3.仪器或其他用具：显微镜、擦镜纸、接种环、接种钩、载玻片、盖玻片等。四、实验方法与步骤：霉菌形态的观察一一直接制片观察法观察霉菌时，除直接观察斜面或平血的菌落外，制取霉菌标本时，由手菌丝粗大而且抱子很容易分散，放在水中观察细胞容易变形，因此，在制作标本时不用水，而用乳酸石炭酸溶液。取霉菌菌丝时，用接种环（钩）挑取时，要选择长有无性孢子的菌丝来观察。1.根霉的形态观察根霉由营养菌丝体产生匍匐菌丝向四周蔓延，并由匍甸菌丝生出假根接触培养基，与假根相对方向上生长出孢囊梗，在其顶端形成孢子囊，内生孢囊孢子。根霉的菌丝内部无横隔，只有在匍匐菌丝上形成厚垣孢子时才发生横隔。孢子囊成熟后破裂，在孢子囊的囊轴明显呈球性或近似球形。囊轴基部与柄相连出成囊托。(1）用肉眼观察根霉在斜面或平皿上的生长情况。(2）置培养皿于显微镜下，用低倍镜观察孢子囊柄，孢子囊，假根等形态。(3）在洁净的载玻片上，滴加乳酸石炭酸液一滴，用接种针钩挑取少量菌丝体，加盖盖玻片，置于显微镜下观察孢子囊柄、囊轴、孢子形状和厚垣孢子等形态。2.毛霉形态观察毛霉的菌丝体大多数为单细胞，在基物上或基物内能广泛的蔓延，无假根和匍甸菌丝。孢囊梗直接由菌丝体生出，一般单生，分枝或较少不分枝的。分枝顶端都产生孢子囊，孢子囊呈球形、椭圆形。大多数种类孢子囊成熟后，其壁易消失或破裂，但留有残迹，囊内部有囊轴。(1）用肉眼观察毛霉在斜面或平皿上的生长情况。（2）置培养皿于显微镜下，用低倍镜观察孢子囊柄的粗细，孢子囊形状、大小、色泽。（3）制片（方法同上）观察孢子囊柄、囊轴、孢子囊孢子及厚垣孢子的形态。3.曲霉形态观察曲霉的营养菌丝体由具横隔的分枝菌丝构成，无色或有明亮的颜色。分生孢子梗是从特化了的厚壁、而膨大的菌丝细胞（足细胞）生出，并略垂直于足细胞的长轴。分生孢子梗大都无横隔，常在顶部膨大成可孕性顶囊，顶囊表面产生小梗，放射生出。分生孢子自小梗顶端相继形成，最后成为不分枝的链。由顶囊、小梗以及分生孢子链构成分生孢子头，具有各种不同的颜色和形状，如球形、放射形、棍棒形或直柱形等。(1）用肉眼观察曲霉在斜面或平皿上的生长情况。(2））用低倍镜观察长于培养基上的曲霉的分生孢子形状
3. 仪器或其他用具：显微镜、擦镜纸、接种环、接种钩、载玻片、盖玻片等。 四、实验方法与步骤： 霉菌形态的观察——直接制片观察法 观察霉菌时，除直接观察斜面或平皿的菌落外，制取霉菌标本时，由于菌丝粗大而且孢子很 容易分散，放在水中观察细胞容易变形，因此，在制作标本时不用水，而用乳酸石炭酸溶液。 取霉菌菌丝时，用接种环（钩）挑取时，要选择长有无性孢子的菌丝来观察。 1. 根霉的形态观察 根霉由营养菌丝体产生匍匐菌丝向四周蔓延，并由匍匐菌丝生出假根接触培养基，与假 根相对方向上生长出孢囊梗，在其顶端形成孢子囊，内生孢囊孢子。 根霉的菌丝内部无横隔，只有在匍匐菌丝上形成厚垣孢子时才发生横隔。孢子囊成熟后 破裂，在孢子囊的囊轴明显呈球性或近似球形。囊轴基部与柄相连出成囊托。 （1） 用肉眼观察根霉在斜面或平皿上的生长情况。 （2） 置培养皿于显微镜下，用低倍镜观察孢子囊柄，孢子囊，假根等形态。 （3） 在洁净的载玻片上，滴加乳酸石炭酸液一滴，用接种针钩挑取少量菌丝体，加 盖盖玻片，置于显微镜下观察孢子囊柄、囊轴、孢子形状和厚垣孢子等形态。 2. 毛霉形态观察 毛霉的菌丝体大多数为单细胞，在基物上或基物内能广泛的蔓延，无假根和匍匐菌丝。 孢囊梗直接由菌丝体生出，一般单生，分枝或较少不分枝的。分枝顶端都产生孢子囊， 孢子囊呈球形、椭圆形。大多数种类孢子囊成熟后，其壁易消失或破裂，但留有残迹， 囊内部有囊轴。 （1） 用肉眼观察毛霉在斜面或平皿上的生长情况。 （2） 置培养皿于显微镜下，用低倍镜观察孢子囊柄的粗细，孢子囊形状、大小、色 泽。 （3） 制片（方法同上）观察孢子囊柄、囊轴、孢子囊孢子及厚垣孢子的形态。 3. 曲霉形态观察 曲霉的营养菌丝体由具横隔的分枝菌丝构成，无色或有明亮的颜色。分生孢子梗是 从特化了的厚壁、而膨大的菌丝细胞（足细胞）生出，并略垂直于足细胞的长轴。分生 孢子梗大都无横隔，常在顶部膨大成可孕性顶囊，顶囊表面产生小梗，放射生出。分生 孢子自小梗顶端相继形成，最后成为不分枝的链。由顶囊、小梗以及分生孢子链构成分 生孢子头，具有各种不同的颜色和形状，如球形、放射形、棍棒形或直柱形等。 （1） 用肉眼观察曲霉在斜面或平皿上的生长情况。 （2） 用低倍镜观察长于培养基上的曲霉的分生孢子形状
制片（方法同上），用接种钩挑取菌落边缘的嫩菌丝，小心放在载玻片上，观(3)察菌丝有无横隔及分生孢子着生情况。必要时用水或酒精洗去部分分生孢子。4.青霉形态观察青霉的营养菌丝体无色，淡色或鲜明的颜色，具横隔，气生菌丝密毡状，松絮状或部分结成菌丝索。分生孢子梗由埋伏型或气生型菌丝生出，稍垂直于该菌丝，其先端牛有扫常状的分枝轮称为带状枝。带状枝是由单轮或二次到多次分枝系统构成，对称或不对称，最后一级分枝产生孢子的细胞称为小梗。着生小梗的细胞称为梗基，支持梗基的细胞称为副枝。小梗用断离法产生分生孢子，形成不分枝的链。(1）用肉眼观察青霉菌菌落的颜色，组成同心环，汗珠，及菌落背面的颜色。（2）用低倍镜观察长于培养血中青霉菌状的形态。制片（同前述）观察菌丝的分隔情况，分生孢子柄，粗枝，细枝，大梗，小梗，分生孢子的形状、颜色。五、实验报告霉菌形态的观察：把所有观察到的根霉、毛霉、曲霉、青霉绘图并注明各部分的名称六、思考题1.列表比较各类霉菌在形态结构上有何异同？2.你认为在显微镜下，细菌、放线菌、酵母菌和霉菌的主要区别是什么？
（3） 制片（方法同上），用接种钩挑取菌落边缘的嫩菌丝，小心放在载玻片上，观 察菌丝有无横隔及分生孢子着生情况。必要时用水或酒精洗去部分分生孢子。 4. 青霉形态观察 青霉的营养菌丝体无色，淡色或鲜明的颜色，具横隔，气生菌丝密毡状，松絮状或 部分结成菌丝索。分生孢子梗由埋伏型或气生型菌丝生出，稍垂直于该菌丝，其先端生 有扫帚状的分枝轮称为帚状枝。帚状枝是由单轮或二次到多次分枝系统构成，对称或不 对称，最后一级分枝产生孢子的细胞称为小梗。着生小梗的细胞称为梗基，支持梗基的 细胞称为副枝。小梗用断离法产生分生孢子，形成不分枝的链。 （1） 用肉眼观察青霉菌菌落的颜色，组成同心环，汗珠，及菌落背面的颜色。 （2） 用低倍镜观察长于培养皿中青霉菌帚状的形态。 制片（同前述）观察菌丝的分隔情况，分生孢子柄，粗枝，细枝，大梗，小梗，分生孢 子的形状、颜色。 五、实验报告 霉菌形态的观察： 把所有观察到的根霉、毛霉、曲霉、青霉绘图并注明各部分的名称 六、思考题 1. 列表比较各类霉菌在形态结构上有何异同？ 2. 你认为在显微镜下，细菌、放线菌、酵母菌和霉菌的主要区别是什么？
实验六微生物大小的测定一、目的要求1.掌握使用显微测微计测定微生物细胞大小的方法。2．增强微生物细胞大小的感性认识。二、基本原理微生物细胞大小，是微生物的形态特征之一，也是分类鉴定的依据之一。由于菌体很小，只能在显微镜下测量。用来测量微生物大小的工具有目镜测微尺和镜台测微尺，如图6-1。镜台测微尺目镜测微尺镜台测微尺利用目镜测微尺测定镜测定微生物大小台测微尺的每格绝对值BAcD图6-1目镜测微尺（A）、镜台测微尺（B）及其校正（C）与测量（D）镜台测微尺（图6-1，A）是中央部分刻有精确等分线的载玻片。一般1mm等分为100格，每格长0.01mm（即10μm）。镜台测微尺并不直接用来测量细胞的大小，而是用于校正目镜测微尺每格的相对长度。目镜测微尺（图6-1，B）是一块可放入接目镜内的圆形小玻片，其中央有精确的等分刻度，分为50小格和100小格两种。测量时，需将其放在接目镜的隔板上，用以测量经显微镜放大后的细胞物象。由于不同显微镜或不同的目镜和物镜组合放大倍数不同，目镜测微尺每小格所代表的实际长度也不一样。因此，用目镜测微尺测量微生物大小时，必须先用镜台测微尺进行校正，以求出该显微镜在一定放大倍数的目镜和物镜下，目镜测微尺每小格所代表的相对长度。然后根据微生物细胞相当于目镜测微尺的格数，即可计算出细胞的实际大小。球菌用直径来表示其大小：杆菌、酵母菌则用宽和长的范围来表示
实验六 微生物大小的测定 一、目的要求 1． 掌握使用显微测微计测定微生物细胞大小的方法。 2． 增强微生物细胞大小的感性认识。 二、基本原理 微生物细胞大小，是微生物的形态特征之一，也是分类鉴定的依据之一。由于菌体很小， 只能在显微镜下测量。用来测量微生物大小的工具有目镜测微尺和镜台测微尺，如图 6 -1。 图 6-1 目镜测微尺（A）、镜台测微尺（B）及其校正（C）与测量（D） 镜台测微尺（图 6-1，A）是中央部分刻有精确等分线的载玻片。一般 1mm 等分为 100 格，每格长 0.01mm（即 10μm）。镜台测微尺并不直接用来测量细胞的大小，而是用于校正 目镜测微尺每格的相对长度。 目镜测微尺（图 6-1，B）是一块可放入接目镜内的圆形小玻片，其中央有精确的等分 刻度，分为 50 小格和 100 小格两种。测量时，需将其放在接目镜的隔板上，用以测量经显 微镜放大后的细胞物象。由于不同显微镜或不同的目镜和物镜组合放大倍数不同，目镜测微 尺每小格所代表的实际长度也不一样。因此，用目镜测微尺测量微生物大小时，必须先用镜 台测微尺进行校正，以求出该显微镜在一定放大倍数的目镜和物镜下，目镜测微尺每小格所 代表的相对长度。然后根据微生物细胞相当于目镜测微尺的格数，即可计算出细胞的实际大 小。 球菌用直径来表示其大小；杆菌、酵母菌则用宽和长的范围来表示
三、实验材料：1.菌种：酵母菌（Saccharomyces.sp）培养液。2．仪器或其他用具：显微镜、目镜测微尺、镜台测微尺、载玻片、盖玻片等。四、实验方法与步骤：1.目镜测微尺的校正：（1）放镜台测微尺将镜台测微尺有刻度的一面朝上放在显微镜载物台上，不可放反。（2）校正先用低倍镜观察，调整焦距，当清晰的看到镜台测微尺的刻度后，转动目镜，使目镜测微尺的刻度与镜台测微尺的刻度平行。利用移动器移动镜台测微尺，使两尺在某一区域内两线完全重合，然后分别数出两重合线之间镜台测微尺和目镜测微尺所占的格数（图6-1，C)。用同样的方法换成高倍镜进行校正。（3）计算由于已知镜台测微尺每格长10μm，根据下列公式即可分别计算出在不同放大倍数下，目镜测微尺每格所代表的长度。目镜测微计每格长度（μm）二两重合线之间镜台测微尺的格数×10两重合线之间目镜测微尺格数2.微生物大小的测定：目镜测微尺校正完毕后，取下镜台测微尺。在载玻片上滴加一滴酵母菌悬浮液，再盖上盖玻片（注意：避免产生气泡），然后置于载物台上。调整焦距，先用低倍镜测定，再用高倍镜测定。测定时通过转动目镜测微尺和移动载玻片，测出酵母菌的长、宽所占目镜测微尺的格数，最后将所测得的格数乘以目镜测微尺相应倍数下每格所代表的长度，即为该酵母菌的实际长度。通常测定对数生长期的菌体来代表该菌的大小。选择具有代表性的5个细胞进行测定。3.测定完毕将镜台测微尺用擦镜纸擦拭干净，放回盒内保存，同时正确清理、维护显微镜。五、实验报告：1.将自镜测微尺的校正结果填入下表：表1.目镜测微尺的校正
三、实验材料： 1． 菌种：酵母菌（Saccharomyces.sp）培养液。 2． 仪器或其他用具：显微镜、目镜测微尺、镜台测微尺、载玻片、盖玻片等。 四、实验方法与步骤： 1. 目镜测微尺的校正： （1）放镜台测微尺 将镜台测微尺有刻度的一面朝上放在显微镜载物台上，不可放反。 （2）校正 先用低倍镜观察，调整焦距，当清晰的看到镜台测微尺的刻度后，转动目镜，使目镜 测微尺的刻度与镜台测微尺的刻度平行。利用移动器移动镜台测微尺，使两尺在某一区域内 两线完全重合，然后分别数出两重合线之间镜台测微尺和目镜测微尺所占的格数（图 6-1， C）。 用同样的方法换成高倍镜进行校正。 （3）计算 由于已知镜台测微尺每格长 10μm，根据下列公式即可分别计算出在不同放大倍数下， 目镜测微尺每格所代表的长度。 目镜测微计每格长度（μm）＝ 2. 微生物大小的测定： 目镜测微尺校正完毕后，取下镜台测微尺。在载玻片上滴加一滴酵母菌悬浮液，再盖上盖玻 片（注意：避免产生气泡），然后置于载物台上。调整焦距，先用低倍镜测定，再用高倍镜 测定。测定时通过转动目镜测微尺和移动载玻片，测出酵母菌的长、宽所占目镜测微尺的格 数，最后将所测得的格数乘以目镜测微尺相应倍数下每格所代表的长度，即为该酵母菌的实 际长度。 通常测定对数生长期的菌体来代表该菌的大小。选择具有代表性的 5 个细胞进行测定。 3. 测定完毕 将镜台测微尺用擦镜纸擦拭干净，放回盒内保存，同时正确清理、维护显微镜。 五、实验报告： 1. 将目镜测微尺的校正结果填入下表： 表 1. 目镜测微尺的校正 两重合线之间镜台测微尺的格数×10 两重合线之间目镜测微尺格数
接物镜接物镜倍数目镜测微尺镜台测微尺目镜测微尺每格所代表格数格数的长度（μm）低倍镜高倍镜2酵母菌测定结果填入下表：表2.酵母菌的大小测定结果宽长接物镜目镜测微酵母菌菌体大小范围倍数尺每格所编号(μm)目镜测微长度目镜测微长度代表的长尺格数(μm)尺格数(μm)度(μm)1低倍镜2345-高倍镜2345六、思考题：1.为什么使用不同放大倍数的目镜或物镜时，必须用镜台测微尺重新对自镜测微尺进行校正?在不改变目镜和自镜测微尺，而改用不同放大倍数的物镜来测定同一菌体的大小时，其测定结果是否相同？为什么？
接物镜 接物镜倍数 目镜测微尺 格数 镜台测微尺 格数 目镜测微尺每格所代表 的长度（μm） 低倍镜 高倍镜 2. 酵母菌测定结果填入下表： 表 2. 酵母菌的大小测定结果 接物镜 宽 长 倍数 目镜测微 尺每格所 代表的长 度（μm） 酵母菌 编号 目镜测微 尺格数 长度 （μm） 目镜测微 尺格数 长度 （μm） 菌体大小范围 （μm） 1 2 3 4 低倍镜 5 1 2 3 4 高倍镜 5 六、思考题： 1. 为什么使用不同放大倍数的目镜或物镜时，必须用镜台测微尺重新对目镜测微尺进行校 正？ 在不改变目镜和目镜测微尺，而改用不同放大倍数的物镜来测定同一菌体的大小时，其测定 结果是否相同？为什么？