11.复染：将显色后的片子用清水冲洗一段时间后，浸泡于苏木精中染色，3s左右即可。12.脱水：将复染后的片子置于水中冲洗后，依次将载玻片放入70%酒精-80%酒精-90%酒精-95%酒精-100%酒精-100%酒精-二甲苯-二甲苯。每个试剂中放置2min，最后浸泡在二甲苯中，搬到通风柜中。13.封片：用中性树胶滴在组织旁边，再用盖玻片盖上，要先放平一侧，然后轻轻放下另一侧，以免产生气泡，封好片子后置于通风柜中晾干。FoshanUniversity
Foshan University 11. 复染： 将显色后的片子用清水冲洗一段时间后，浸泡于苏木精中染色，3s左右即可。 12. 脱水： 将复染后的片子置于水中冲洗后，依次将载玻片放入70%酒精-80%酒精-90%酒精-95% 酒精-100%酒精-100%酒精-二甲苯-二甲苯。每个试剂中放置2min，最后浸泡在二甲苯 中，搬到通风柜中。 13. 封片： 用中性树胶滴在组织旁边，再用盖玻片盖上，要先放平一侧，然后轻轻放下另一侧， 以免产生气泡，封好片子后置于通风柜中晾干
实验分3组1.怀孕母鼠组：取材：子宫，子宫颈（胞质阳性、胞核阳性）、卵巢、乳腺、下丘脑、脑垂体、肾上腺2.犬肿瘤组：乳腺（阳性对照）3.豚鼠组：取材：子宫，子宫颈（胞质阳性、胞核阳性）、卵巢、乳腺、下丘脑、脑垂体、肾上腺FoshanUniversity
Foshan University 实验分3组 1.怀孕母鼠组： 取材：子宫，子宫颈（胞质阳性、胞核阳性）、卵巢、乳腺、下丘脑、脑 垂体、肾上腺 2.犬肿瘤组：乳腺（阳性对照） 3.豚鼠组： 取材：子宫，子宫颈（胞质阳性、胞核阳性）、卵巢、乳腺、下丘脑、脑垂体、肾上腺
荧光原位杂交(Fluorescence in situhybridization,FISH)
（Fluorescence in situ hybridization,FISH）
原位杂交（ISH)将标记的原位杂交(in situ hybridization,ISH)核酸探针与细胞或组织中的核酸进行杂交。原位杂交技术(ISH)是分子生物学、组织化学及细胞学相结合而产生的一门新兴技术，始于20世纪60年代。·使用DNA或者RNA探针来检测与其互补的另一条链在细菌或其他真核细胞中的位置FoshanUniversity
Foshan University 原位杂交（ISH） • 原位杂交 (in situ hybridization, ISH) 将标记的 核酸探针与细胞或组织中的核酸进行杂交。 • 原位杂交技术(ISH)是分子生物学、组织化学 及细胞学相结合而产生的一门新兴技术，始于 20世纪60年代。 • 使用DNA或者RNA探针来检测与其互补的另 一条链在细菌或其他真核细胞中的位置
基本原理·根据碱基互补配对原则，同源的DNA-DNA、DNA-RNA和RNA-RNA两条单链在一定条件下能结合成双链。用放射性或非放射性物质标记的DNA、RNA或与mRNA互补的cDNA作探针，与组织切片或细胞内待测核酸(RNA或DNA）片段进行杂交，然后可用放射自显影等方法予以显示，在光镜或电镜下观察目的mRNA或DAN的存在与定位。FoshanUniversity
Foshan University 基本原理 • 根据碱基互补配对原则，同源的DNA-DNA 、DNA-RNA和RNA-RNA两条单链在一定 条件下能结合成双链。用放射性或非放射 性物质标记的DNA、RNA或与mRNA互补 的cDNA作探针，与组织切片或细胞内待测 核酸(RNA或DNA）片段进行杂交，然后可 用放射自显影等方法予以显示，在光镜或 电镜下观察目的 mRNA或DAN 的存在与定 位