实验1石蜡切片制作及常规染色步骤如下:1.取材与固定实验室常用的单一固定液是:4%甲醛(10%福尔马林)固定液乙醇、重铬酸钾也是切片制作常用的固定剂FoshanUniversity
Foshan University 实验1 石蜡切片制作及常规染色 步骤如下: 1.取材与固定 实验室常用的单一固定液是: 4%甲醛(10%福尔马林)固定液 乙醇、重铬酸钾也是切片制作常用的固定剂
2.修组织块与冲洗3.脱水与透明脱水的目的在于用乙醇(脱水剂)完全除去组织内水分。实验室常从70%乙醇开始脱水,80%、90%、95%至无水乙醇逐级更换,最后完全把组织中水分置换出来。常用的透明剂有二甲苯、苯、氯仿等。FoshanUniversity
Foshan University 2.修组织块与冲洗 3.脱水与透明 脱水的目的在于用乙醇(脱水剂)完全除去组织内水分。实验室常从70%乙醇开始脱 水,80%、90%、95%至无水乙醇逐级更换,最后完全把组织中水分置换出来。 常用的透明剂有二甲苯、苯、氯仿等
4.浸蜡与包埋浸蜡的目的在于除去组织中的二甲苯而代以石蜡。5.修蜡块和切片把包有组织块的长条蜡块,用单面刀片分割成以组织块为中心的正方形或长方形。6.展片与贴片把蜡片直接置于40-45℃C水中展片。FoshanUniversity
Foshan University 4.浸蜡与包埋 浸蜡的目的在于除去组织中的二甲苯而代以石蜡。 5.修蜡块和切片 把包有组织块的长条蜡块,用单面刀片分割成以组织块为中心的正方形或长方形。 6.展片与贴片 把蜡片直接置于40-45℃水中展片
7.染色教学和科研最常用的染色方法之一是苏木精一伊红(HE)染色。方法:①切片经二甲苯I、Ⅱ(各5min)脱蜡一无水乙醇I、Ⅱ(各2min)一→95%、80%、70%乙醇(各2min)一→蒸馏水洗去酒精,待染色。②苏木精染色将复水后的切片置于Delafield's苏木精原液中,染25min。自来水洗去残留染料5-10min→蒸馏水洗2min一1%盐酸酒精分色3-30s(严格控制时间)→自来水蓝化(30min~数小时,切片从淡紫红色转变为鲜艳的蓝色即可)一→蒸馏水洗2min,待染伊红。FoshanUniversity
Foshan University 7.染色 教学和科研最常用的染色方法之一是苏木精—伊红(HE)染色。 方法: ①切片经二甲苯Ⅰ、Ⅱ(各5 min)脱蜡 → 无水乙醇Ⅰ、Ⅱ(各2 min) → 95%、80%、70% 乙醇(各2min) → 蒸馏水洗去酒精,待染色。 ②苏木精染色 将复水后的切片置于Delafield′s苏木精原液中,染25 min。 自来水洗去残留染料5-10min → 蒸馏水洗 2min→ 1%盐酸酒精分色3-30s(严格控制时 间) → 自来水蓝化(30 min~数小时,切片从淡紫红色转变为鲜艳的蓝色即可) → 蒸 馏水洗2min,待染伊红
③伊红染色从蒸馏水中取出切片,置于70%、80%、90%、95%乙醇中逐级脱水各2-5min一伊红酒精染色液1-5min一95%乙醇I、IⅡI1秒~1min一→无水乙醇I、I各2min一二甲苯I、ⅡI透明各5min。8.封片FoshanUniversity
Foshan University ③伊红染色 从蒸馏水中取出切片,置于70%、80%、90%、95%乙醇中逐级脱水各2-5 min → 伊红酒精染色液1-5min→ 95%乙醇Ⅰ、Ⅱ1秒~1 min → 无水乙醇Ⅰ、Ⅱ各2min → 二甲苯Ⅰ、Ⅱ透明各5min。 8.封片