绿色,着色很快,故要很好的掌握着色时间。2、配制:(1)固绿酒精液:固绿1g:溶于95%酒精100ml。(2)苯胺固绿酒精液固绿1g,995%酒精40ml,苯胺10ml,配后充分摇匀,过滤后使用。七、间苯三酚(Pholroglucin)1、作用:用于鉴定木质素。2、配制:配方一:1g间苯三酚溶于100ml蒸馏水中。配方二:将5g溶于100ml95%的乙醇中,(注意溶液呈黄褐色即失效。)3、用法:染色时,先加一滴盐酸,再加一滴间苯三酚,木质化的细胞壁被让成红色。八、离析液1、作用:可使细胞胞间层溶解,因而使细胞彼此分离,获得单个完整细胞,以便观察不同组织细胞的形态特征。离析液种类很多,现介绍最常用的两种。2、配制(1)铬酸-硝酸离析液配方:10%铬酸液+10%硝酸液,等量混合而成。适用于木质化组织,如导管、管胞、纤维、石细胞等,亦可用于草质根、茎成熟组织的解离。(2)硝酸-氯化钾离析液配方:硝酸5ml与1g氯化钾,加热5min,即可将木材离析。八、清洁剂1、作用:用于擦拭显微镜镜头上的油迹和污垢等。2、配制:用7成乙和3成无水乙醇混合,装入滴瓶备用。瓶口必须塞紧,以免挥发。6
6 绿色,着色很快,故要很好的掌握着色时间。 2、配制:(1) 固绿酒精液: 固绿 1 g; 溶于 95%酒精 100 ml。 (2) 苯胺固绿酒精液 固绿 1 g, 95%酒精 40 ml,苯胺 10 ml,配后充分摇 匀,过滤后使用。 七、间苯三酚(Pholroglucin) 1、作用:用于鉴定木质素。 2、配制:配方一:1g 间苯三酚溶于 100ml 蒸馏水中。 配方二:将 5g 溶于 100 ml 95% 的乙醇中,(注意溶液呈黄褐色即失效。) 3、用法:染色时,先加一滴盐酸,再加一滴间苯三酚,木质化的细胞壁被让成红色。 八、离析液 1、作用:可使细胞胞间层溶解,因而使细胞彼此分离,获得单个完整细胞,以便观察 不同组织细胞的形态特征。离析液种类很多,现介绍最常用的两种。 2、配 制 (1)铬酸-硝酸离析液 配方:10% 铬酸液+10% 硝酸液,等量混合而成。适用于木质化组织,如导管、 管胞、纤维、石细胞等,亦可用于草质根、茎成熟组织的解离。 (2)硝酸-氯化钾离析液 配方:硝酸 5 ml 与 1 g 氯化钾,加热 5min,即可将木材离析。 八、清洁剂 1、作用:用于擦拭显微镜镜头上的油迹和污垢等。 2、配制:用 7 成乙醚和 3 成无水乙醇混合,装入滴瓶备用。瓶口必须塞紧,以免挥发
第二章植物生物学实验各论实验一植物学基本实验技术与细胞结构研究一实验目的:1、练习徒手切片的基本方法。2、掌握临时装片的方法和技术。3、熟悉显微镜使用和观察方法。4、掌握细胞观察与生物绘图的方法;理解细胞的结构。二实验仪器用品:常规用品:刀片、培养皿、滴瓶、镊子、解剖针、毛笔、载玻片、盖玻片、纱布、吸水纸、擦镜纸、显微镜(江光XZ212型等)三实验材料:1、鲜材料:萝卜根、洋葱鳞茎:其它临时使用的材料。2、永久切片:洋葱表皮永久片。3、试剂:1%碘液四实验内容与方法:(一)徒手切片方法:是从事教学、科研及生产技术工作中常用的观察植物体内部构造的方法。1、特点:(1)优点:设备用品简单;方法步骤简便,瞬间完成:可观察到组织细胞的生活状态和天然色彩:可进行组织的显微化学鉴定:可根据需要再制成永久制片。(2)缺点:切片的厚薄较难把握;切片常不完整;对太小、太大、太硬、太软等材料困难。2、切前准备:(1)用品准备:刀片:单面或双面,最好用不锈钢双面刀片,单面刀片用于较硬的材料。培养皿:盛放1/4清水,用于浸泡和保存切片。盖玻片、载玻片:用纱布将擦拭干净。清水滴瓶:盛放蒸馏水或洁净的水。7
7 第二章 植物生物学实验各论 实验一 植物学基本实验技术与细胞结构研究 一 实验目的: 1、练习徒手切片的基本方法。 2、掌握临时装片的方法和技术。 3、熟悉显微镜使用和观察方法。 4、掌握细胞观察与生物绘图的方法;理解细胞的结构。 二 实验仪器用品: 常规用品:刀片、培养皿、滴瓶、镊子、解剖针、毛笔、载玻片、盖玻片、纱布、吸水 纸、擦镜纸、显微镜(江光 XZ-212 型等) 三 实验材料: 1、 鲜材料:萝卜根、洋葱鳞茎;其它临时使用的材料。 2、 永久切片:洋葱表皮永久片。 3、 试剂:1% 碘液 四 实验内容与方法: (一)徒手切片方法: 是从事教学、科研及生产技术工作中常用的观察植物体内部构造的方法。 1、特点: (1)优点:设备用品简单;方法步骤简便,瞬间完成;可观察到组织细胞的生活状 态和天然色彩;可进行组织的显微化学鉴定;可根据需要再制成永久制片。 (2)缺点:切片的厚薄较难把握;切片常不完整;对太小、太大、太硬、太软等材 料困难。 2、切前准备: (1)用品准备: 刀片:单面或双面,最好用不锈钢双面刀片,单面刀片用于较硬的材料。 培养皿:盛放 1/4 清水,用于浸泡和保存切片。 盖玻片、载玻片:用纱布将擦拭干净。 清水滴瓶:盛放蒸馏水或洁净的水
毛笔:用于粘取切片:解剖针:用于调整切片等:尖嘴镊镀子用于夹放盖玻片。吸水纸:吸取多余的水分或试剂。(2)材料准备(萝卜)①材料选择:软硬适度。②材料处理:修整成长2~3cm、顶面边长2~5mm。③夹持物:萝卜、胡萝卜或马铃薯块茎。用于夹持较软、较细或较薄的材料。3、切片步骤:(1)握材。(2)持刀。(3)蘸水。(4)切割。(5)转片和保鲜。(二)临时制片1、载、盖玻片擦拭与滴水。2、毛笔选片与转移。3、盖片。4、染色与吸水。(三)装片类型与方法简介切片类型一一徒手切片、机器切片装片类型一一撕片、涂片、压片、离析片。1、撕片法:(1)材料:表皮。(2)方法:切成“#”形2、涂片法:(1)材料:悬浮液。(2)方法:推、匀、薄3、压片法:(1)材料:脆嫩组织。(2)方法:轻、散4、离析法:(1)材料:组织。(2)方法:时间、温度、离析液浓度。(四)显微镜使用1、熟悉结构和功能(见本教程第一部分)。2、使用方法步骤:取镜后放到实验台的适当位置,按照下列方法和步骤进行操作。①开机,②对光,③放置切片标本,④低倍镜使用,③调整焦距,③高倍镜使用,②油镜使用方法(本课程的实验皆用不到油镜),③观察结束后的整理。(五)细胞观察一洋葱表皮细胞1、内容:细胞形态、排列,细胞壁、膜、质、核、液泡。2、注意:1%碘液染色,先低倍后高倍,必要时使用暗视野,禁用油镜。(六)生物绘图1、观察:目标的各部分比例关系、位置、结构特点。2、起稿:在报告纸上确定画的位置与大小,用铅笔(2H或HB)轻勾轮廓线。注意:(1)各部分之间的比例与物象一致。(2)画面稍左,右侧留有注字空间;图下留有图题空间。3、定稿:将轮廓线用实线连接起来。8
8 毛笔:用于粘取切片; 解剖针:用于调整切片等;尖嘴镊子用于夹放盖玻片。 吸水纸:吸取多余的水分或试剂。 (2)材料准备(萝卜) ① 材料选择:软硬适度。②材料处理:修整成长 2~3cm、顶面边长 2~5mm。③ 夹持 物:萝卜、胡萝卜或马铃薯块茎。用于夹持较软、较细或较薄的材料。 3、切片步骤:(1)握材。(2)持刀。(3)蘸水。(4)切割。(5)转片和保鲜。 (二)临时制片 1、载、盖玻片擦拭与滴水。2、毛笔选片与转移。3、盖片。4、染色与吸水。 (三)装片类型与方法简介 切片类型——徒手切片、机器切片 装片类型——撕片、涂片、压片、离析片。 1、撕片法:(1)材料:表皮。 (2)方法:切成“#”形 2、涂片法:(1)材料:悬浮液。 (2)方法:推、匀、薄 3、压片法:(1)材料:脆嫩组织。 (2)方法:轻、散 4、离析法:(1)材料:组织。 (2)方法:时间、温度、离析液浓度。 (四)显微镜使用 1、熟悉结构和功能(见本教程第一部分)。 2、使用方法步骤:取镜后放到实验台的适当位置,按照下列方法和步骤进行操作。 ①开机,②对光,③放置切片标本,④低倍镜使用,⑤调整焦距,⑥高倍镜使用, ⑦油镜使用方法(本课程的实验皆用不到油镜),⑧观察结束后的整理。 (五)细胞观察——洋葱表皮细胞 1、内容:细胞形态、排列,细胞壁、膜、质、核、液泡。 2、注意:1% 碘液染色,先低倍后高倍,必要时使用暗视野,禁用油镜。 (六)生物绘图 1、观察:目标的各部分比例关系、位置、结构特点。 2、起稿:在报告纸上确定画的位置与大小,用铅笔(2H 或 HB)轻勾轮廓线。 注意:(1)各部分之间的比例与物象一致。 (2)画面稍左,右侧留有注字空间;图下留有图题空间。 3、定稿:将轮廓线用实线连接起来
注意:线条粗细一致,清晰流畅,无接痕:用“点点衬阴”的方法,点的大小一致、疏密自然、禁止涂抹。4、文字标注在图下标明图的名称、放大倍数,在图的右侧引出平行的指示线,并注明结构名称。5、要求:一律用2H铅笔,正楷书写。(七练习1、徒手切片练习一一萝卜根,多多练习,熟能生巧。2、临时制片练习一一每人至少两片。3、撕片练习一一洋葱表皮。4、显微观察:严格按照显微镜的使用方法,由低倍到高倍依次进行,观察洋葱表皮细胞的结构。五、实验结果记录绘洋葱表皮细胞结构图(可绘2~3个相邻的细胞)。观察并注明的结构:细胞壁、细胞核、细胞质、液泡、核仁。比较两种植物的细胞结构的异同。细胞壁液泡细胞核细胞质图1洋葱表皮细胞结构图9
9 注意:线条粗细一致,清晰流畅,无接痕;用“点点衬阴”的方法,点的大小一致、 疏密自然、禁止涂抹。 4、文字标注 在图下标明图的名称、放大倍数,在图的右侧引出平行的指示线,并注明结构名称。 5、 要求:一律用 2H 铅笔,正楷书写。 (七)练 习 1、徒手切片练习——萝卜根,多多练习,熟能生巧。 2、临时制片练习——每人至少两片。 3、撕片练习——洋葱表皮。 4、显微观察:严格按照显微镜的使用方法,由低倍到高倍依次进行,观察洋葱表皮细 胞的结构。 五、实验结果记录 绘洋葱表皮细胞结构图(可绘 2~3 个相邻的细胞)。观察并注明的结构:细胞壁、细 胞核、细胞质、液泡、核仁。 比较两种植物的细胞结构的异同。 图 1 洋葱表皮细胞结构图 细胞壁 液泡 细胞核 细胞质
实验二植物组织类型及其细胞特征分析研究一实验目的:1、掌握植物体中各种组织(分生,薄壁,机械,输导,保护组织)的细胞组成、特征和分布。2、理解各种组织的生理功能及其与结构的关系。二实验仪器用品:常用仪器用品三实验材料:1、鲜材料:小麦叶片,菠菜叶片,芹菜叶柄、美人蕉叶鞘、悬铃木木质部离析材料、梨果肉石细胞离析材料等。2、玻片标本:根尖纵切片,蚕豆叶下表皮,南瓜茎纵切片。3、试剂:0.5%番红、0.2%固绿。四实验内容与方法1植物组织分为两类:分生组织:1顶端分生组织。2侧生分生组织。3居间分生组织。成熟组织:1保护组织:表皮,周皮。2薄壁组织:同化组织,储藏组织,通气组织等。3机械组织:厚角组织,厚壁组织---石细胞、纤维。4输导组织:木质部导管、管胞,韧皮部筛管。5分泌组织:外部的分泌结构---腺表皮,腺毛,蜜腺,排水器;内部的分泌组织-—分泌细胞,分泌腔,分泌道,乳汁管。(一)分生组织1.取材:洋葱根尖,长约5mm。在固定离析液(等量的浓盐酸和95%的酒精混合)处理10--20分钟,水冲洗。2.临时制片:用压片法。将根尖放入载玻片上,用镊子将根尖压裂,用一滴染液染色,盖上盖玻片,再用镊子轻压盖玻片,使根尖压散,吸水纸吸去盖玻片周围多余的水分。(若染液影响观察时,可在盖玻片一侧加一滴清水。然后用吸水纸从盖玻片另一侧吸去多余的染液)10
10 实验二 植物组织类型及其细胞特征分析研究 一 实验目的: 1、掌握植物体中各种组织(分生,薄壁,机械,输导,保护组织)的细胞组成、特征 和分布。 2、理解各种组织的生理功能及其与结构的关系。 二 实验仪器用品:常用仪器用品 三 实验材料: 1、鲜材料:小麦叶片,菠菜叶片,芹菜叶柄、美人蕉叶鞘、悬铃木木质部离析材料、 梨果肉石细胞离析材料等。 2、 玻片标本:根尖纵切片,蚕豆叶下表皮,南瓜茎纵切片。 3、 试剂:0.5% 番红、0.2% 固绿。 四 实验内容与方法 I 植物组织分为两类: 分生组织: 1 顶端分生组织。2 侧生分生组织。3 居间分生组织。 成熟组织: 1 保护组织:表皮,周皮。 2 薄壁组织:同化组织,储藏组织,通气组织等。 3 机械组织:厚角组织,厚壁组织-石细胞、纤维。 4 输导组织:木质部导管、管胞,韧皮部筛管。 5 分泌组织:外部的分泌结构-腺表皮,腺毛,蜜腺,排水器; 内部的分泌组织-分泌细胞,分泌腔,分泌道,乳汁管。 (一)分生组织 1. 取材:洋葱根尖,长约 5 mm。在固定离析液(等量的浓盐酸和 95%的酒精混合) 处理 10-20 分钟,水冲洗。 2. 临时制片:用压片法。将根尖放入载玻片上,用镊子将根尖压裂,用一滴染液染 色,盖上盖玻片,再用镊子轻压盖玻片,使根尖压散,吸水纸吸去盖玻片周围多 余的水分。(若染液影响观察时,可在盖玻片一侧加一滴清水。然后用吸水纸从 盖玻片另一侧吸去多余的染液)