(二)PCR技术是基因诊断的一种基础技术 PCR及其衍生技术 7.甲基化特异性PCR Methylation specifiC PCR, MS-PCR 模板甲基化处理:Na2SO3C-U 需设针特异性甲基化引物G:C/A:U T界F解多
(二)PCR技术是基因诊断的一种基础技术 PCR及其衍生技术 7. 甲基化特异性PCR Methylation specific PCR, MS-PCR 模板甲基化处理:Na2SO3 C-U 需设计特异性甲基化引物G:C/A:U
3’ GGACGTAGA5非甲基化引物 5---CCTGCATCT------- GCGCTAGGC----3 3---GGACGTAGA-------CGCGATCCG---5 5GCGCATGGC 3 3 AAACATAAA5甲基化引物 5---UUTGUATUT-------GCGCTAGGC----3 3---GGACGTAGA-------AUGUGATUU---5 5TACACATAA 3
3’ GGACGTAGA5’ 非甲基化引物 5’---CCTGCATCT------- GCGCTAGGC----3’ 3’---GGACGTAGA-------CGCGATCCG---5’ 5’GCGCATGGC 3’ 3’ AAACATAAA 5’ 甲基化引物 5’---UUTGUATUT-------GCGCTAGGC----3’ 3’---GGACGTAGA-------AUGUGATUU---5’ 5’TACACATAA 3’
3 GGACGTAGA5 5’-- CCTGCmATCT GCGCTAGGC----3 3---GGACGTAGA -------CGCGATcmcmG---5 5GCGCATGGC 33 若存在甲基化位点 3 AAACATA AA5 5---UUTGCMATUT------- GCGCTAGGC----3 3’-- GGACGTAGA UGUGATomcmG--5 5'ACACATAAC 3
3’ GGACGTAGA5’ 5’---CCTGCmATCT------- GCGCTAGGC----3’ 3’---GGACGTAGA ------- CGCGATCmCmG---5’ 5’GCGCATGGC 3’ 3’ AAACATA AA5’ 5’---UUTGCmATUT------- GCGCTAGGC----3’ 3’---GGACGTAGA -------UGUGATCmCmG--5’ 5’ ACACATA AC 3’ 若存在甲基化位点
(二)PCR技术是基因诊断的一种基础技术 PCR及其衍生技术 8.靶核酸的定量分析 Q-PCR, Quantitative PCR 基本原理:PCR指数扩增规镎 N=N(1+E) 常R究解多
(二)PCR技术是基因诊断的一种基础技术 PCR及其衍生技术 8. 靶核酸的定量分析 Q-PCR, Quantitative PCR 基本原理:PCR指数扩增规律 N=N0 (1+E)n
PCR扩增有限性平台期及平台 效应( plateau effect .075 一 0.05 PCR扩增的 平台效应 0.025
PCR扩增有限性-平台期及平台 效应(plateau effect) PCR扩增的 平台效应