322有起始位点bom的nic位点，可在第 三个质粒（如CoK)编码的转移蛋白质作用下， 通过接合性质粒来进行转移，但大多数载体无 nic/bom位点（如pUC)
（5）转移性 ﹡ 在自然条件下，很多质粒可以通过细菌接合的 作用转移到新宿主内。 ﹡ 要素：移动基因mob，转移基因tra，转移起始 位点。 ﹡ 例：pBR322有起始位点bom的nic位点，可在第 三个质粒（如ColK）编码的转移蛋白质作用下， 通过接合性质粒来进行转移，但大多数载体无 nic/bom位点（如pUC ）
(6)选择标记 选择标记基因 用于鉴别目标DNA的存在，将成功转化了质粒的宿主 挑选出来。 (1) 氨苄青霉素抗性基因ampicillin,.Amp',amp 青霉素抑制细菌细胞壁肽聚糖的合成，与有关的酶结 合，抑制转肽反应并抑制其活性。 Amp编码一个酶，可分泌进入细菌的周质区，并催化 B-内酰胺环水解，从而解除氨苄青霉素的毒性
（6）选择标记 选择标记基因 用于鉴别目标DNA的存在，将成功转化了质粒的宿主 挑选出来。 (1) 氨苄青霉素抗性基因 ampicillin, Ampr , ampr 青霉素抑制细菌细胞壁肽聚糖的合成，与有关的酶结 合，抑制转肽反应并抑制其活性。 Ampr编码一个酶，可分泌进入细菌的周质区，并催化 β-内酰胺环水解，从而解除氨苄青霉素的毒性
(2)四环素抗性基因tetracycline,.tet 四环素与核糖体30S亚基的一种蛋白质结合，从而抑制核 糖体的转位。 tet基因编码一个由399个aa组成的膜结合蛋白，可阻止四 环素进入细胞。 (3)氯霉素抗性基因chloramphenicol,.Cm',Cat Cm与核糖体50S亚基结合并抑制蛋白质合成。 Cat基因编码一个四聚体细胞质蛋白，每个亚基23kDa。 氯霉素乙酰转移酶在乙酰辅酶A存在的条件下，催化氯霉 素羟乙酰氧基衍生物的形成，该产物不能与核糖体结合
（2） 四环素抗性基因 tetracycline, tetr 四环素与核糖体30 S亚基的一种蛋白质结合，从而抑制核 糖体的转位。 tetr基因编码一个由399个aa组成的膜结合蛋白，可阻止四 环素进入细胞。 （3） 氯霉素抗性基因 chloramphenicol, Cmr , Cat Cm与核糖体50 S亚基结合并抑制蛋白质合成。 Cat基因编码一个四聚体细胞质蛋白，每个亚基23 kDa。 氯霉素乙酰转移酶在乙酰辅酶A存在的条件下，催化氯霉 素羟乙酰氧基衍生物的形成，该产物不能与核糖体结合
(4)卡那霉素和新霉素抗性基因kanamycin/neomycin 可与核糖体成分相结合并抑制蛋白质合成的脱氧链霉胺氨 基糖苷。 这两种抗生素可被氨基糖苷磷酸转移酶(APH(3‘)-)所灭 活，该酶为25kDa,似乎位于外周质腔，这些抗生素的磷 酸化干扰了它们向细胞质内的主动转移
（4） 卡那霉素和新霉素抗性基因 kanamycin / neomycin 可与核糖体成分相结合并抑制蛋白质合成的脱氧链霉胺氨 基糖苷。 这两种抗生素可被氨基糖苷磷酸转移酶 (APH(3‘)-II)所灭 活，该酶为25 kDa ，似乎位于外周质腔，这些抗生素的磷 酸化干扰了它们向细胞质内的主动转移