原位杂交常压标记物质770年代放射性同位素3H、35S、125I、32P等80年代中后期非放射性物质荧光素生物素、「地高辛等FoshanUniversity
Foshan University • 3H、 35S、 125I、 32P等 1 放射性同位素 2 荧光素、生物素、地高辛等 2 非放射性物质
，同位素原位杂交的不足之处：1、不稳定·2、高背景3、曝光时间长·4、结果统计处理繁琐·5、同位素的使用和处理FoshanUniversity
Foshan University • 同位素原位杂交的不足之处： • 1、不稳定 • 2、高背景 • 3、曝光时间长 • 4、结果统计处理繁琐 • 5、同位素的使用和处理
荧光原位杂交·荧光原位杂交（Fluorescence in situhybridization，FISH）是在20世纪80年代末在放射性原位杂交技术的基础上发展起来的一种非放射性分子细胞遗传技术,以荧光标记取代同位素标记而形成的一种新的原位杂交方法，探针首先与某种介导分子(reportermolecule)结合,杂交后再通过免疫细胞化学过程连接上荧光染料FoshanUniversity
Foshan University 荧光原位杂交 • 荧光原位杂交（Fluorescence in situ hybridization， FISH）是在20世纪80年代末 在放射性原位杂交技术的基础上发展起来 的一种非放射性分子细胞遗传技术,以荧光 标记取代同位素标记而形成的一种新的原 位杂交方法，探针首先与某种介导分子 (reporter molecule)结合,杂交后再通过免疫 细胞化学过程连接上荧光染料
"1969年Gall和Pardue 以及Pardue等人利用放射性同位素标记的核酸探针对DNA进行了杂交,开创了RNA-DNA 的同位素原位杂交技术·他们都是采用放射性同位素标记探针,需要采用放射自显影进行检测,这种检测上的限制及当时分子克隆方法的缺乏使得DNA原位杂交技术不能很快得到广泛应用。FoshanUniversity
Foshan University • 1969 年Gall 和Pardue 以及Pardue 等人利用 放射性同位素标记的核酸探针对DNA进行 了杂交,开创了RNA-DNA 的同位素原位杂 交技术。 • 他们都是采用放射性同位素标记探针,需要 采用放射自显影进行检测,这种检测上的限 制及当时分子克隆方法的缺乏使得DNA原 位杂交技术不能很快得到广泛应用
1974年，Evans第一次将染色体显带技术和原位杂交技术结合起来,提高了基因定位的准确性。1975年,Manning等最先在溶液的分子杂交中,使用非放射性标记,通过细胞色素C将生物素与RNA分子连接起来1977年Rudkin发明了用间接免疫荧光法检测目的DNA的非同位素原位杂交(NISH)FoshanUniversity
Foshan University • 1974 年，Evans第一次将染色体显带技术和 原位杂交技术结合起来,提高了基因定位的 准确性。 • 1975 年,Manning 等最先在溶液的分子杂交 中,使用非放射性标记,通过细胞色素C 将生 物素与RNA 分子连接起来。 • 1977 年Rudkin发明了用间接免疫荧光法检 测目的DNA 的非同位素原位杂交(NISH)